本发明专利技术公开了一种姬松茸多糖及其提取方法,方法包括:步骤(1)将姬松茸菌丝体置于质量浓度为1%~4%的草酸铵溶液中,在50~80℃下提取1~3h,然后加入活性炭,处理得到姬松茸菌丝体提取液;步骤(2)采用DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱对步骤(1)所得的姬松茸菌丝体提取液进行凝胶过滤层析,收集洗脱液;步骤(3)用0.5~0.8μm的无机陶瓷微滤膜对所述洗脱液进行浓缩,压力为0.50~0.90MPa,流速为10~20L/h,得到姬松茸多糖溶液;步骤(4)采用乙醇沉淀法处理所述姬松茸多糖溶液,得到姬松茸多糖。姬松茸多糖的提取率不低于9.0%,所制得姬松茸多糖纯度不低于96%。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生物医药
,尤其涉及一种姬松茸多糖的提取方法。
技术介绍
姬松茸又名巴西蘑菇,原产于巴西等南美国家。1992年引入我国。姬松茸具有抗辐射性能、提高人体免疫机能、能让免疫系统长期保持在最佳状态。所以姬松茸对一些因免疫系统失调而引发的疾病(如风湿性关节炎、哮喘、红斑狼疮等)都能发挥功效。姬松茸多糖具有螺旋状的三维立体结构,是一种β型的葡萄糖。此类多糖进入人体后不会被消化系统消化、分解。而是直接作用于细胞膜上的受体,使其发生药理作用。其药效显著并多样,而且许多效果是其他真菌多糖所不具备的。近年来姬松茸多糖已被医学界证实为具有显著的药理效果,美国宾州大学教授辛登博士与蓝伯研究所的蓝伯博士,发表关于抗癌作用等药效的研究报告后,姬松茸多糖便实时疯摩全球,知名度顿时提高,各国企业及医疗机构纷纷研制相应的胶囊、粉剂。目前关于姬松茸多糖的提取方法比较多,公开号CN1647695A提出了一种先用乙醇除小分子杂质,然后用水提取姬松茸多糖,然后将水溶液浓缩。该方法虽然除去了部分杂质,但是对于蛋白质的干扰不能不排除,而且提取纯度很低;公开号为CN1663965A,采用超临界萃取,然后水提取,但这种方法对设备要求高,提取率也不高,设备要求高也不合适工业化大生产。公开号为CN101768614A的专利提供一种由酶除蛋白,然后水提取,接下来树脂纯化的一种获取姬松茸多糖的方法,但是该方法的问题就是提取率低,而且提取后的纯度也低,达不到目前医药市场对姬松茸多糖的品质要求。
技术实现思路
针对上述技术问题,本专利技术提供了一种提取率高、提取纯度高的姬松茸多糖的提取方法。本专利技术还提供了一种纯度高的姬松茸多糖。本专利技术提供的技术方案为:一种姬松茸多糖的提取方法,包括以下步骤:步骤(1)将姬松茸菌丝体置于质量浓度为1%~4%的草酸铵溶液中,在50~80℃下提取1~3h,然后加入活性炭,处理得到姬松茸菌丝体提取液;步骤(2)采用DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱对步骤(1)所得的姬松茸菌丝体提取液进行凝胶过滤层析,收集洗脱液;步骤(3)用0.5~0.8μm的无机陶瓷微滤膜对所述洗脱液进行浓缩,压力为0.50~0.90MPa,流速为10~20L/h,得到姬松茸多糖溶液;步骤(4)采用乙醇沉淀法处理所述姬松茸多糖溶液,得到姬松茸多糖。优选的是,所述的姬松茸多糖的提取方法中,所述步骤(1)中,在加入活性炭之前,保持温度,加入活性炭后,保温搅拌30~60min,活性炭相对于草酸铵溶液的质量比为5%~8%。优选的是,所述的姬松茸多糖的提取方法中,所述步骤(1)中,在保温搅拌之后,板框压滤得到姬松茸菌丝体提取液。优选的是,所述的姬松茸多糖的提取方法中,所述步骤(2)中,采用0.1mol/LNaCl溶液进行洗脱,流速为10.0~30.0L/h。优选的是,所述的姬松茸多糖的提取方法中,所述步骤(4)中,将所述姬松茸多糖溶液浓缩至原体积的1/5,向浓缩液中加入乙醇使乙醇在浓缩液中的终浓度达到70~80%,静置5~8h。优选的是,所述的姬松茸多糖的提取方法中,所述步骤(4)中,静置之后,在2000rpm下离心,取沉淀物,在40℃下真空干燥,得到姬松茸多糖。一种由所述方法制备得到的姬松茸多糖。本专利技术所述的姬松茸多糖的提取方法有以下有益效果:采用草酸铵溶液提取姬松茸多糖,对子实体和菌丝体的多糖提取都能提高产率,提取时间短,而且条件温和。本工艺采用活性炭在水中脱色,吸附,使水中的有机物和不溶物被活性炭吸附,同时也舍弃了Sevag法除蛋白这个方法,放弃使用氯仿、正丁醇等大量有机溶解,是一种绿色环境友好型工艺。采用陶瓷微滤膜分离纯化姬松茸多糖,定向准确地分离出了姬松茸多糖。采用本专利技术的方法,姬松茸多糖的提取率不低于9.0%,所制得姬松茸多糖纯度不低于96%。附图说明图1为本专利技术的一个实施例中姬松茸多糖的提取方法的流程图。具体实施方式下面结合附图对本专利技术做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。如图1所示,本专利技术提供一种姬松茸多糖的提取方法,包括以下步骤:步骤(1)将姬松茸菌丝体置于质量浓度为1%~4%的草酸铵溶液中,在50~80℃下提取1~3h,然后加入活性炭,处理得到姬松茸菌丝体提取液;步骤(2)采用DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱对步骤(1)所得的姬松茸菌丝体提取液进行凝胶过滤层析,收集洗脱液;步骤(3)用0.5~0.8μm的无机陶瓷微滤膜对所述洗脱液进行浓缩,压力为0.50~0.90MPa,流速为10~20L/h,得到姬松茸多糖溶液;步骤(4)采用乙醇沉淀法处理所述姬松茸多糖溶液,得到姬松茸多糖。本专利技术的特点是采用草酸铵提取、超滤分离、乙醇沉淀精制等工艺从菌丝体中提取姬松茸多糖,提取方法操作简单,是一种可实现连续大生产要求的稳定工艺。本专利技术中,采用草酸铵溶液提取姬松茸多糖,对子实体和菌丝体的多糖提取都能提高产率,提取时间短,而且条件温和。本专利技术采用活性炭在水中脱色,吸附,使水中的有机物和不溶物被活性炭吸附,同时也舍弃了用Sevag法除蛋白这个步骤,放弃了氯仿、正丁醇等大量有机溶解,是一种绿色环境友好型工艺。本专利技术采用无机陶瓷微滤膜分离纯化姬松茸多糖,定向准确地分离出了姬松茸多糖,而将其他杂质分离出去,从而保证对姬松茸多糖提取的纯度。目前广泛使用的有机微滤膜,都存在化学稳定性差、易老化、使用寿命短以及耐高温、酸、碱及有机溶剂性能差等缺点。与有机膜相比,无机陶瓷膜具有耐高温、耐酸碱、机械强度高、使用寿命长、运行稳定性好、污染后易清洗等优点。利用本专利技术的方法,对姬松茸多糖的提取率不低于9.0%,姬松茸多糖纯度不低于96%。进一步地,所述的姬松茸多糖的提取方法中,所述步骤(1)中,在加入活性炭之前,保持温度,加入活性炭后,保温搅拌30~60min,,活性炭相对于草酸铵溶液的质量比为5%~8%。活性炭可以充分吸附除去蛋白质等杂质,保证最终产品的纯度,并且同时减少杂质对后续凝胶过滤层析的干扰。进一步地,所述的姬松茸多糖的提取方法中,所述步骤(1)中,在保温搅拌之后,板框压滤得到姬松茸菌丝体提取液。进一步地,所述的姬松茸多糖的提取方法中,所述步骤(2)中,采用0.1mol/LNaCl溶液进行洗脱,流速为10.0~30.0L/h。合适的流速可以保证将提取液中的本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种姬松茸多糖的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤(1)将姬松茸菌丝体置于质量浓度为1%~4%的草酸铵溶液中,在50~80℃下提取1~3h,然后加入活性炭,处理得到姬松茸菌丝体提取液;步骤(2)采用DEAE‑纤维素‑A52弱阴离子交换柱对步骤(1)所得的姬松茸菌丝体提取液进行凝胶过滤层析,收集洗脱液;步骤(3)用0.5~0.8μm的无机陶瓷微滤膜对所述洗脱液进行浓缩,压力为0.50~0.90MPa,流速为10~20L/h,得到姬松茸多糖溶液;步骤(4)采用乙醇沉淀法处理所述姬松茸多糖溶液,得到姬松茸多糖。
【技术特征摘要】
1.一种姬松茸多糖的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤(1)将姬松茸菌丝体置于质量浓度为1%~4%的草酸铵溶液中,在
50~80℃下提取1~3h,然后加入活性炭,处理得到姬松茸菌丝体提取液;
步骤(2)采用DEAE-纤维素-A52弱阴离子交换柱对步骤(1)所得的姬
松茸菌丝体提取液进行凝胶过滤层析,收集洗脱液;
步骤(3)用0.5~0.8μm的无机陶瓷微滤膜对所述洗脱液进行浓缩,压
力为0.50~0.90MPa,流速为10~20L/h,得到姬松茸多糖溶液;
步骤(4)采用乙醇沉淀法处理所述姬松茸多糖溶液,得到姬松茸多糖。
2.如权利要求1所述的姬松茸多糖的提取方法,其特征在于,所述步骤
(1)中,在加入活性炭之前,保持温度,加入活性炭后,保温搅拌30~60min,
活性炭相对于草酸铵溶液的质量比为5%~...
【专利技术属性】
技术研发人员:张春颖,
申请(专利权)人:西藏天虹科技股份有限责任公司,
类型:发明
国别省市:西藏;54
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