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一种使用新型分子信标检测人类端粒DNA长度的方法技术

技术编号:13381692 阅读:67 留言:0更新日期:2016-07-21 13:59
一种使用新型分子信标检测人类端粒DNA平均长度的方法,分子信标探针主体是一条28‑50个碱基构成的DNA单链,步骤:A.人类外周血2 ml,用酚氯仿法提取DNA,溶解于100微升5 mM Tris缓冲液(pH7.6),A260紫外线吸收法定量;B.取DNA5.0μg、分子信标探针(浓度为10 pM/μl)1.0μl、10 mM MgCl25.0μl、加入5 mM Tris缓冲液至总体积50μl;C.加热至摄氏95度,保持5分钟,用荧光光度计测定荧光强度;D.数据处理。本发明专利技术耗时短,检材消耗少,结果分析容易、清晰。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种使用新型分子信标检测人类端粒DNA长度的方法,其特征是:该方法具体的实现步骤及具体的探针设计:1)本分子信标探针主体是一条28‑50个碱基构成的DNA单链,由6个部分构成,分别是a. 荧光染料b. 5’茎段互补序列,含有4‑8个碱基,可以是任意序列,但必须与3’茎段互补序列互补c. 端粒DNA互补序列I ,含有12‑25个碱基d. 3’茎段互补序列,含有4‑8个碱基e. 湮灭基团f. 端粒DNA互补序列II,含有8‑15个碱基2)实验步骤:A.人类外周血2 ml,用酚氯仿法提取DNA,溶解于100微升5 mM Tris 缓冲液(pH 7.6),A260紫外线吸收法定量;B.取DNA                           5.0 μg分子信标探针(浓度为 10 pM/μl)     1.0 μl10 mM MgCl2                        5.0 μl加入 5 mM Tris缓冲液至总体积      50 μl ;C.加热至摄氏95度,保持5分钟,用荧光光度计测定荧光强度;D.数据处理:用本方法调查正常人群,获得的相应的荧光读数,建立相应群体的标准曲线,再将待测个体的数据与标准曲线比较,即可用于评估个体的衰老进程,健康状态。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:金泽明
申请(专利权)人:金泽明
类型:发明
国别省市:四川;51

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