一种新化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种新化合物，所述化合物为无色油状，分子式为C10H12O4，不饱和度为5，其结构式如式为紫外光谱显示该化合物紫外最大吸收在203nm。本发明专利技术还涉及该化合物的提取分离方法，利用乙酸乙酯进行萃取，并将萃取液分离、纯化，得到本发明专利技术单体化合物。该化合物对抗真菌的活性作用，为开发抗真菌的药物提供了先导化合物，对开发天然产物和植物药的新用途具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于有机化合物
，具体涉及。
技术介绍
西藏大花黄牡丹（Paeonialudlowii)为毛茛科（Ranunculacea)，苟药属 (Paeonia)，牡丹组(Sect.MoutanDC.)植物。仅生长在我国西藏的米林、林芝、波密、察隅、 隆子等县的海拔2500~3500m的雅鲁藏布江开阔河谷及山坡林缘灌丛中，数量极少，且呈逐 年减少趋势，属于西藏特有的濒临灭绝的保护植物。据当地地方志记载，藏民早在几百年前 就已经使用西藏大花黄牡丹根皮治疗妇科疾病、心脑血管疾病、皮肤癣菌病等。目前，对大花黄牡丹根皮的药用效果已经有相关研究，但由于大花黄牡丹根皮中 化学成分多种多样，对于其活性成分的研究还未见有相关报道，申请人利用正相硅胶柱色 谱、反相(MCI-Gel)柱色谱、凝胶（SephadexLH-20)柱色谱、高效液相色谱等技术对大花黄 牡丹根皮的乙酸乙酯提取组分进行分离、纯化，得到单体化合物23个，通过紫外光谱、红外 光谱、质谱、核磁共振谱并结合文献报道确定其结构，其中包括单萜类化合物7个、单萜苷类 化合物3个、酚类化合物8个、酚苷类化合物3个、生物碱类化合物1个、三萜类化合物1个，其 中新化合物4个，已知化合物19个，均首次从西藏大花黄牡丹中分离得到。
技术实现思路
本专利技术通过对大花黄牡丹根皮的深入研究，提供了一种与丹皮酚具有相似结构的 新化合物和其制备方法。本专利技术具体通过以下技术方案实现： -种新化合物，其结构式如式I所示： 式I所述化合物为无色油状，通过ESI-MS谱（?-Hrm/z，195.0655calcdfor(：1〇!111〇4，195.0663)，确定该化合物的分子式(： 1()!112〇4，其不饱 和度为5。IR谱(KBr压片）给出了羟基（3419cm-〇、羰基（1671cm-〇和芳香环（1592,1516， 1464，1428〇11-1)信号。紫外光谱显示该化合物紫外最大吸收在20311111。所述的式I化合物的制备方法，具体包括以下步骤： 1)取干燥的西藏大花黄牡丹根皮粉碎后，加入95 %乙醇，室温浸提24h，重复抽滤， 50°C减压浓缩，利用乙酸乙酯进萃取，将萃取液在50°C条件下减压浓缩，得到干粉A; 2)将干粉A与聚酰胺按质量比1:4~5的比例混合，利用体积浓度为20 %的甲醇水 溶液洗脱得到组分B; 3)将组分B用硅胶拌样，用石油醚和乙酸乙酯体积比为10:1的混合液洗脱，得到组 分C; 4)将组分C进行硅胶柱色谱，用石油醚和丙酮体积比为6:1的混合液洗脱，得到组 分D; 5)将组分D继续进行凝胶柱色谱，用甲醇洗脱，分离纯化得到式I单体化合物。 本专利技术制备方法步骤(1)中根皮与95%乙醇的质量体积比为1:10。本专利技术制备方法步骤(2)中干粉A与聚酰胺优选按质量比1:4.2的比例混合。本专利技术还提供了式I化合物作为抗真菌药物的应用。所述的药物可以按需要加工成任何医药上可接受的剂型，其中较优选的剂型为片 剂、胶囊剂、颗粒剂、糖浆剂、冻干粉针剂或注射液。其配制可由通常的本领域技术人员所公 知的加工方法制备，即将活性物质式I化合物与液体溶剂或固体载体混合后，再加入填充 剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、溶剂、表明活性剂、香味剂、防腐剂、润滑剂、甜味 剂或色素中的一种或几种。本专利技术所述的药物可以由使用者在使用前经稀释或直接使用。 本专利技术的有益效果为：本专利技术从西藏大花黄牡丹根皮中提取分离出一种新化合 物，该提取与分离方法简便、快速，效率高。同时该化合物具有抗真菌的活性作用，相比西藏 大花黄牡丹根皮药理作用更确切，解决了西藏大花黄牡丹根皮中化学成分复杂，质量难以 控制的问题。【具体实施方式】 下面结合实施例对本专利技术做进一步的说明，以下所述，仅是对本专利技术的较佳实施 例而已，并非对本专利技术做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示 的
技术实现思路
加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本专利技术方案内容，依据本专利技术 的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本专利技术的保护范围内。 实施例1取干燥的西藏大花黄牡丹根皮，粉碎后准确称取10kg，按照根皮与溶剂1:10(W/V) 的比例加入95%乙醇，室温浸提24h，抽滤，重复三次，50°C减压浓缩，随后将总的提取物用 乙酸乙酯萃取，萃取液在50°C条件下减压浓缩，得到356g的组分干粉A。将干粉A称取356g与1.5kg聚酰胺拌样，进行中压液相色谱，反相柱填充材料为MCI-Gel，利用体积浓度为20%的甲醇水溶液洗脱得到51g组分B，用硅胶拌样，并进行硅胶 柱色谱，用体积比10:1的石油醚/乙酸乙酯混合液洗脱后，重复进行硅胶柱色谱，利用体积 比6:1石油醚/丙酮混合液洗脱，合并后继续进行凝胶柱色谱，甲醇作为洗脱剂，分离纯化得 到式I单体化合物4mg。实施例2单体化合物结构鉴定 1)波谱试验分离得到的化合物，经过分析液相色谱进行纯度检测，若无紫外吸收，分析液相色 谱无法检测，进行TLC检测。并根据单体化合物极性选取相应的氘代溶剂溶解，利用NMR检 测，四甲基硅烷(TMS)作为内标。新化合物需KBr压片进行IR鉴定化合物结构中所含的官能 团种类；同时，取适量化合物，用相应极性溶剂溶解进行UV检测，确定化合物结构中具有紫 外吸收的官能团种类。根据ESI-MS推测化合物分子量，再进一步根据HR-ESI-MS确定化合物 的分子量、分子式和不饱和度。 2)糖构型的确定参照酸水解薄层层析法，称取适量的化合物，甲醇溶解，配制成lmg/mL的溶液，用 毛细管在硅胶板上点样，并投放于装有浓硫酸的密闭展开槽中，60°C水浴30min，结束后取 出用吹风机吹至溶剂挥尽，在硅胶板空白处点上D-葡萄糖、D-芹糖、D-木糖标准品，将氯仿/ 甲醇（7: 3，v/v)的混合溶液用水饱和，取9mL用水饱和后的氯仿/甲醇溶液，再加入lmL的冰 醋酸混合均匀后作为展开剂展开，用邻苯二甲酸苯胺的正丁醇溶液喷雾，于l〇5°C加热 lOmin显色。苯胺-邻苯二甲酸显色剂的配置：准确称取苯胺〇.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于 1OOmL水饱和的正丁醇。 3)结果与分析无色油状。通过ESI-MS谱（-m/z195)和HR-ESI-MS谱（-m/z, 195 · 0655calcdforC10H1104，195 · 0663)，确定该化合物的分子式C10H1204，其不饱和度 为5。IR谱(KBr压片）给出了羟基（3419cm-l)、羰基（1671cm-l)和芳香环（1592，1516，1464， 1428cm-l)信号。紫外光谱显示该化合物紫外最大吸收在203nm〇 1H-NMR谱中出现1个甲氧基氢信号δΗ3.91(8,3!1，!1-10)、1个甲基氢信号1.40((1，了 =7.2泡，3!1，!1-9)，3个芳香质子信号5!17.56((1，了 = 8.4!^，1!1，!1-2)、5!16.86((1(1，了=1.8， 8.4Hz，1Η，Η-4)和δΗ7.57 (d，J= 1.8Hz，1Η，当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新化合物，其特征在于：结构式如式I所示：

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张彦龙，赵丹丹，黄悦，曲宏悦，江伟，李建平，曾伟民，
申请(专利权)人：黑龙江大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23