本发明专利技术涉及了一种20(R)‑人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体药物制备方法和应用，属于药品保健品领域。本发明专利技术通过优化大豆卵磷脂和胆固醇及包封药物的配比得到20(R)‑人参皂苷Rg3脂质体，减小了20(R)‑人参皂苷Rg3脂质体的粒径，同时增强了脂质体药物的稳定性；再经过叶酸对包封20(R)‑人参皂苷Rg3药物脂质体的靶向修饰后，实现对癌细胞的靶向药物递送。实验结果表明，本发明专利技术20(R)‑人参皂苷Rg3脂质体包封率可以达到90％以上，本发明专利技术的复合脂质体药物的制备方法简单、高效，制备出的复合脂质体细胞毒性低、具有缓释性，延长药物的疗效，在物理学表征和体外生物学研究中均已得到了良好的评价效果，安全高效、靶向性强、为抗癌药物的研究开发提供了新的途径。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及了一种20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体药物制 备方法和应用，属于药品保健品领域。
技术介绍
人参阜苷Rg3(ginsenosides Rg3)是原人参二醇型四环三砲阜苷，分子式为 C42H72O13，相对分子质量为784.30，化学名为20 (R)-达玛烷烯二醇-3-0-?Η)_葡萄吡喃糖基 (l-2)-0-D-葡萄吡喃糖。人参皂苷Rg3主要有2种常见构型，20(R)-Propanaxadiol和20(S)_ Propanaxadiol，其中 20(R)-Propanaxadiol为优势构型。20(R)-人参皂苷Rg3(20(R)-ginsenosides Rg3)是中国第一个中药单体抗癌新药，是人参阜苷中起抗肿瘤作用的有效 成分之一，可以有效抑制肿瘤新生血管增长，进而抑制肿瘤的生长转移等，对前列腺癌、肺 癌、胃癌、肝癌等癌症具有较好的治疗效果。单独使用Rg3的缺点是其水溶性和脂溶性都很 低，因此，生物利用度较低。 脂质体作为药物载体已有30多年的历史，大豆卵磷脂作为一种天然的可食用材料 无毒性、适合体内吸收和降解，与一定比例的胆固醇制备成天然脂质体，用于包封20(R)_人 参皂苷Rg3药物，能提高药物生物利用度、延长药物作用时间等优点。 目前，抗肿瘤药物的靶向细胞递送受到广泛关注，大量研究结果表明，多数肿瘤细 胞表面上的叶酸受体活性和数量显著高于一般正常细胞，并且叶酸(folic acid，FA)对叶 酸受体具有高度亲和性。因此可将脂质体药物与FA偶联，经叶酸受体介导靶向递送到这些 肿瘤细胞中，而且FA作为靶向分子具有许多独特的优点，如相对分子质量小、无免疫原性、 价廉易得、稳定性好、靶向应用范围广泛等。FA偶联脂质体作为给药载体可以有效的实现药 物的靶向递送，提高药物的局部保存浓度，增强对肿瘤细胞的杀伤力，减少对正常细胞的毒 副作用等。
技术实现思路
为解决现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵 磷脂/胆固醇/叶酸脂质体药物制备方法和应用。本专利技术的复合脂质体药物，辅料成分安全 无毒性，具有靶向性，能增加肿瘤细胞对药物的摄入率，有效提高20(R)_人参皂苷Rg3的生 物利用度。 专利技术构思是:本专利技术以20(R)_人参皂苷Rg3、天然大豆卵磷脂为主要材料辅以胆固 醇制备脂质体，采用薄膜分散超声方法实现20 (R)-人参皂苷Rg3的有效包封，再用叶酸包封 修饰制备成革El向脂质体药物。 本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：一种20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷 月旨/胆固醇/叶酸脂质体药物的制备方法，包括以下步骤： (1)将大豆卵磷脂溶于氯仿中，加入胆固醇，震荡使其充分混合均匀，用氮气流吹 干形成均匀薄膜，放置真空干燥箱中过夜，制备脂质体； (2)将20(R)_人参皂苷Rg3预先溶解在无水乙醇中配制成20(R)_人参皂苷Rg3溶 液，向脂质体中加入20(R)_人参皂苷Rg3溶液和双蒸水浸泡，反复超声振荡使薄膜溶解至澄 清，制得包封20(R)_人参皂苷Rg3脂质体； (3)加入叶酸溶液复合20(R)_人参皂苷Rg3脂质体，在常温下超声振荡至澄清，制 得叶酸靶向性修饰的20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体药物。 进一步的，步骤(1)所述的大豆卵磷脂与胆固醇摩尔比为1:1~6:1，优选3:1。 进一步的，步骤(2)中空白脂质体与20(R)_人参皂苷Rg3的质量比为5:1~15:1，优 选 10:1〇 进一步的，步骤⑵中20(R)-人参皂苷Rg3溶液浓度为2mg/mL。 进一步的，步骤(2)中20(R)_人参皂苷Rg3溶液和双蒸水体积比为2:8。 进一步的，所述的步骤(3)叶酸的终浓度为10~40yg/mL，优选20yg/mL。进一步的，步骤(2)中在45~55°C下反复超声振荡使薄膜溶解至澄清。本专利技术还请求保护由上述方法制得20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶 酸脂质体药物。 本专利技术第三个目的是请求保护上述20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶 酸脂质体药物在抗癌、抗肿瘤药物中的应用。 本专利技术提供一种新的同时装载药物和复合叶酸的复合靶向脂质体药物，本专利技术的 复合脂质体组分中采用的天然大豆卵磷脂极好的构建了仿细胞膜结构的天然脂质体。本发 明通过优化大豆卵磷脂和胆固醇及包封药物的配比得到20(R)_人参皂苷Rg3脂质体，减小 了 20(R)_人参皂苷Rg3脂质体的粒径，同时增强了脂质体药物的稳定性;再经过叶酸对包 封20(R)_人参皂苷Rg3药物脂质体的靶向修饰后，实现对癌细胞的靶向药物递送。 本专利技术的20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体对药物具有高包 封率，实验结果表明，本专利技术20(R)_人参皂苷Rg3脂质体包封率可以达到90%以上，本专利技术 20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体药物的制备方法简单、高效，辅料成 分安全无毒性，能增加肿瘤细胞对药物的摄入率，有效提高20(R)_人参皂苷Rg3的生物利用 度；制备的复合脂质体细胞毒性低、具有缓释性，延长药物的疗效，在物理学表征和体外生 物学研究中均已得到了良好的评价效果，所得药物能够增强机体免疫力，安全高效、靶向性 强、为抗癌药物的研究开发提供了新的途径。【附图说明】 图1为20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体方法专属性试验色谱 图；其中1为20(R)_人参皂苷Rg3脂质体，2为20(R)_人参皂苷Rg3标准品，3为空白脂质体； 图2为脂质体粒径分布图；图3为脂质体电荷分布图；图4为透射电镜(TEM)检测结果图；其中A为空白脂质体TEM检测分析图；B为20(R)_ 人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/脂质体TEM检测分析图；C为FA10-20(R)_人参皂苷Rg3/ 大豆卵磷脂/胆固醇/脂质体TEM检测分析图；图5为203nm波长的包封率测定结果； 图6为不同脂药比的20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体作用于 叶酸受体(FR)阳性表达率较高的人非小细胞肺癌细胞系(H460)细胞毒性的测定结果；其 中，1为空白脂质体;2为脂药比5:1的20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质 体;3为脂药比10:1的20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体;4为脂药比15: 1的20(R)_人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体。【具体实施方式】 下面通过实施例对本专利技术做详细描述，但不用于限制本专利技术的保护范围，如无特 殊说明，本专利技术所涉及化学试剂及药品均市售可得，如无特殊说明，所涉及的方法均为常 规方法。 实施例1称取大豆卵磷脂溶于氯仿中（lmg/lmL)，加入胆固醇(大豆卵磷脂与胆固醇摩尔比 为1:1 )，震荡使其充分混合均匀。用氮气流吹干形成均匀薄膜，放置真空干燥箱中过夜，制 备脂质体。 将20(R)_人参皂苷Rg3药物预先溶解在无水乙醇中，配制成2mg/mL的溶液，再按照 比例加入对应体积量。按脂药比5 :1的比例分别加入人参皂苷Rg3无水乙醇和双蒸水（比例 为2:8)浸泡约2h，在55°C下反复超声振本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种20(R)‑人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将大豆卵磷脂溶于氯仿中，加入胆固醇，震荡使其充分混合均匀，用氮气流吹干形成均匀薄膜，放置真空干燥箱中过夜，制备脂质体；(2)将20(R)‑人参皂苷Rg3预先溶解在无水乙醇中配制成20(R)‑人参皂苷Rg3溶液，向脂质体中加入20(R)‑人参皂苷Rg3溶液和双蒸水浸泡，反复超声振荡使薄膜溶解至澄清，制得包封20(R)‑人参皂苷Rg3脂质体；(3)加入叶酸溶液复合20(R)‑人参皂苷Rg3脂质体，在常温下超声振荡至澄清，制得叶酸靶向性修饰的20(R)‑人参皂苷Rg3/大豆卵磷脂/胆固醇/叶酸脂质体药物。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：崔韶晖，张树彪，陈会英，海华，周泉，
申请(专利权)人：大连民族大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21
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