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一种降低水体COD沼泽红假单胞菌的培养基制造技术

技术编号:13165788 阅读:157 留言:0更新日期:2016-05-10 11:16
本发明专利技术属于微生物技术领域,具体公开了一种沼泽红假单胞菌的培养基。本发明专利技术所述沼泽红假单胞菌的培养基中添加了按如下组分配制而成的微量元素促生物母液:Na2EDTA 500~503mg,FeSO4.7H2O 200~203mg,ZnSO4.7H2O 10~13mg,MnSO4.4H2O 2~2.3mg,H3BO350~53mg,CoCl2.2H2O 20~23mg,NiCl2.6H2O 7~7.3mg,CuCl2.6H2O 0.5~0.8mg,Na2MoO4.2H2O 4~4.3mg,CaCl2200~203mg,水1L,pH 4.4~4.7。本发明专利技术利用特殊的微量元素促生物母液,获得高效降低水体COD(化学需氧量)的沼泽红假单胞菌,从而达到降低养殖池塘的使用量,进而改善养殖环境,降低养殖成本的目的。经本发明专利技术培养基分离的菌种作用,水体COD的降低率可达到70.41%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物
,具体地,设及一种高效降低水体COD沼泽红假单胞菌 的培养基。
技术介绍
当前我国水产业迅猛发展,但由于长期养殖方式不当,导致池塘老化,水质恶化, 有机物严重污染,COD(化学需氧量)大幅度升高,致病微生物大量繁殖,形成大量的鱼邮病 害。因此寻求一种新型水质改良剂已是当务之急。 沼泽红假单胞菌是广泛存在于自然界的微生物,是一类W光为能源,利用自然界 中的有机物、硫化物等为营养体,并能进行光合作用的生物。它不仅能净化水质,而且含有 丰富的营养,可作为鱼邮的巧料添加剂,同时能促进水产品的繁殖,提高解化率。沼泽红假 单胞菌的多种良好性能已引起国内外广大学者的关注。但由于沼泽红假单胞菌在培养过程 中易老化,需要不断更新发酵菌种,而从邮塘的污泥分离菌种是主要的方法。目前,分离培 养用常规的培养基平板分离法,由于存在氧压力且普通培养基不易分离到COD降解能力强 的高效沼泽红假单胞菌,往往得到的菌株对养殖池塘的有机物降解能力不强,导致沼泽红 假单胞菌在养殖池塘的使用量要加倍,增加养殖成本,成为制约沼泽红假单胞菌生产的一 个瓶颈。
技术实现思路
针对现有技术的不足,本专利技术提供了一种新型高效降低水体COD沼泽红假单胞菌 的培养基,利用特殊的微量元素促生物母液,获得高效降低水体COD(化学需氧量)的沼泽红 假单胞菌,从而达到降低养殖池塘的使用量,进而改善养殖环境,降低养殖成本的目的。[000引本专利技术的上述目的是通过W下技术方案予W实现的。 -种高效降低水体COD沼泽红假单胞菌的培养基,所述培养基中添加了按如下组 分配制而成的微量元素促生物母液:Na2EDTA 500~503mg,FeS〇4.7H2〇 200~203mg, ZnS〇4.7H2〇 10~13mg,MnS〇4.4也0 2~2.3mg,出B03 50~53mg,CoCl2.2H2〇 20~23mg, NiCl2.6H2〇 7~7.3mg,CuCl2.6H2〇 0.5~0.8mg,化2M0O4.2H2O 4~4.3mg,CaCl2 200~ 203mg,水lL,pH4.4~4.7。 该微量元素促生物母液添加 Ni和化元素,能有效激活沼泽红假单胞菌内降解有机 污染物的酶,从而提高沼泽红假单胞菌的降低水体COD的能力。[000引优选地,所述培养基为富集培养基,所述富集培养基的配方为:N也S04 1~1.5g, MgCh 0.2~0.5g,Na肥O35~5.3g,K2HP04 0.5~0.8g,化Cl 2~2.3g,酵母膏0.8~l.lg,微 量元素促生物母液40~43ml,水lL,pH 7.1~7.3。优选地,所述培养基为分离培养基,所述分离培养基的配方为:N也S〇4 1~1.3g, MgCh 0.2~0.5g,乙酸钢 3~3.3g,化肥O32.8~3g,K2HP〇4 0.5~0.8g,化Cl 1.9~2.2g, 酵母膏0.4~0.7g,微量元素促生物母液19~22ml,琼脂19~22g,水lL,pH7.1~7.3。 -种利用上述培养基分离沼泽红假单胞菌的方法,包括如下步骤: 51. 富集培养:将邮塘黑色底泥或/和邮塘水与所述富集培养基混合,于27~30°C、40W 白识灯光照培养,培养物与光源距离15~18cm,^天后观察到光照的一侧呈现微红培养物, 吸取该微红培养物与新鲜的富集培养基混合,培养70~7化; 52. 分离培养:将所述的分离培养基制成平板,干燥条件下在平板底部添加焦性没食 子酸和碳酸钢,排空充氮气,取S1得到的呈栋红色的菌液于所述平板上穿刺培养,27~30°C、 40W白识灯光照培养96~lOOh,培养物与光源距离15~18cm,得到菌落呈圆形,栋红色,直径为 ^4mm,作为纯菌种。 与现有技术相比,本专利技术有益效果在于:本专利技术提供了一种沼泽红假单胞菌的培 养基,利用特殊的微量元素促生物母液,获得高效降低水体COD(化学需氧量)的沼泽红假单 胞菌,从而达到降低养殖池塘的使用量,进而改善养殖环境,降低养殖成本的目的。经本发 明培养基分离的菌种作用,水体COD的降低率可达到70.41%。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术做进一步详细说明,但实施例并不对本专利技术做任何 形式的限定。除非特别说明,本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法 和设备。 实施例1 富集培养基:NH4SO4 lg,MgCl2 0.2g,化HC〇3 5g,K2HP〇4 0.5g,化C1 2g,酵母膏 0.8邑, 微量元素促生物母液40ml,水1升,pH 7.1。 分离培养基:NH4SO4 lg,MgCl2 0.2g,乙酸钢 3g,化肥〇3 2.8g,K2HP〇4 0.5g,NaCl 1.9g,酵母膏0.4g,微量元素促生物母液19ml,水1升,pH 7.1;分离培养基的配方中加 入19克琼脂。 其中,微量元素促生物母液:化2邸TA 500mg,FeS〇4.7出0 200mg,ZnS〇4.7出0 lOmg, MnS〇4.4出0 2mg,H3B〇3 50mg,CoCl2.2出0 20mg,NiCl2.6出0 7mg,CuCl2.6出0 0.5mg, Na2Mo04.2出0 4mg,CaCl2 200mg,将所有成份溶解在1000ml水中,pH4.4,过滤除菌。 利用上述培养基分离沼泽红假单胞菌: S1.沼泽红假单胞菌的富集培养:将邮塘黑色底泥20g和邮塘水30ml放入50ml的磨口玻 璃瓶中,黑色底泥放底层,加入富集培养基,于27°C,40W白识灯,培养物与灯距15CM光照培 养,在Ξ天内可见到液体培养基里和渺泥曝光的一侧呈现微红生长物,吸取1 ml微红培养 物接种于第二瓶富集培养基中,培养70h。 S2.沼泽红假单胞菌的分离培养:用平板倾注法厌氧分离;将所述的分离培养基制 成平板放入干燥器中,在平板底部添加焦性没食子酸和碳酸钢混合物250克,用真空累排除 空气,再充入氮气,取S1得到的呈栋红色的菌液于所述平板上穿刺培养,27°C、40W白识灯光 照培养96h,培养物与光源距离15cm,得到菌落呈圆形,栋红色,直径约为1mm,作为纯菌种。 [001引 实施例2 富集培养基:NH4SO4 l.lg,MgCl2 0.3g,Na肥03 5.1g,K2HP04 0.6g,化C1 2.1g,酵母膏 0.9g,微量元素促生物母液41ml,水1升,pH 7.2。分离培养基:NH4SO4 l.lg,MgCl2 0.3g,乙酸钢 3.1g,化肥〇3 2.9g,K2HPO4 0.6g, 化Cl 2.Og,酵母膏0.5g,微量元素促生物母液20ml,水1升,pH 7.23;分离培养基的配 方中加入20克琼脂。 其中,微量元素促生物母液:化2邸TA 501mg,FeS〇4.7出0 201mg,ZnS〇4.7出0 llmg, MnS〇4.4此0 2.1mg,曲B03 51mg,CoCl2.2出0 21mg,NiCl2.6出0 7.13mg,CuCl2.6出0 0.68mg, 船2]?〇04.2出0 4.13111邑,〔曰(:12 201111邑,将所有成份溶解在10001111水中,口!14.5,过滤除菌。利用上述培养基分离沼泽红假单胞菌: S本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种高效降低水体COD沼泽红假单胞菌的培养基,其特征在于,所述培养基中添加了按如下组分配制而成的微量元素促生物母液:Na2EDTA 500~503mg,FeSO4.7H2O 200~203mg,ZnSO4.7H2O 10~13mg,MnSO4.4H2O 2~2.3mg,H3BO3 50~53mg,CoCl2.2H2O 20~23mg,NiCl2.6H2O 7~7.3mg,CuCl2.6H2O 0.5~0.8mg,Na2MoO4.2H2O 4~4.3mg,CaCl2 200~203mg,水1L,pH 4.4~4.7。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:江学斌张玲华胡位荣马苗鹏黄瀚威
申请(专利权)人:广州大学华南农业大学
类型:发明
国别省市:广东;44

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