微生物油的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种微生物油及其制备方法，其多不饱和脂肪酸的含量大于30wt%，甘油三酯含量小于90wt%，甘油二酯含量不低于5wt%且不高于20 wt%。其制备包括以下步骤：利用产油微生物发酵得到富含PUFA微生物油的发酵液；收集富含PUFA微生物油的菌体，萃取过滤后得到混合油；在混合油中加入脂肪酶和水进行酶解，纯化后得到微生物油，或向混合油中添加含有甘油二酯的混合物，混合均匀后去除溶剂得到微生物油。其含有适量的甘油二酯，有利于微生物油形成稳定的乳化液。在制备微胶囊的过程中，能使微生物油更好地被包埋，进而可降低微胶囊的表面油含量，提高微胶囊的抗氧化能力，并可适度延长微胶囊的货架期，有利于后续进一步的生产及利用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种微生物油的制备方法。
技术介绍
多不饱和脂肪酸（polyunsaturatedfattyacid，PUFA）是指含有两个或两个以上双键的脂肪酸，一般含18~22个碳原子。工业化的PUFA大多由真菌、藻类等单细胞微生物产生，故也称为微生物油。多不饱和脂肪酸因其结构特点主要分为ω-3及ω-6两个系列。ω-3系列包括十八碳三烯酸（俗称α-亚麻酸，ALA）、二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）。ω-6系列包括十八碳二烯酸（俗称亚油酸，LA）、十八碳三烯酸（俗称γ-亚麻酸，GLA）、二十碳四烯酸（俗称花生四烯酸）。多不饱和脂肪酸是人体细胞膜磷脂的主要成分，对细胞膜功能有决定性影响。一些特定的多不饱和脂肪酸如花生四烯酸和DHA是脑和视网膜中两种主要的多不饱和脂肪酸，特别对于胎儿和婴幼儿影响显著，摄入不足可能导致脑功能和视神经发育障碍。工业化生产得到的微生物油主要是以甘油酯的形式存在。甘油酯是甘油与脂肪酸酯化而成的化合物，根据反应程度的不同，分为甘油一酯（单甘酯、MG）、甘油二酯（双甘酯、DG）、甘油三酯（甘三酯、TG）。其中，甘油三酯（TG）由3分子脂肪酸和1分子甘油酯化而成，是体内能量的主要来源，也是自然界各类生物体内油脂储存的主要形式。甘油二酯（DG）是由2分子脂肪酸与1分子甘油酯化得到的产物，是油脂的天然成分，也是油脂在人体内代谢的中间产物。同时，甘油二酯还是细胞内肌醇磷脂信号传递途径的中间物质。工业化生产得到的微生物油很多都是功能性或针对性很强的油脂，一般用于大众消费品如乳制品的添加剂或营养强化剂，很少直接食用。由于其富含多不饱和脂肪酸，很容易被氧化而导致风味恶化，因此其在用作食品添加剂或营养强化剂时，通常需要先进行微胶囊包埋处理。微胶囊包埋主要是将微生物油芯材与适当材料及水混合、剪切、均质、乳化后，在喷雾干燥的同时加入壁材（例如麦芽糊精等）进行包埋，使油脂被紧密包裹于壁材中。这样的微胶囊产品既可以防止油脂被氧化，又能改善产品的风味和口感。通常情况下，油脂的乳化性能越强，则包埋效果越好，所生产出来的微胶囊风味和稳定性也越好。公开号为CN1662642A的专利申请公开了一种含有至少40%多不饱和脂肪酸的微生物油，该微生物油中的甘油三酯含量大于90%。该微生物油存在以下缺陷：由于甘油三酯无亲水基团，无乳化性能，因此，该微生物油的乳化性能较差。在后续微胶囊生产的过程中，微生物油不能形成良好的包埋，最终得到的微胶囊产品，其表面油含量较高，不利于后续进一步的生产及应用。因此，提供一种改进的微生物油实为必要。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提供一种制备上述微生物油的方法。本专利技术的次要目的是提供一种具有良好包埋效果、表面油含量低的微胶囊。为达到上述主要目的，本专利技术提供一种微生物油的制备方法，所述微生物油中，多不饱和脂肪酸的含量大于30wt%，甘油三酯含量小于90wt%，甘油二酯含量不低于5wt%且不高于20wt%，所述制备方法包括以下步骤：(1)利用产油微生物发酵得到富含多不饱和脂肪酸的生物油的发酵液；(2)收集富含多不饱和脂肪酸微生物油的菌体，萃取过滤后得到混合油；(3)在混合油中加入脂肪酶和水进行酶解，纯化后得到微生物油。上述方案中，步骤（2）收集菌体之前，将发酵液通过离心或者压滤方式实现固液分离。上述方案中，在步骤（3）之后对微生物油进行精制。上述方案中，步骤（3）中，酶解参数包括：在脂肪酶最适温度下搅拌反应0.5~2小时，脂肪酶用量为混合油质量的0.25wt%~2wt%，水用量为混合油质量的15wt%-30wt%。上述方案中，步骤（3）中，的纯化工艺包括分离水相和油相；过滤除去脂肪酶，蒸发除去溶剂；分子蒸馏设备除去游离脂肪酶。本专利技术的微生物油的制备方法具有如下有益效果：使用该方法制备的微生物油中含有适量的甘油二酯，由于甘油二脂具有较好的乳化性能，其有利于微生物油形成稳定的乳化液。在制备微胶囊的过程中，能使微生物油更好地被包埋，进而可降低微胶囊的表面油含量，提高微胶囊的抗氧化能力，并可适度延长微胶囊的货架期，有利于后续进一步的生产及利用。具体实施方式以下实施例更详细的说明本专利技术的微生物油生产及应用方法。实施例一以高山被孢霉为出发菌种，详细描述本专利技术含有花生四烯酸的微生物油的生产及应用。1.发酵配制葡萄糖含量为0.03g/mL、酵母粉含量为0.02g/mL的培养基溶液于500ml摇瓶中，可配制多瓶，灭菌后接入适量高山被孢霉菌丝及孢子，置于28℃恒温摇床，150rpm，2天后合并摇瓶，移入已灭菌的、盛放有葡萄糖含量为0.03g/mL、酵母粉含量为0.02g/mL的培养基溶液的1m3发酵罐（一级种子罐）中，持续通入无菌空气，保持培养温度28±2℃。一级种子罐培养2天后，将全部培养液移入已灭菌的、盛放有葡萄糖含量为0.03g/mL、酵母粉含量为0.02g/mL的培养基溶液的10m3发酵罐（二级种子罐）中，持续通入无菌空气，保持培养温度28±2℃。二级种子罐培养1天后，将全部培养液移入已灭菌的、盛放有葡萄糖含量为0.05g/mL、酵母粉含量为0.02g/mL的培养基溶液的45m3发酵罐中，持续通入无菌空气，保持培养温度28±2℃，根据葡萄糖消耗速度分批补加总量约0.02~0.05g/mL培养基溶液的灭菌葡萄糖溶液，再培养7天后可获得发酵产物，其中生物质含量32g/L、菌体干基中总油含量51.9wt%、总油中花生四烯酸含量50.4wt%。2.制备富含花生四烯酸的微生物油可采用以下不同的工艺手段制备本专利技术的微生物油。手段一将发酵产物通过离心或压滤方式实现固液分离，收集湿菌体，利用粉碎机破碎，再通过沸腾干燥塔烘干，得到干菌体。将干菌体与有机溶剂如丁烷或己烷混合浸泡萃取，过滤后得到混合油。向混合油中加入市售脂肪酶和水进行酶解处理，该市售脂肪酶具有将甘油酯水解的功能，下述实施例均与此相同。所述的酶解处理参数包括：脂肪酶用量为微生物混合油重量的0.25wt%；水用量为微生物混合油重量的15wt%，反应温度约37℃，搅拌反应时间0.5h。酶解反应结束后对混合油进行纯化，纯化的具体步骤包括：将混合油静置，待油相与水相分层后，除去水层，过滤除去酶，蒸发脱除溶剂，通过分子蒸馏设备除去游离脂肪酸，得到微生物粗油。测得该粗油具有如下指标：多不饱和脂肪酸含量61.5wt%，TG含量88.7wt%，DG含量5.5wt%。更进一步的，对上述微生物粗油进行精制，精制的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微生物油的制备方法，所述微生物油中，多不饱和脂肪酸的含量大于30wt%，甘油三酯含量小于90wt%，甘油二酯含量不低于5wt%且不高于20 wt %，所述制备方法包括以下步骤：(1) 利用产油微生物发酵得到富含多不饱和脂肪酸的生物油的发酵液；(2) 收集富含多不饱和脂肪酸微生物油的菌体，萃取过滤后得到混合油；(3) 在混合油中加入脂肪酶和水进行酶解，纯化后得到微生物油。

【技术特征摘要】
1.一种微生物油的制备方法，所述微生物油中，多不饱和脂肪酸的含量大于30wt%，甘
油三酯含量小于90wt%，甘油二酯含量不低于5wt%且不高于20wt%，所述制备方法包括以
下步骤：
(1)利用产油微生物发酵得到富含多不饱和脂肪酸的生物油的发酵液；
(2)收集富含多不饱和脂肪酸微生物油的菌体，萃取过滤后得到混合油；
(3)在混合油中加入脂肪酶和水进行酶解，纯化后得到微生物油。
2.根据权利要求1所述的微生物油的制备方法，其特征在于：步骤（2）收集菌体之前，将
发酵液通过离心或者压滤方式实现固液分...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪志明，周强，陆姝欢，肖敏，田勇，李翔宇，
申请(专利权)人：嘉必优生物技术武汉股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42