用于莱克多巴胺的分析测试方法技术

本发明专利技术提供了用于莱克多巴胺的分析测试方法，建立了AAO‑MIP纳米管膜萃取与高效液相色谱联用的检测方法，并实现对复杂样品中β2‑肾上腺素受体激动剂的检测。

【技术实现步骤摘要】
用于莱克多巴胺的分析测试方法
本专利技术涉及一种用于莱克多巴胺的分析测试方法。
技术介绍
莱克多巴胺(Ractopamine，RAC)属于β2-肾上腺素受体激动剂类药物，能促进动物肌肉生长和蛋白质堆积，但是，过量使用会导致其在动物组织中累积，可能人类健康产生负面影响。因此，对样品中莱克多巴胺(RAC)的残留量进行检测显得尤为重要。目前用于莱克多巴胺的检测方法有气相色谱法、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法、分子印迹聚合物萃取-液相色谱联用和分子印迹聚合物电化学传感器等。无论用何种分析方法，为降低检出限和消除干扰，富集和洗脱的步骤都是必需的。分子印迹技术能够设计和构建对目标分子实现特异性识别的三维空穴的体系。有相关的研究显示，有相当部分的研究将莱克多巴胺的MIP用作吸附剂。虽然这些方法操作简便，且能选择性地提取β2-肾上腺素受体激动剂，但是吸附量并不高。因此，建立一种对于监测β2-肾上腺素受体激动剂的简便、高选择性、高效、稳定的预处理方法显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术的目的是在于克服现有技术的不足，提供了用于莱克多巴胺的分析测试方法。为了解决上述存在的技术问题，本专利技术采用下述技术方案：本专利技术为用于莱克多巴胺的分析测试方法，步骤如下：A、将氧化铝膜进行ATRP引发剂表面修饰处理；B、在氧化铝膜上利用原子转移自由基聚合的方法合成莱克多巴胺，制备AAO-MIP纳米管膜；C、制备猪肉样品；D、在猪肉样品中加入2.0μg/g的莱克多巴胺，加入20μg/g的莱克多巴胺类似物，所述的莱克多巴胺类似物为克仑特罗(Clenbuterol)、特布他林(Terbutaline)、肾上腺素(Epinephrine)或多巴胺(Dopamine)；E、在猪肉样品中加入10～20mL乙腈饱和正己烷溶液；F、在猪肉样品中加入1～3mL4mol/L的碳酸钾溶液，使蛋白质变性，取出脂肪酸和水；G、将乙腈溶液、碳酸钾溶液与猪肉样品混合，去除猪肉样品中的脂肪，制得混合物；H、将混合物进行剧烈震荡，震荡时间为5～10分钟，使乙腈层析出；I、加入20～25mL饱和NaCl溶液，以防止发生混合物发生乳化；J、将上述混合物在3～8℃下，在每分钟5000转的离心机中离心20分钟，分离出乙腈相；K、将分离乙腈后的混合物残渣用Na2SO4进行干燥；L、将干燥后的混合物残渣用2～5mL的乙腈洗涤；M、将混合物残渣中的乙腈蒸干，再用5～10mL甲醇溶解并用AAO-MIP纳米管膜萃取，AAO-MIP纳米管膜采用甲醇：乙酸(v/v)＝9:1作为洗脱模板；N、将萃取后的样品残渣用HPLC进行检测，分析样品中的莱克多巴胺及其类似物标准物的含量。在步骤N中，所述莱克多巴胺(RAC)用荧光检测器检测，所述的克仑特罗(Clenbuterol)、特布他林(Terbutaline)、肾上腺素(Epinephrine)或多巴胺(Dopamine)采用紫外光检测器检测。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术提供了用于莱克多巴胺的分析测试方法，建立了AAO-MIP纳米管膜萃取与HPLC联用检测的方法，并实现对复杂样品中β2-肾上腺素受体激动剂的检测。下面结合附图说明和具体实施方式对本专利技术作进一步的详细描述：【附图说明】图1为加标样品在223nm处的HPLC色谱图。【具体实施方式】本专利技术为用于莱克多巴胺的分析测试方法，步骤如下：O、将氧化铝膜进行ATRP引发剂表面修饰处理；P、在氧化铝膜上利用原子转移自由基聚合的方法合成莱克多巴胺，制备AAO-MIP纳米管膜；Q、制备猪肉样品；R、在猪肉样品中加入2.0μg/g的莱克多巴胺，加入20μg/g的莱克多巴胺类似物，所述的莱克多巴胺类似物为克仑特罗、特布他林、肾上腺素或多巴胺；S、在猪肉样品中加入10～20mL乙腈饱和正己烷溶液；T、在猪肉样品中加入1～3mL4mol/L的碳酸钾溶液，使蛋白质变性，取出脂肪酸和水；U、将乙腈溶液、碳酸钾溶液与猪肉样品混合，去除猪肉样品中的脂肪，制得混合物；V、将混合物进行剧烈震荡，震荡时间为5～10分钟，使乙腈层析出；W、加入20～25mL饱和NaCl溶液，以防止发生混合物发生乳化；X、将上述混合物在3～8℃下，在每分钟5000转的离心机中离心20分钟，分离出乙腈相；Y、将分离乙腈后的混合物残渣用Na2SO4进行干燥；Z、将干燥后的混合物残渣用2～5mL的乙腈洗涤；AA、将混合物残渣中的乙腈蒸干，再用5～10mL甲醇溶解并用AAO-MIP纳米管膜萃取，AAO-MIP纳米管膜采用甲醇：乙酸(v/v)＝9:1作为洗脱模板；BB、将萃取后的样品残渣用HPLC进行检测，分析样品中的莱克多巴胺及其类似物标准物的含量。在步骤N中，所述莱克多巴胺(RAC)用荧光检测器检测，所述的克仑特罗(Clenbuterol)、特布他林(Terbutaline)、肾上腺素(Epinephrine)或多巴胺(Dopamine)采用紫外光检测器检测。本专利技术提供了用于莱克多巴胺的分析测试方法，建立了AAO-MIP纳米管膜萃取与HPLC联用检测的方法，并实现对复杂样品中β2-肾上腺素受体激动剂的检测。实施例一用于莱克多巴胺的分析测试方法，步骤如下：A、将氧化铝膜进行ATRP引发剂表面修饰处理；B、在氧化铝膜上利用原子转移自由基聚合的方法合成莱克多巴胺，制备AAO-MIP纳米管膜；C、制备猪肉样品；D、在猪肉样品中加入1.5μg/g的莱克多巴胺，加入15μg/g的克伦特罗；E、在猪肉样品中加入10mL乙腈饱和正己烷溶液；F、在猪肉样品中加入1mL4mol/L的碳酸钾溶液，使蛋白质变性，取出脂肪酸和水；G、将乙腈溶液、碳酸钾溶液与猪肉样品混合，去除猪肉样品中的脂肪，制得混合物；H、将混合物进行剧烈震荡，震荡时间为5分钟，使乙腈层析出；I、加入20mL饱和NaCl溶液，以防止发生混合物发生乳化；J、将上述混合物在3℃下，在每分钟5000转的离心机中离心20分钟，分离出乙腈相；K、将分离乙腈后的混合物残渣用Na2SO4进行干燥；L、将干燥后的混合物残渣用2mL的乙腈洗涤；M、将混合物残渣中的乙腈蒸干，再用5mL甲醇溶解并用AAO-MIP纳米管膜萃取，AAO-MIP纳米管膜采用甲醇：乙酸(v/v)＝9:1作为洗脱模板；N、将萃取后的样品残渣用HPLC进行检测，分析样品中的莱克多巴胺及克伦特罗的含量。实施例二用于莱克多巴胺的分析测试方法，步骤如下：A、将氧化铝膜进行ATRP引发剂表面修饰处理；B、在氧化铝膜上利用原子转移自由基聚合的方法合成莱克多巴胺，制备AAO-MIP纳米管膜；C、制备猪肉样品；D、在猪肉样品中加入1.8μg/g的莱克多巴胺，加入18μg/g的特布他林；E、在猪肉样品中加入15mL乙腈饱和正己烷溶液；F、在猪肉样品中加入2mL4mol/L的碳酸钾溶液，使蛋白质变性，取出脂肪酸和水；G、将乙腈溶液、碳酸钾溶液与猪肉样品混合，去除猪肉样品中的脂肪，制得混合物；H、将混合物进行剧烈震荡，震荡时间为8分钟，使乙腈层析出；I、加入22mL饱和NaCl溶液，以防止发生混合物发生乳化；J、将上述混合物在5℃下，在每分钟5000转的离心机中离心20分钟，分离出乙腈相；K、将分离乙腈后的混合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于莱克多巴胺的分析测试方法，其特征在于，步骤如下：A、将氧化铝膜进行ATRP引发剂表面修饰处理；B、在氧化铝膜上利用原子转移自由基聚合的方法合成莱克多巴胺，制备AAO‑MIP纳米管膜；C、制备猪肉样品；D、在猪肉样品中加入2.0 μg/g的莱克多巴胺，加入20μg/g的莱克多巴胺类似物；E、在猪肉样品中加入10～20 mL乙腈饱和正乙烷溶液；F、在猪肉样品中加入1～3mL 4 mol/L的碳酸钾溶液，使蛋白质变性，取出脂肪酸和水；G、将乙腈溶液、碳酸钾溶液与猪肉样品混合，去除猪肉样品中的脂肪，制得混合物；H、将混合物进行剧烈震荡，震荡时间为5～10分钟，使乙腈层析出；I、加入20 ～25mL饱和NaCl溶液，以防止发生混合物发生乳化；J、将上述混合物在3～8℃下，在每分钟5000转的离心机中离心20 分钟，分离出乙腈相；K、将分离乙腈后的混合物残渣用Na2SO4进行干燥；L、将干燥后的混合物残渣用2～5 mL的乙腈洗涤；M、将混合物残渣中的乙腈蒸干，再用5～10 mL甲醇溶解并用AAO‑MIP纳米管膜萃取，AAO‑MIP纳米管膜采用甲醇：乙酸（v/v）=9:1作为洗脱模板；N、将萃取后的样品残渣用HPLC进行检测，分析样品中的莱克多巴胺及其类似物标准物的含量。...

【技术特征摘要】
1.用于莱克多巴胺的分析测试方法，其特征在于，步骤如下：A、将氧化铝膜进行ATRP引发剂表面修饰处理；B、在氧化铝膜上利用原子转移自由基聚合的方法合成莱克多巴胺，制备AAO-MIP纳米管膜；C、制备猪肉样品；D、在猪肉样品中加入2.0μg/g的莱克多巴胺，加入20μg/g的莱克多巴胺类似物，所述的莱克多巴胺类似物为克仑特罗、特布他林、肾上腺素或多巴胺；E、在猪肉样品中加入10～20mL乙腈饱和正己烷溶液；F、在猪肉样品中加入1～3mL4mol/L的碳酸钾溶液，使蛋白质变性，取出脂肪酸和水；G、将乙腈溶液、碳酸钾溶液与猪肉样品混合，去除猪肉样品中的脂肪，制得混合物；H、将混合物进行剧烈震荡，震荡时间为5～10分钟，使乙腈层析出；I、加入20～2...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈忻，梁勇，陈晓刚，赵亮亮，沈国权，潘嘉慧，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：广东;44