一株防治棕榈害虫椰子织蛾的绿僵菌及应用制造技术

本发明专利技术涉及一株防治棕榈害虫椰子织蛾的绿僵菌及应用，该菌株命名为金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)LSY-1，已于2015年11月9日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号：CCTCC M 2015672。本发明专利技术所提供的金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)LSY-1的用途是其在防治椰子织蛾中的应用，通过直接涂抹给药的试验，表明金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)LSY-1对椰子织蛾有很好的杀虫作用，可以有效地控制椰子织蛾种群数量，是一株在防治椰子织蛾上具有潜在意义的生防菌株，为我国棕榈产业的发展提供帮助。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属微生物领域，设及一种绿僵菌及其应用，具体的说，设及一株防治栋桐害 虫挪子织蛾的绿僵菌及应用。
技术介绍
挪子织蛾化isina arenosella Walke;r(又称挪子木蛾、黑头履带虫、挪柱蛾、食叶 履带虫），属鱗翅目化epidoptera)织蛾科（Qecophoridae)，英文名coconut blackheaded cate巧illar，主要分布于印度、泰国、印度尼西亚、马来西亚、斯里兰卡、孟加拉、细甸、己基 斯坦等地，是一种严重危害挪子、横柳、蒲葵、中东海要、大王栋等栋桐作物的外来入侵害 虫，2014年3月被列为全国林业危险性有害生物。挪子织蛾幼虫取食叶片，严重时整个树冠 被入侵哨食从而导致植株发育缓慢、果实产量大幅减少甚至绝产，严重影响作物的品质和 产量。近年来栋桐作物作为经济作物和园林景观植物在我国的南方大面积的种植与从国外 大量的引入，导致挪子织蛾在我国爆发的威胁越来越大，目前海南、广西、广东Ξ省已有大 面积危害的报道。目前针对挪子织蛾的防治除了利用寄生蜂防控外，主要还是W化学防治 为主，化学防治虽然在一定程度上可W快速的防治该虫，但是化学防治引起的残留、抗性与 再增猎獄等问题严重影响到自然环境与人类的健康；虽然利用寄生蜂防控挪子织蛾在印 度、斯里兰卡等地取得了一定的防治效果，但是国内的优质寄生蜂品种引进与大面积饲养、 释放等技术仍然没有有效开展，因此如何结合国内现有研究基础寻找一种更加科学有效的 控制挪子织蛾危害的生物防治手段显得尤为重要。 金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)寄主范围广泛，能寄生直翅目、膜翅目、 同翅目、双翅目、鱗翅目、銷翅目W及半翅目等7个目、42个科、约200余种昆虫、线虫及蛾类。 金龟子绿僵菌是在生物防治上使用最为广泛的昆虫病原真菌之一，在森林、农作物W及公 共卫生害虫中都用金龟子绿僵菌进行了效果的评估。利用金龟子绿僵菌生防制剂来防控 蛇蜡、幢虫、叶赠等一些害虫，DAmerasan等人在的一些研究还发现，金龟子绿僵菌对追疾的 主要传播昆虫伊蚊有着十分明显的防控效果。金龟子绿僵菌作为生防真菌中最重要的一 种，它在使用上有着寄生物种多、适应性强、致病周期短、祀标性强、对人类和牲畜不会造成 毒害，W及环境友好型的特点。经检索，目前利用绿僵菌控制挪子织蛾尚未见到相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株防治栋桐害虫挪子织蛾的绿僵菌及应用。 一株绿僵菌菌株，命名为金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)LSY-l，已于 2015年11月9日保藏于中国典型培养物保藏中屯、(CCTCC)，地址：湖北省武汉市武昌区八一 路塔挪山；保藏编号:CCTCC Μ 2015672。 本专利技术所提供的金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae化SY-1菌株，分离于自然 感染的挪子织蛾僵虫，经形态学、培养性状、常规生理生化和DNA序列鉴定，该菌株为金龟子 绿僵菌小抱变种，是绿僵菌属真菌的一个新菌株，命名为金龟子绿僵菌（Metarhizum anisopliae)LSY-l。 本专利技术所提供的金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae化SY-1的基本生物学特 性为：[000引菌株在平板PDA培养基上划线培养后菌丝体呈透明状并且有隔膜;在PDA培养基上 初期为白色或淡黄色向黄色过度，形状为絮状或绒毛状突起，后期出现绿色为基础色调的 相邻色谱的颜色;分生抱子梗呈瓶颈状，有分叉，单生或多生交叉生长，相互缠绕成围栏状。 分生抱子每个大小为4.2~8.3皿XI.9~2.祉m，长楠圆形，棒状，两端圆滑脱落的抱子多数 聚集成团块状。 本专利技术所提供的金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae化SY-1的用途是其在防 治挪子织蛾中的应用。 W本专利技术所提供的金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae；)LSY-l为活性成分的 生物制剂也属本专利技术的保护范围。需要的时候，该制剂可W包含生物制剂制备的常用载体 和辅料。 本专利技术通过直接涂抹给药的方法研究金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae) LSY-1对挪子织蛾的杀虫活性，实验结果表明金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)LSY- 1对挪子织蛾有很好的杀虫作用。表明该菌株是一株在防治挪子织蛾上具有潜在意义的生 防菌株。 本专利技术通过对自然感染的挪子织蛾僵虫中微生物的筛选分离，获得金龟子绿僵菌 (Metarhizum anisopliae)LSY-l，经过杀虫试验表明该菌株对挪子织蛾有很好的杀虫作 用，可W有效地控制挪子织蛾种群数量，减少损失，是一株在防治挪子织蛾上具有潜在意义 的生防菌株，具有杀虫毒力强、杀虫效果好等特点，为我国栋桐科产业的发展提供帮助。【附图说明】 图1:金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)LSY-l的菌株抱子与菌丝形态。 图2:金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae化SY-1菌株侵染挪子织蛾幼虫照片。 A: CK; B: LSY-1侵染挪子织蛾第2d; C: LSY-1侵染挪子织蛾第4d; D: LSY-1侵染挪子织蛾第6d。【具体实施方式】 下面结合实施例，对本专利技术的【具体实施方式】作进一步详细描述。W下实施例用于 说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常 按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。 实施例一菌株的筛选及其鉴定 1、菌株的筛选 取采集好的挪子织蛾僵虫样品，先用70%酒精消毒一分钟，无菌水清洗后再用 0.1 %的氯化隶对感病样品进行表面消毒30s，无菌水清洗3次，挑取少许僵虫组织接种于选 择性SDAY培养基(4 %葡萄糖、1 %蛋白腺、1 %酵母粉、2 %琼脂、100μg/ml链霉素、100μg/ml 青霉素、多菌灵0.祉g/ml)，倒置于28 ± 1 °C恒溫倒置培养3-4d，选取单抱子接种于PDA培养 基(去皮马铃馨200g切小块加水至1L煮沸20分钟后双层纱布过滤，滤液中加葡萄糖20g、琼 月旨20g再加热使之溶化，加水补足体积至1L)纯化，每皿3点，呈Ξ角形排列，经单抱子纯化 后获得具有杀虫作用的菌株，命名为金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)LSY-l，已于 2015年11月9日保藏于中国典型培养物保藏中屯、(CCTCC)，地址：湖北省武汉市武昌区八一 路塔挪山；保藏编号:CCTCC Μ 2015672。 2、菌株形态鉴定 将分离纯化得到的菌株在直径为90mm的平板PDA培养基上划线培养，放入29°C培 养箱中培养4-5d后，挑取幼嫩的白色菌丝制片在显微镜下观察菌株的菌丝和分生抱子梗的 形态；10-12d后挑取成熟的分生抱子制片并再次对比观察抱子的大小与形状；14d左右观察 记录菌落的外观形态特征。菌株在PDA培养基上产生抱子W前为白色或淡黄色向黄色过度， 形状为絮状或绒毛状突起，随着时间的推移开始出现绿色为基础色调的相邻色谱的颜色。 菌丝体呈透明状并且有隔膜。在感染死亡的僵虫身上一般初期成白色绒毛覆盖，慢慢被深 绿色的抱子所替代;分生抱子梗呈瓶颈状，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株绿僵菌菌株，命名为金龟子绿僵菌(Metarhizum anisopliae)LSY‑1，已于2015年11月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC M2015672。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晓东，阎伟，覃伟权，吕朝军，李朝绪，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院椰子研究所，
类型：发明
国别省市：海南;66