一种甲基营养型芽孢杆菌YB-F7及其在防治植物病害中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种甲基营养型芽孢杆菌YB-F7及其在防治植物病害中的应用。本发明专利技术YB-F7菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10834；该菌株的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。本发明专利技术所筛选分离出的甲基营养型芽孢杆菌YB-F7是一株对小麦全蚀病菌、小麦纹枯病和小麦赤霉病菌土传病害具有较强抑制的微生物菌剂，本发明专利技术YB-F7菌剂可作为作物播种期或病害始发期施用，采用发酵制剂与种子拌种或用水稀释后通过灌根施入作物根际或喷雾施用；可以与对本生防菌株无副作用的其它杀菌剂、植物调节剂混合使用，调节土壤微生物菌群，控制小麦土传病害达到生态高效的目的。

【技术实现步骤摘要】
【专利说明】-种甲基营养型芽抱杆菌YB-F7及其在防治植物病害中的 应用 -、
： 本专利技术设及植物病害防治
，具体设及一种甲基营养型芽抱杆菌YB-F7W 及利用该芽抱杆菌防治植物病害作用及在制备防治植物病害菌剂中的应用。 二、技术背景： 目前，微生物防治技术是现代化可持续发展农业的重要组成部分，由于化学农药 的使用，导致自然界长期积累有害物质，造成环境污染、生态失衡等严重后果，随着对微生 物农药运一有益环境、无污染、维持生态平衡的防治技术研究，代替化学农药的使用已成为 目前微生物防治研究的热点。 芽抱杆菌是一种革兰氏阳性菌，具有生长迅速、性状稳定、适应性和抗逆性强，在 大田应用中，较其它生防菌优势明显，同时对人畜无毒、对环境无污染;芽抱杆菌代谢产物 丰富，分泌到胞外可抑制、杀死病原菌，或改变病原菌环境抑制其生长;其中一些菌株可W 产生多种抗菌物质，运些抗菌物质在生防过程中起着关键作用。芽抱杆菌是一类常见的生 防菌，目前已有多种具有括抗、促生等功能的芽抱杆菌报道。因此，筛选高效和活性稳定的 括抗菌株，生产高效的生物菌剂，推进新型微生物农药的研究，保障我国农业可持续发展具 有重要意义。 Ξ、
技术实现思路
： 本专利技术要解决的技术问题是：提供一种甲基营养型芽抱杆菌（Bacillus methylotrophicus)YB-F7及其在防治植物病害中的应用。本专利技术甲基营养型芽抱杆菌 (Bacillus methylotro地icus)YB-F7在防治植物病害中的应用具体为用于在生物防治全 蚀病菌引起的植物±传病害、纹枯病菌引起的植物根茎部病害或根腐镶刀菌引起的植物茎 基腐病害中的应用；还能够用于制备防治全蚀病菌引起的植物±传病害、纹枯病菌引起的 植物根茎部病害或根腐镶刀菌引起的植物茎基腐病害菌剂中的应用。 本专利技术通过W下技术方案解决上述问题： 本专利技术提供一种甲基营养型芽抱杆菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7,该菌 株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、，保藏编号为CGMCC NO. 10834。 所述甲基营养型芽抱杆菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7的保藏信息如下： [000引分类命名：甲基营养型芽抱杆菌； 保藏单位:中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中屯、(CGMCC); 保藏地址:北京市朝阳区北辰西路巧院3号，中国科学院微生物研究所；[00川保藏日期:2015年5月21日；[001 ^ 保藏编号：CGMCC NO. 10834。 根据上述的甲基营养型芽抱杆菌（Bacillus methylot;rophicus)YB-F7,所述甲基 营养型芽抱杆菌YB-巧的核巧酸序列为SEQ ID N0.1。 本专利技术甲基营养型芽抱杆菌（Bacillus methylot;rophicus)YB-F7用于在生物防 治全蚀病菌引起的植物±传病害、纹枯病菌引起的植物根茎部病害或根腐镶刀菌引起的植 物茎基腐病害中的应用。 本专利技术甲基营养型芽抱杆菌（Bacillus methylot;rophicus)YB-F7用于制备防治 全蚀病菌引起的植物±传病害、纹枯病菌引起的植物根茎部病害或根腐镶刀菌引起的植物 茎基腐病害菌剂中的应用。 本专利技术的积极有益效果： 本专利技术所筛选出的甲基营养型芽抱杆菌（Bacillus methylot;rophicus)YB-F7是 一株对小麦全蚀病菌（Gaeumannomyces gram inis)、小麦纹枯病菌（Rhizoctonia cerealis)、根腐镶刀菌(Fusarium graminearunOzh传病害具有较强抑制的微生物菌剂， YB-F7菌株对小麦全蚀病菌、小麦纹枯病菌和根腐镶刀菌室内抑菌效果分别为90 %、85.5% 和79.8 % ;溫室盆栽防治小麦全蚀病、小麦纹枯病效果分别达到65.7 %、76.5 %，防效高于 对照药剂或与对照药剂相当。本专利技术YB-巧菌株是由小麦根际±壤中分离得到的，对农作物 安全;本专利技术YB-巧菌剂可作为作物播种期或病害始发期施用，采用发酵制剂与种子拌种或 用水稀释后通过灌根施入作物根际或喷雾施用；并且，可W与对本生防菌株无副作用的其 它杀菌剂、植物调节剂混合使用，调节±壤微生物菌群，控制小麦±传病害达到生态高效的 目的。 四、【附图说明】： 图1本专利技术YB-巧菌株对小麦全蚀病菌的抑菌效果图； 图2本专利技术YB-巧菌株对小麦纹枯病菌的抑菌效果图； 图3本专利技术YB-巧菌株对小麦根腐镶刀菌的抑菌效果图； 图4本专利技术生防菌YB-巧防治小麦纹枯病室内防效测定示意图； 图5本专利技术生防菌YB-巧防治小麦全蚀病盆栽试验示意图； 图6本专利技术YB-巧菌株16rDNA序列系统发育树示意图。 五、【具体实施方式】： W下结合实施例进一步阐述本专利技术，但并不限制本专利技术的内容。实施例1:本专利技术甲基营养型芽抱杆菌（Bacillus methylo1:;rophicus)YB-F7菌株 的筛选与分离： 供试病原真菌：小麦全蚀病菌（Gaeumannomyces graminis )、小麦纹枯病菌 (Rhizoctonia cereal is)和根腐镶刀菌（Fusarium graminearum)。 细菌培养基： NA培养基:牛肉浸膏3g，酵母膏lg，蛋白腺5g，葡萄糖10g，琼脂15g，水lL，pH6.8~ 7.0，12rC 高压灭菌 30min。LB液体培养基:蛋白腺lOg，酵母浸膏5g，化C1 lOg，水lL，pH 7.0，121°C高压灭菌 30min。 本专利技术甲基营养型芽抱杆菌(Bacillus methylot;rophicus)YB-F7的分离与纯化： 本申请人在河南省农业科学院驻马店西平县于营村实验田种植基地，于2010~ 2014年进行小麦根部病害分离及±壤根际微生物多样性变化调查研究，在此研究试验中对 括抗菌株平板筛选分离。±壤采集是从小麦根际±壤去掉根部表面约5cm的覆±，按S形，随 机采集植株根系结合的松散±体，或从±壤中整体挖出，采用抖±法抖掉混合±样，将每个 地点采集的3个重复±样阴干。称取Ig阴干的±样装入灭菌试管中，加入9mL无菌水，在满旋 仪上充分满旋l-2min，制成1:10的±壤稀释液。从所得±壤稀释液中取出11^，加入91^无菌 水充分满旋成1:10的上壤稀释液，依次类推，制成1: 1〇3、1: 1〇4、1: 1〇5的上壤稀释液，各取 200化±壤稀释液于平板中间，用涂布棒将菌液涂开使菌液均匀的分布于NA平板表面，置于 28°C的恒溫培养箱中，培养约2地。挑取不同菌落形态的单菌落，通过镜检后在NA平板上划 线，28°C纯化培养，菌落生长特性不发生显著变化的菌株保存于NA培养基斜面备用，即得到 分离纯化的括抗菌。 括抗菌筛选： 将上述分离纯化得到的括抗菌W病原真菌（即小麦全蚀病菌、小麦纹枯病菌和根 腐镶刀菌）为祀标，采用平板对時培养法，将直径5mm的菌柄接种于PDA平板十字交叉中央 处，25°C培养箱倒置培养l-2d，接4种不同细菌，25°C培养2-3d后，观察其抑菌效果，并测量 抑菌带大小，选择抑菌效果较好的菌株进行复筛，即得到了抑菌效果较好的初筛括抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)YB‑F7，其特征在于：该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.10834。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：全鑫，杨艳艳，薛保国，孙虎，杨丽荣，武超，
申请(专利权)人：河南省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：河南;41