大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法技术

大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法，它涉及大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法。本发明专利技术是要解决现有大兴安岭天然笃斯越橘组培的试管苗纤细，生长势弱，难于生根移栽，成活率低的问题。方法一、诱导培养；二、分化培养；三、壮苗培养。通过植入本发明专利技术的培养基及培养方法，经过60天的复壮培养，直径可增粗约68.7％，极大地提高了组培苗移栽成活率，减少了生产浪费，降低了生产成本。本发明专利技术用于大兴安岭天然笃斯越橘壮苗培养。

【技术实现步骤摘要】
大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法
本专利技术涉及大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法。
技术介绍
笃斯越橘果实富含多种维生素、矿物质营养丰富的美味水果。同时，具有清除体内自由基延缓衰老、抗癌、增强人体免疫等特殊功效，被誉为“世界第三代水果之王”。大兴安岭地区的天然笃斯越橘具有蓝皮蓝肉的特点，花青素含量更高，更适合产品的深加工；并且乡土品种完全适应当地寒冷的气候特点，冬季无需额外保暖处理即可安全越冬，减少人力物力的损耗，非常具有发展前途。但是由于人们掠夺式采摘，致使大兴安岭地区天然笃斯越橘资源遭到严重破坏，自然恢复力低，采种困难，种子质量差导致不出苗、出苗少的现象。建立完善的组培快繁体系可以从根本上解决这一问题。迄今，有关笃斯越橘组培技术的报道已经较多，但多数集中在栽培品种的组织快繁配方及瓶外生根技术方面，对于大兴安岭地区天然乡土笃斯越橘的研究较少。由于天然笃斯越橘品种特性，组培出来的试管苗纤细，生长势弱，难于生根移栽，严重制约了苗木的成活率。大兴安岭天然笃斯越橘为蓝皮蓝肉品种不仅果肉含花色苷，果皮中同样含有这类对人体有保健功能的这类物质，因此其果实非常适合产品深加工，但由于天然笃斯越橘品种本身的生物特性，其长势远逊于外来引进栽培品种，因此通过现有栽培品种的培养基培育的试管苗同样茎秆也很细弱、柔嫩，叶小色浅，苗木移栽成活率低，达不到生产需要的水平。本专利技术提出了一种大兴安岭地区天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法和配方，提高试管苗的出瓶率，从而降低生产成本，推动乡土树种的发展。
技术实现思路
本专利技术是要解决现有大兴安岭天然笃斯越橘组培的试管苗纤细，生长势弱，难于生根移栽，成活率低的问题，而提供大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法。大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法具体是按以下步骤进行：一、诱导培养：以大兴安岭天然笃斯越橘的腋芽为外植体，将笃斯越橘的腋芽通过常规组培消毒后在超净工作台中将其转至诱导培养基中进行诱导培养18d～22d，得到诱导培养后的腋芽；二、分化培养：将步骤一得到的诱导培养后的腋芽转移至分化培养基中进行分化培养50d～70d，得到笃斯越橘细弱苗；所述笃斯越橘幼苗的平均高度为6cm；三、壮苗培养：将壮苗培养基灌注到带盖果酱瓶中，在温度为121.5℃、压力为103.42kPa的条件下灭菌20min，冷却凝固后，得到凝固的壮苗培养基，然后将步骤二得到的笃斯越橘细弱苗接种至凝固的壮苗培养基中，然后置于培养室中进行培养，即完成大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养；所述培养的条件为：培养温度白天为22℃，夜间为18℃，培养室的光照强度为日光灯2000LUX，每天光照14h，暗培养10h，培养15天，然后转置全光照智能温室培养45天。本专利技术的有益效果是：本专利技术通过改良基础培养基配方，适当添加激素、蔗糖、琼脂的使用量，适当降低PH值、提高光照强度的改良培养方法，使得细弱苗的粗壮度提高68.7％，减少了生产浪费，降低了生产成本，提升了组培苗的有效利用率。具体实施方式具体实施方式一：本实施方式大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法具体是按以下步骤进行：一、诱导培养：以大兴安岭天然笃斯越橘的腋芽为外植体，将笃斯越橘的腋芽通过常规组培消毒后在超净工作台中将其转至诱导培养基中进行诱导培养18d～22d，得到诱导培养后的腋芽；二、分化培养：将步骤一得到的诱导培养后的腋芽转移至分化培养基中进行分化培养50d～70d，得到笃斯越橘细弱苗；所述笃斯越橘幼苗的平均高度为6cm；三、壮苗培养：将壮苗培养基灌注到带盖果酱瓶中，在温度为121.5℃、压力为103.42kPa的条件下灭菌20min，冷却凝固后，得到凝固的壮苗培养基，然后将步骤二得到的笃斯越橘细弱苗接种至凝固的壮苗培养基中，然后置于培养室中进行培养，即完成大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养；所述培养的条件为：培养温度白天为22℃，夜间为18℃，培养室的光照强度为日光灯2000LUX，每天光照14h，暗培养10h，培养15天，然后转置全光照智能温室培养45天。具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤一中所述常规组培消毒是将笃斯越橘的腋芽经流水冲洗10min后，在超净工作台中加入0.1％HgCl2充分浸泡消毒2.5min，然后采用无菌水冲洗3次，并在无菌水中浸泡40min后取出，用无菌滤纸吸干材料表面水分。其他与具体实施方式一相同。具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同的是：步骤一中所述诱导培养基为：DY基本培养基+玉米素0.5mg/L+蔗糖25g/L～35g/L+强度为1400g/cm2的琼脂6.0g/L～7.0g/L，pH值为5.5～6.0；所述DY基本培养基中KNO3的含量为180mg/L～200mg/L、NH4NO3的含量为400mg/L～410mg/L、MgSO4·7H2O的含量为365mg/L～380mg/L、KH2PO4的含量为160mg/L～180mg/L、Ca(NO3)2·4H2O的含量为680mg/L～690mg/L、H3BO3的含量为6.3mg/L、MnSO4·4H2O的含量为22.4mg/L、ZnSO4·7H2O的含量为8.5mg/L、Na2MoO4·2H2O的含量为0.24mg/L、CuSO4·5H2O的含量为0.24mg/L、C10H13FeN2NaO8的含量为73mg/L～74mg/L、Na2EDTA的含量为37mg/L～38mg/L、盐酸硫胺素的含量为0.05mg/L～0.15mg/L、烟酸的含量为0.45mg/L～0.55mg/L、盐酸吡哆醇的含量为0.5mg/L～0.6mg/L、肌醇的含量为90mg/L～110mg/L、甘氨酸的含量为1.5mg/L～2.5mg/L。其他与具体实施方式一或二相同。本实施方式中玉米素、蔗糖、强度为1400g/cm2的琼脂、KNO3、NH4NO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4、Ca(NO3)2·4H2O、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、C10H13FeN2NaO8、Na2EDTA、盐酸硫胺素、烟酸、盐酸吡哆醇、肌醇和甘氨酸的浓度都是相对于诱导培养基定量的。具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：步骤一中所述诱导培养基为：DY基本培养基+玉米素0.5mg/L+蔗糖30g/L+强度为1400g/cm2的琼脂6.0g/L，pH值为5.8；所述DY基本培养基中KNO3的含量为190mg/L、NH4NO3的含量为405mg/L、MgSO4·7H2O的含量为375mg/L、KH2PO4的含量为175mg/L、Ca(NO3)2·4H2O的含量为684mg/L、H3BO3的含量为6.3mg/L、MnSO4·4H2O的含量为22.4mg/L、ZnSO4·7H2O的含量为8.5mg/L、Na2MoO4·2H2O的含量为0.24mg/L、CuSO4·5H2O的含量为0.24mg/L、C10H13FeN2NaO8的含量为73.5mg/L、Na2EDTA的含量为37.3mg/L、盐酸硫胺素的含量为0.1mg/L、烟酸的含量为0.55mg/L、盐酸吡哆醇的含量为0.55mg/L、肌醇的含量为110mg/本文档来自技高网...

【技术保护点】
大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法，其特征在于大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法具体是按以下步骤进行：一、诱导培养：以大兴安岭天然笃斯越橘的腋芽为外植体，将笃斯越橘的腋芽通过常规组培消毒后在超净工作台中将其转至诱导培养基中进行诱导培养18d～22d，得到诱导培养后的腋芽；二、分化培养：将步骤一得到的诱导培养后的腋芽转移至分化培养基中进行分化培养50d～70d，得到笃斯越橘细弱苗；所述笃斯越橘幼苗的平均高度为6cm；三、壮苗培养：将壮苗培养基灌注到带盖果酱瓶中，在温度为121.5℃、压力为103.42kPa的条件下灭菌20min，冷却凝固后，得到凝固的壮苗培养基，然后将步骤二得到的笃斯越橘细弱苗接种至凝固的壮苗培养基中，然后置于培养室中进行培养，即完成大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养；所述培养的条件为：培养温度白天为22℃，夜间为18℃，培养室的光照强度为日光灯2000LUX，每天光照14h，暗培养10h，培养15天，然后转置全光照智能温室培养45天。

【技术特征摘要】
1.大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法，其特征在于大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养方法具体是按以下步骤进行：一、诱导培养：以大兴安岭天然笃斯越橘的腋芽为外植体，将笃斯越橘的腋芽通过常规组培消毒后在超净工作台中将其转至诱导培养基中进行诱导培养18d～22d，得到诱导培养后的腋芽；二、分化培养：将步骤一得到的诱导培养后的腋芽转移至分化培养基中进行分化培养50d～70d，得到笃斯越橘细弱苗；所述笃斯越橘幼苗的平均高度为6cm；三、壮苗培养：将壮苗培养基灌注到带盖果酱瓶中，在温度为121.5℃、压力为103.42kPa的条件下灭菌20min，冷却凝固后，得到凝固的壮苗培养基，然后将步骤二得到的笃斯越橘细弱苗接种至凝固的壮苗培养基中，然后置于培养室中进行培养，即完成大兴安岭天然笃斯越橘试管壮苗的培养；所述培养的条件为：培养温度白天为22℃，夜间为18℃，培养室的光照强度为日光灯2000LUX，每天光照14h，暗培养10h，培养15天，然后转置全光照智能温室培养45天；步骤一中所述诱导培养基为：DY基本培养基+玉米素0.5mg/L+蔗糖25g/L～35g/L+强度为1400g/cm2的琼脂6.0g/L～7.0g/L，pH值为5.5～6.0；所述DY基本培养基中KNO3的含量为180mg/L～200mg/L、NH4NO3的含量为400mg/L～410mg/L、MgSO4·7H2O的含量为365mg/L～380mg/L、KH2PO4的含量为160mg/L～180mg/L、Ca(NO3)2·4H2O的含量为680mg/L～690mg/L、H3BO3的含量为6.3mg/L、MnSO4·4H2O的含量为22.4mg/L、ZnSO4·7H2O的含量为8.5mg/L、Na2MoO4·2H2O的含量为0.24mg/L、CuSO4·5H2O的含量为0.24mg/L、C10H13FeN2NaO8的含量为73mg/L～74mg/L、Na2EDTA的含量为37mg/L～38mg/L、盐酸硫胺素的含量为0.05mg/L～0.15mg/L、烟酸的含量为0.45mg/L～0.55mg/L、盐酸吡哆醇的含量为0.5mg/L～0.6mg/L、肌醇的含量为90mg/L～110mg/L、甘氨酸的含量为1.5mg/L～2.5mg/L；步骤二中所述分化培养基为：DY基本培养基+玉米素0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖25g/L～35g/L+强度为1400g/cm2的琼脂6.0g/L～7.0g/L，pH值为5.5～6.0；所述DY基本培养基中KNO3的含量为180mg/L～200mg/L、NH4NO3的含量为400mg/L～410mg/L、MgSO4·7H2O的含量为365mg/L～380mg/L、KH2PO4的含量为160mg/L～180mg/L、Ca(NO3)2·4H2O的含量为680mg/L～690mg/L、H3BO3的含量为6.3mg/L、MnSO4·4H2O的含量为22.4mg/L、ZnSO4·7H2O的含量为8.5mg/L、Na2MoO4·2H2O的含量为0.24mg/L、CuSO4·5H2O的含量为0.24mg/L、C10H13FeN2NaO8的含量为73mg/L～74mg/L、Na2EDTA的含量为37mg/L～38mg/L、盐酸硫胺素的含量为0.05mg/L～0.15mg/L、烟酸的含量为0.45mg/L～0.55mg/L、盐酸吡哆醇的含量为0.5mg/L～0.6mg/L、肌醇的含量为90mg/L～110mg/L、甘氨酸的含量为1.5mg/L～2.5mg/L；步骤三中所述壮苗培养基为：DY基本培养基+玉米素0.5mg/L+激动素1.0mg/L+蔗糖25g/L～35g/L+强度为1400g/cm2的琼脂6.0g/L～7.0g/L，pH值为5.5～6.0；所述DY基本培养基中KNO3的含量为180mg/L～200mg/L、NH4NO3的含量为400mg/L～410mg/L、MgSO4·7H2O的含量为365mg/L～380mg/L、KH2PO4的含量为160mg/L～180mg/L、Ca(NO3)2·4H2O的含量为680mg/L～690mg/L、H3BO3的含量为6.3mg/L、MnSO4·4H2O的含量为22.4mg/L、ZnSO4·7H2O的含量为8.5mg/L、Na2MoO4·2H2O的含量为0.24mg/L、CuSO4·5H2O的含量为0.24mg/L、C...

【专利技术属性】
技术研发人员：田新华，李京，张建瑛，翁海龙，卢慧颖，李艳霞，邢亚娟，
申请(专利权)人：黑龙江省林业科学研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23