检测KAPPA轻链含量的试剂盒、方法及用途技术

本发明专利技术公开一种检测KAPPA轻链含量的试剂盒，包括：试剂R1、试剂R2和KAPPA轻链校准品；所述试剂R1包括：第一缓冲液、第一电解质、表面活性剂、第一稳定剂、高分子促进剂和第一防腐剂；所述试剂R2包括：第二缓冲液、抗人KAPPA轻链抗体、第二电解质、第二稳定剂和第二防腐剂；所述C1抑制剂校准品包括：第三缓冲液、第三稳定剂、第三防腐剂、抗氧化剂和KAPPA轻链抗原。本发明专利技术还公开一种如上所述的检测KAPPA轻链含量的试剂盒的在检测KAPPA轻链含量中的用途以及一种采用如上所述的检测KAPPA轻链含量的试剂盒检测KAPPA轻链含量的方法。本发明专利技术的试剂盒及检测方法，可简洁快速检测KAPPA轻链含量。

【技术实现步骤摘要】
检测KAPPA轻链含量的试剂盒、方法及用途
本专利技术属于检测KAPPA轻链含量的
，具体涉及一种检测KAPPA轻链含量的试剂盒、方法及用途。
技术介绍
轻链(Lightchain，L)大约由214个氨基酸残基组成，通常不含碳水化合物，分子量约为24kD。每条轻链含有两个由链内二硫键所组成的环肽。L链共有两种类型：KAPPA(κ)与Lambda(λ)，同一个天然免疫球蛋白分子上L链的类型总是相同的。正常人血清中的κ：λ约为2：1。细胞克隆的异常增生将导致单克隆球蛋白或游离免疫球蛋白片段(游离的轻链)的增加，这将造成κ与λ链的比例失衡，κ与λ的比值失常预示了单克隆Y球蛋白血症。在生成增加的情况下，游离轻链的滤过也增加，当超出肾小管的重吸收能力时，该测试可以定量检测结合及游离免疫球蛋白中的轻链。定量检测不同种类的轻链含量有助于诊断巨球蛋白血症(巨型球蛋白生成增多)及结缔组织病(如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮)等疾病。此外，感染、急慢性肝炎、肝硬化等血中轻链也可增多，但一般均表现为κ、λ同时增多；肾病、糖尿病等患者尿也可出现κ、λ同时增多。已有的检测方法主要是免疫电泳法、酶联免疫法。前者检测时间较长，操作较为繁琐，对非典型患者不能作出明确诊断。酶联免疫法具有酶催化的扩大效应，定量不够准确，限制了它的应用。采用免疫比浊法不但大大缩短测定时间，还可提高免疫学诊断的敏感性和准确性，临床应用前景广阔。
技术实现思路
本专利技术实施例的目的在于克服现有技术的上述不足，提供一种检测KAPPA轻链含量的试剂盒，可以简洁快速地检测样本中KAPPA轻链的含量，具有较高的准确度和很好的特异性。本专利技术实施例的另一目的在于克服现有技术的上述不足，提供一种上述的检测KAPPA轻链含量的试剂盒的在检测KAPPA轻链含量中的用途，可用于简洁快速地检测样本中KAPPA轻链的含量，具有较高的准确度和很好的特异性。本专利技术实施例的再一目的在于克服现有技术的上述不足，提供一种采用上述的检测KAPPA轻链含量的试剂盒检测KAPPA轻链含量的方法，可以简洁快速地检测样本中KAPPA轻链的含量，具有较高的准确度和很好的特异性。为了实现上述专利技术目的，本专利技术实施例的技术方案如下：一种检测KAPPA轻链含量的试剂盒，包括：试剂R1、试剂R2和KAPPA轻链校准品；所述试剂R1包括：第一缓冲液10～600mmol/L、第一电解质5～100g/L、表面活性剂0.5～60g/L、第一稳定剂0.5～20g/L、高分子促进剂1～100g/L和第一防腐剂1～10g/L；所述试剂R2包括：第二缓冲液10～600mmol/L、抗人KAPPA轻链抗体5～60％w/v、第二电解质5～50g/L、第二稳定剂0.5～10g/L和第二防腐剂1～10g/L；所述KAPPA轻链校准品包括：第三缓冲液10～600mmol/L、第三稳定剂0.5～60g/L、第三防腐剂1～10g/L、抗氧化剂0.01～10g/L和KAPPA轻链抗原。进一步：所述试剂R1的pH为6～9.5。进一步：所述试剂R2的pH为6～9.5。进一步：所述第一缓冲液、所述第二缓冲液和所述第三缓冲液均选自醋酸盐缓冲液、氯化铵缓冲液、磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷TRIS缓冲液、硼砂-氢氧化钠缓冲液、甘氨酸缓冲液、3-(N-吗啉)丙磺酸MOPS缓冲液、3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸CAPSO缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES缓冲液中的一种或几种；和/或，所述第一稳定剂、所述第二稳定剂和所述第三稳定剂均选自亚氨基二乙酸、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、乙二胺四乙酸二钠、二乙烯三胺五乙酸钠、1,2-环己二醇缩水甘油、甘露糖、葡萄糖、壳聚糖、山梨醇和牛血清蛋白中的一种或几种；和/或，所述第一防腐剂、所述第二防腐剂和所述第三防腐剂均选自叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯和乙基汞硫代硫酸钠中的一种或几种；和/或，所述第一电解质和所述第二电解质均选自氯化钠、硫酸镁、氯化镁和氯化钾中的一种或几种；和/或，所述表面活性剂选自Triton系列表面活性剂、Tween系列表面活性剂、月桂醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚和聚氧乙烯辛基苯醚中的一种或几种；和/或，所述高分子促进剂选自聚乙二醇PEG8000、聚乙二醇PEG6000、聚乙二醇PEG4000、聚乙二醇PEG2000、脂肪醇聚氧乙烯醚、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸钠、乙二醇聚氧乙烯醚、羟丙基甲基纤维素和羟甲基纤维素钠中的一种或几种；和/或，所述抗人KAPPA轻链抗体选自鼠抗人、兔抗人、羊抗人、鸡抗人或牛抗人KAPPA轻链抗体；所述抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚、没食子酸丙酯、二丁基羟基甲苯、苯多酚、磷脂、甘草抗氧化物、硫代二丙酸二月桂酯、特丁基对苯二酚和维生素系列中的一种或几种。进一步：所述第一缓冲液、所述第二缓冲液和所述第三缓冲液均为3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸CAPSO缓冲液；和/或，所述第一稳定剂、所述第二稳定剂和所述第三稳定剂均为1,2-环己二醇缩水甘油；和/或，所述第一防腐剂、所述第二防腐剂和所述第三防腐剂均为对羟基苯甲酸乙酯；和/或，所述第一电解质和所述第二电解质均为氯化钠；和/或，所述表面活性剂为聚氧乙烯辛基苯醚；和/或，所述高分子促进剂为羟丙基甲基纤维素；和/或，所述抗人KAPPA轻链抗体为羊抗人KAPPA轻链单克隆抗体；和/或，所述抗氧化剂为二丁基羟基甲苯。进一步：所述试剂R1包括：3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸CAPSO缓冲液10～600mmol/L、氯化钠5～100g/L、聚氧乙烯辛基苯醚0.5～60g/L、1,2-环己二醇缩水甘油0.5～20g/L、羟丙基甲基纤维素1～100g/L和对羟基苯甲酸乙酯1～10g/L，所述试剂R1的pH为6～9.5；所述试剂R2包括：氯化铵缓冲液10～600mmol/L、抗人KAPPA轻链抗体10～60％w/v、硫酸镁5～50g/L、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠0.5～10g/L和苯酚1～10g/L，所述试剂R2的pH为6～9.5；所述KAPPA轻链校准品包括：甘氨酸缓冲液10～600mmol/L、壳聚糖5～50g/L、对羟基苯甲酸1～10g/L、甘草抗氧化物0.01～10g/L和KAPPA轻链。一种如上所述的检测KAPPA轻链含量的试剂盒的在检测KAPPA轻链含量中的用途。一种采用如上所述的检测KAPPA轻链含量的试剂盒检测KAPPA轻链含量的方法，包括：按待测样品和所述试剂R1的体积比为1～10:200，向所述待测样品中加入所述试剂R1，得到第一混合液，并得到所述第一混合液的吸光度OD1；按所述试剂R2与所述试剂R1体积比为1:1～10，向所述第一混合液中加入所述试剂R2，得到第二混合液，并得到所述第二混合液的吸光度OD2；使用所述KAPPA轻链校准品得到标准曲线，根据所述吸光度OD1和所述吸光度OD2在所述标准曲线上得到所述待测样品中KAPPA轻链的含量。进一步：所述试剂R2与所述试剂R1体积比为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9或1:10。进一步，所述标准曲线的拟合模式包括：Spline、二次方程、logit-log3p、logit-log4p、logit-log5p本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测KAPPA轻链含量的试剂盒，其特征在于，包括：试剂R1、试剂R2和KAPPA轻链校准品；所述试剂R1包括：第一缓冲液10～600mmol/L、第一电解质5～100g/L、表面活性剂0.5～60g/L、第一稳定剂0.5～20g/L、高分子促进剂1～100g/L和第一防腐剂1～10g/L；所述试剂R2包括：第二缓冲液10～600mmol/L、抗人KAPPA轻链抗体5～60％w/v、第二电解质5～50g/L、第二稳定剂0.5～10g/L和第二防腐剂1～10g/L；所述KAPPA轻链校准品包括：第三缓冲液10～600mmol/L、第三稳定剂0.5～60g/L、第三防腐剂1～10g/L、抗氧化剂0.01～10g/L和KAPPA轻链抗原。

【技术特征摘要】
1.一种检测KAPPA轻链含量的试剂盒，其特征在于，包括：试剂R1、试剂R2和KAPPA轻链校准品；所述试剂R1包括：甘氨酸400mmol/L、氯化钠30g/L、聚氧乙烯辛基苯醚1g/L、牛血清蛋白1g/L、PEG4000100g/L和叠氮钠10g/L，所述试剂R1的pH为9.0；所述试剂R2包括：磷酸盐10mmol/L、抗人KAPPA轻链抗体50％w/v、氯化钠6g/L、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠6g/L和叠氮钠3g/L，所述试剂R2的pH为6.5；所述KAPPA轻链校准品包括：CAPSO缓冲液10mmol/L、海藻糖3g/L、叠氮钠3g/L、二丁基羟基甲苯0.5g/L和KAPPA轻链抗原相应量；或，所述试剂R1包括：磷酸盐20mmol/L、氯化钠5g/L、聚氧乙烯烷基苯基醚50g/L、牛血清蛋白1g/L、PEG200010g/L和叠氮钠2g/L，所述试剂R1的pH为6.5；所述试剂R2包括：磷酸盐400mmol/L、抗人KAPPA轻链抗体20％w/v、氯化钠40g/L、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠10g/L和叠氮钠10g/L，所述试剂R2的pH为8.5；所述KAPPA轻链校准品包括：HEPES缓冲液500mmol/L、乙二胺四乙酸二钠2g/L、甘露糖醇9g/L、叠氮钠...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔晓辰，夏德习，王庆国，宿明明，
申请(专利权)人：潍坊三维生物工程集团有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37