本发明专利技术属于生物技术和医学领域，具体涉及一种miRNA‑17‑3p和miRNA‑19b‑1组合物及其应用。本发明专利技术提供了微小RNA miR‑17‑3p或其前体和miR‑19b‑1或其前体的组合物在制备预防或治疗肿瘤的药物中的应用。本发明专利技术首次揭示了miR‑17‑3p和miR‑19b‑1可特异性地抑制肿瘤血管生成，并且在实体瘤尤其是乳腺癌中表达显著低于正常组织；此外，本发明专利技术的miR‑17‑3p和miR‑19b‑1组合物在体外、体内均能够抑制癌细胞的生长。本发明专利技术的miR‑17‑3p和miR‑19b‑1组合物可用于制备预防或治疗实体瘤的药物，尤其是用于制备预防或治疗乳腺癌的药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术和医学领域，具体涉及一系列RNA小分子——miR-17-3p和miR-19b-1的组合物及其在制备预防或治疗肿瘤的药物中的应用，miR-17-3p和miR-19b-1在肿瘤血管调控以及体内抗肿瘤活性起着重要作用。
技术介绍
微小RNA(microRNA，简称miRNA)是一类非编码的、具有转录后调控功能的、序列长度约18～24nt的单链小分子RNA。最早于1993年Lee等报道了在秀丽线虫(C.elegants)体内发现的一种可调节线虫发育的RNA分子，即lin-4(Lee，R.C.等，TheC.elegansheterochronicgenelin-4encodessmallRNAswithantisensecomplementaritytolin-14.Cell.1993,75:843-854)。到2000年，相继由Reinhart等(Reinhart,B.J.等，The21-nucleotidelet-7RNAregulatesdevelopmentaltiminginCaenorhabditiselegans.Nature.2000,403:901-906)发现不同时期表达的let-7。至目前，miRNA数据库中已收录了数百种人类miRNA序列，其中三分之二已被实验证实。miRNA来源于长度约为1000bp的长链RNA初始转录产物(Pri-miRNA)，Pri-miRNA分子在细胞核中经Drosha酶剪切形成长度约60～80nt的具有茎环结构的miRNA前体(Pre-miRNA)。Pre-miRNA转运至胞质后，被进一步加工为成熟的miRNA。miRNA在动植物细胞中通过种子序列的配对程度不同实现对目标mRNA的降解或转录抑制。miRNA在物种间具有高度的保守性、时续性和组织特异性。基于miRNA的调控机制，通过生物信息学分析发现miRNA可能直接调控上百个基因的表达，此外研究表明目前所发现的miRNA直接参与30％的基因调控，进而广泛的参与多种重要的细胞生理病理过程如细胞凋亡、增殖、分化、胚胎发育、机体能量代谢、激素分泌和造血功能以及心肌肥厚等，在肿瘤疾病中，miRNA也作为关键调控因子，参与了肿瘤细胞以及其他相关间质细胞的生化过程。已有的证据显示部分miRNA的表达紊乱或成为推动肿瘤进展的关键，或成为肿瘤恶性程度以及预后的分子标志物。自1971年由美国Folkman医生首次提出了肿瘤血管生成的概念，至今，基于肿瘤血管生成的治疗策略的研究已经成为癌症研究的最热点之一(M.Abdelrahim,S.Konduri,R.Basha,P.A.Philip,C.H.Baker,Angiogenesis:anupdateandpotentialdrugapproaches(review).Int.J.Oncol.2010.36:5-18)，而抗肿瘤血管生成的肿瘤治疗策略也显示出不同于传统抗癌疗法的优越性，如耐药性发生率极低，药物毒副作用低等。鉴于血管新生对于实体肿瘤的生长、侵袭和转移起到了十分关键的作用。miRNA在肿瘤血管调控的功能研究有助于我们更好的理解肿瘤发生发展的病理机制，进一步找到治疗肿瘤疾病相关的药物靶点，从而为这类疾病的预防或治疗提供行之有效的途径。血管生成包括血管新生(vasculogenesis)和血管发生(angiogenesis)两种机制，而血管生成的“开关”是受到机体促血管生成因子和抑制因子共同调控，包括生长因子如血管生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)、血小板衍生生长因子(platelet-derivedgrowthfactor，PDGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor，FGF)等，受体酪氨酸激酶(receptortyrosinekinases，RTK)以及一些转录因子等。正常的血管生成受到细胞因子的严格调控，在两类因子的动态平衡中保持有序和稳定，而肿瘤微环境中，血管生成相关因子异常表达，致使这一平衡被打破而导致肿瘤血管发生(M.Papetti,I.M.Herman,Mechanismsofnormalandtumor-derivedangiogenesis.AmericanJournalofPhysiology-CellPhysiology.2002.282:C947-C970)。研究表明对细胞因子十分敏感的血管内皮细胞以及祖细胞正是调控这一过程的主要成员。因此针对肿瘤血管生成的研究目前主要集中于对血管内皮细胞调控机制的研究。其中参与调控最主要的细胞因子为血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，这些分子通过生长因子受体介导活化下游的信号通路调控血管内皮细胞的增殖、迁移以及存活等，对肿瘤转移起到十分关键的作用。其他一些参与血管生成调控因子也大多与VEGF调控相关，如Dumont等发现的内皮细胞特异性的酪氨酸激酶受体Tie2，及其配体Angiopoietin-1和2(Ang-1和Ang-2)，研究显示其在体内只有当和VEGF一起作用时才表现出调控血管生成的活性，表明这些因子可能参与了细胞对VEGF的应答。又如内皮细胞和肿瘤细胞共同表达的细胞表面蛋白Neuropilin为VEGF165以及胎盘生长因子(placentalgrowthfactor，PlGF)的特异性受体，能够增强VEGF与其受体VEGFR-2的相互作用。此外，研究发现其他的一些细胞因子如Erphrin/Eph、Leptin等因子也参与了调控。近年来研究人员发现还有一些细胞因子参与了抗血管生成的过程，如Roundabouthomolog4(Robo4)以及NotchligandDelta-like4，这些因子可以拮抗VEGF信号来发挥其抑制作用。目前对于肿瘤的血管生成和调控机理方面的研究已经不仅仅停留在基因和蛋白质的水平，随着microRNAs(miRs)的发现和深入研究，其在肿瘤血管方面的调控作用越来越受到研究人员的重视，正如研究人员JasonFish所提到，miRNA为血管生成研究开辟了新的通路。Giraldez等通过基因敲除的方法沉默Dicer的表达来抑制miRNA的加工过程，在体内外均可以导致血管生成相关基因表达异常，并抑制血管生成。这项研究结果首次证明了miRNA在调控血管生成中起到至关重要的作用。由此，越来越多的研究人员开始关注miRNA在血管生成中的具体调控机制。而内皮细胞表达的miRN本文档来自技高网...
【技术保护点】
microRNAs在制备预防或治疗肿瘤的药物中的应用，所述的microRNAs为miR‑17‑3p或其前体和miR‑19b‑1或其前体的组合。
【技术特征摘要】
1.microRNAs在制备预防或治疗肿瘤的药物中的应用，所述的microRNAs
为miR-17-3p或其前体和miR-19b-1或其前体的组合。
2.microRNAs在制备抑制血管生成的药物中的应用，所述的microRNAs为
miR-17-3p或其前体和miR-19b-1或其前体的组合。
3.microRNAs在制备抑制血管生长因子表达的药物中的应用，所述的
microRNAs为miR-17-3p或其前体和miR-19b-1或其前体的组合。
4.如权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于，所述miR-17-3p的序列如
SEQIDNO:1所示；所述miR-19b-1的序列如SEQIDNO:2所示。
5.如权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于，所述miR-17-3p或其前体
和miR-19b-1或其前体来自：人、大鼠、小鼠、犬、马、牛、兔或猴。
6.如权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于，所述miR-17-3p或其前...
【专利技术属性】
技术研发人员：殷润婷，张志强，陈向凡，罗琳，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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