本发明专利技术涉及鼠单克隆抗体(mAb)11B9和mAb 62及其活性片段，其各自靶向甲型流感H7血凝素的主要中和表位。本发明专利技术还涉及使用鼠mAb11B9、mAb 62或其片段预防和治疗H7流感的方法和组合物。本发明专利技术进一步涉及确定、鉴别和/定量(a)样品或疫苗中甲型流感血凝素或者(b)针对甲型流感血凝素的抗体的方法和试剂盒。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】革田向H7流感病毒上中和表位的单克隆抗体 相关申请的交叉引用 本专利技术申请设及并要求2012年11月19日提请的美国临时专利申请系列号61/727， 927的优先权。运个申请通过引用并入本文。 序列提交 本申请和电子版的序列表一起提交。该序列表命名为 2577226PCTSequenceListing.txt ,2013年8月9日创建，大小为13化。序列表电子版的信息 W其全部内容通过引用并入本文。 专利技术背景 本专利技术设及鼠单克隆抗体(mAb)llB9和mAb 62及其活性片段，其均祀向甲型流感 H7血凝素的主要中和表位。本专利技术还设及使用鼠 mAb llB9、mAb 62或其片段预防和治疗H7 流感的方法和组合物。本专利技术进一步设及确定、鉴别和/或定量(a)样品或疫苗中甲型流感 血凝素或者(b)针对甲型流感血凝素的抗体的方法和试剂盒。 本文中用于阐明本专利技术背景或者提供关于实践的另外的详细描述的出版物及其 它材料通过引用并入，方便起见归类在参考文献中。 高致病性禽流感（HPAI)H7亚型在禽类中的发生持续是关注的公共卫生问题 (化化ao et al.，2008;Abbas et曰1.，2011)。2002年W来，来自欧亚和北美谱系的甲型流 感H7亚型病毒在荷兰、意大利、加拿大、英国和美国已经导致100例W上的人感染。在2003 年，HPAI H7N7在荷兰爆发，与感染禽类密切接触的89人感染，并导致1人死亡。运些情况包 括2003年荷兰HPAI H7N7病毒的爆发，导致超过80例人感染及1人死亡;HPAI H7N3病毒在 2004年在加拿大英属哥伦比亚导致2例结膜炎;在2007年英国一群人感染低致病性禽流感 化PAI )H7N2病毒，导致几例流感样疾病和结膜炎;及在2003年在纽约的1例呼吸道感染。H7 亚型病毒已经呈现出显著的大流行可能(Min et al. ,2010)。 人对于H7禽流感病毒是免疫学天然的，循环于欧亚和北美的家禽和野禽中的LPAI H7亚型病毒具有进化和获得高致病性表型的潜力，通过积累突变或者通过在血凝素(HA)裂 解位点重组导致在禽类中是毒性基序的高度可裂解的HA。近年来的研究也提示在2002- 2003年分离的现时北美谱系H7亚型病毒部分适于识别2-6-连接的唾液酸，其是人流感病毒 的优选受体及优先在人上呼吸道中发现(Gambaryan et al. ,2012)。此外，H7禽流感病毒与 人流感病毒包括季节性H1N1和H3N2及流行性H1N1病毒之间RNA基因组的共感染和遗传重 配，可导致在人群中有效传递并导致流行的重配病毒的产生。家禽可作为重要的中间宿主 将野生禽流感病毒传递至人，猪也可W，如在2009年世界范围内流行性H1N1流感病毒的猪 源人感染感染所证明。 使用单克隆抗体的被动免疫被认为是治疗许多感染性疾病的切实可行的选项。目 前已经有许多使用流感病毒HA1蛋白的中和抗体的治疗方法(Prabakaran et al. ,2009)。 运种蛋白易于祀向，因为其在病毒表面上及运种蛋白的抗体可有效中和病毒。因此，H7血凝 素化A)的中和表位的单克隆抗体可W是人主动免疫接种的感兴趣的另一选择，特别是对于 处于流感感染高危中的那些个体，如免疫功能低下（immuno-compromised)的患者或者对主 动免疫应答不佳的老年人。重要的是任何mAb产物均应赋予针对循环中的H7流感毒株的广 泛保护作用。期望鉴别可用于预防和治疗H7流感的单克隆抗体。 专利技术概述 本专利技术设及鼠单克隆抗体(mAb)llB9和mAb 62及其活性片段，其均祀向甲型流感 H7血凝素的主要中和表位。本专利技术还设及使用鼠 mAb llB9、mAb 62或其片段预防和治疗H7 流感的方法和组合物。本专利技术进一步设及确定、鉴别和/或定量(a)样品或疫苗中的甲型流 感血凝素或者(b)甲型流感血凝素的抗体的方法和试剂盒。 因此，第一方面，本专利技术提供了特异于流感H5血凝素的主要构象表位的单克隆抗 体及其活性片段即抗原结合片段(在本文也称作抗体片段）。在一个实施方案中，所述单克 隆抗体或其片段特异性结合H7血凝素化A)的构象表位，其中所述构象表位包含H7N7(A/ Netherlands/219/03)蛋白的全长HA蛋白的氨基酸136Ser、137Gly和227G1U，所述全长HA蛋 白包括信号蛋白。全长编码序列示于SEQ ID N0:1，其相应于也包括5'和3'侧翼序列的 〇6诚曰证登录号4￥338459所示序列的核巧酸22-1710。全长蛋白序列示于569 10^:2。在另 一个实施方案中，所述单克隆抗体或其片段特异性结合鼠 mAb 11B9所特异性结合的H7血凝 素的构象表位。在再一个实施方案中，所述单克隆抗体是鼠 mAb 11B9。在进一步的实施方案 中，所述单克隆抗体是由鼠杂交瘤11B9产生的鼠 mAb 11B9。 在一个实施方案中，所述单克隆抗体或其片段特异性结合H7血凝素化A)的构象表 位，其中所述构象表位包含全长HA蛋白的氨基酸17化ys和227G1U，所述全长HA蛋白包括信 号蛋白。在另一个实施方案中，所述单克隆抗体或其片段特异性结合鼠 mAb 62所特异性结 合的H7血凝素的构象表位。在再一个实施方案中，所述单克隆抗体是鼠 mAb 62。在进一步的 实施方案中，所述单克隆抗体是由鼠杂交瘤62产生的鼠 mAb 62。 在另一个实施方案中，本专利技术提供了编码本文所述单克隆抗体或其抗原结合片段 的核酸。在一个实施方案中，所述核酸编码鼠 mAb 11B9或mAb62或者其抗原结合片段。在再 一个实施方案中，本专利技术提供了包含所述核酸的载体(vector)。在进一步的实施方案中，本 专利技术提供了包含和表达所述载体的细胞。第二方面，本专利技术提供了使用鼠单克隆抗体mAb 11B9或mAb 62或其片段预防和治 疗册N1流感的方法和组合物。在一个实施方案中，本专利技术提供了一种药物组合物，其包含本 文描述的单克隆抗体及药物可接受的稀释剂或运载体barrier)。在一些实施方案中，所述 单克隆抗体是鼠 mAb 11B9或mAb 62。在另一个实施方案中，所述药物组合物包含本文描述 的单克隆抗体的抗原结合片段及药物可接受的稀释剂或运载体。在一些实施方案中，所述 抗原结合片段是鼠 mAb 11B9或mAb 62的抗原结合片段。在再一个实施方案中，所述药物组 合物包含编码所述抗体或抗体片段的核酸分子及药物可接受的稀释剂或运载体。在进一步 的实施方案中，所述药物组合物包含具有所述核酸的载体及药物可接受的稀释剂或运载 体。在另一个实施方案中，所述药物组合物包含表达所述载体的细胞及药物可接受的稀释 剂或运载体。在再一个实施方案中，所述药物组合物包含编码所述抗体或抗体片段的核酸 分子及药物可接受的稀释剂或运载体。在进一步的实施方案中，所述药物组合物包含具有 所述核酸的载体及药物可接受的稀释剂或运载体。在另一个实施方案中，所述药物组合物 包含表达所述载体的细胞及药物可接受的稀释剂或运载体。 在一个实施方案中，本专利技术提供了一种减少对象中流感H7病毒感染或者降低对象 中流感H7病毒感染风险、抑制对象一或多种流感H7病毒毒株感染或者预防一或本文档来自技高网...
【技术保护点】
特异性结合H7血凝素的中和构象表位的单克隆抗体或抗体片段，其中所述中和构象表位：(a)包含氨基酸136Ser、137Gly和氨基酸227Glu，或者(b)包含氨基酸175Lys和氨基酸227Glu。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：HS·J·光，F·何，R·K·苏巴尚达拉沃塞，
申请(专利权)人：淡马锡生命科学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：新加坡;SG
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