一种控制芽孢杆菌产生臭味的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种控制芽孢杆菌产生臭味的培养方法，属于微生物发酵技术领域。本发明专利技术通过向含酵母粉0.5％、蛋白胨1％、NaCl 1％，pH7.0的发酵培养基中添加葡萄糖或甘油，并控制葡萄糖或甘油的浓度，使芽孢杆菌发酵过程中不产生臭味。其中葡萄糖添加量为2～3％，甘油添加量为2～3％。本方法实现了控制芽孢杆菌产生臭味的技术效果，避免了将芽孢杆菌添加至食品发酵过程中因其自身臭味导致的对食品品质的影响。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，通过向发酵培养基添加碳源 并控制碳源的浓度，使芽孢杆菌发酵过程中不产生臭味，属于微生物发酵

技术介绍
芽孢杆菌是革兰氏阳性菌，一种好氧微生物，大部分芽孢杆菌都被作为重要的工 业菌种应用于工业生产。如枯草芽孢杆菌、解淀粉芽胞杆菌等已经被广泛的应用于畜牧、医 药、植物病害防治等领域，并且显示出巨大的社会效益和生态效益。 芽孢杆菌也作为常见的酶的表达宿主，被广泛用于食品、化工、医药等领域。例如 以枯草芽孢杆菌为宿主表达的L-天冬酰胺酶能够催化天冬酰胺分解，常用于在食品加工过 程降低丙烯酰胺的含量;再如以地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌和解淀粉芽孢 杆菌等芽孢杆菌为宿主表达的普鲁兰酶和淀粉酶已经应用于工业生产，大大提高了淀粉质 原料的利用率。近年来，解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌等 芽孢杆菌也被应用于发酵食品，如将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等应用 到白酒酿造过程中能够有效抑制白酒酿造过程中的土臭味。然而，芽孢杆菌在培养过程中 会产生难闻的、发臭的味道，如果将其添加至食品发酵过程中会影响食品的品质。因此，针 对这一问题，本专利技术提供了，解决了芽孢杆菌在液 体发酵过程中产生臭味的问题。
技术实现思路
本专利技术提供了一种控制芽孢杆菌产生臭味的方法，本方法通过向发酵培养基中添 加葡萄糖或甘油并控制其添加量，使芽孢杆菌在发酵过程中不产生臭味。 所述方法是在菌体发酵过程使用发酵培养基;所述发酵培养基，按质量百分数进 行配比，含有酵母粉0.5%、蛋白胨l%、NaCl 1%，并向其中添加葡萄糖或甘油，调节初始pH 为7.0~7.2,其余为水。 在本专利技术的一种实施方式中，所述葡萄糖的浓度为2%~3%。 在本专利技术的一种实施方式中，所述甘油的浓度为2%~3%。 在本专利技术的一种实施方式中，所述芽孢杆菌为以下任意一种或者多种:解淀粉芽 孢杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌。 在本专利技术的一种实施方式中，所述菌体发酵是按下述操作进行:将种子液培养获 得的种子液按5%的接种量接种于发酵培养基，然后在37°C，220r/min的条件下发酵12~ Mlo 在本专利技术的一种实施方式中，所述方法是先对菌种进行活化，然后进行种子液培 养，再使用发酵培养基发酵获得菌体。 在本专利技术的一种实施方式中，所述种子液培养操作步骤为:挑取固体培养基上的 单菌落接种于种子培养基，在37°C、220r/min的条件下摇床培养12h得到种子液;所述种子 培养基按质量百分比的配方如下:酵母粉ο. 5%、蛋白胨1 %、NaCl 1 %，初始pH7.0。 所述方法步骤如下： 1)将保存在-80°C甘油管中的菌体划线接种于固体培养基，置于37°C恒温培养箱 中培养12h获得单菌落。上述所述的固体培养基按质量百分比的配方如下:酵母粉0.5%、蛋 白胨 l%、NaCl 1%、琼脂 1.8% ~2%，ρΗ7·0。 2)挑取固体培养基上的单菌落接种于种子培养基，在37°C，220r/min的条件下摇 床培养12h得到种子液。上述所述的种子培养基按质量百分比的配方如下:酵母粉0.5%、蛋 白胨 l%、NaCl 1%，ρΗ7·0。 3)将步骤2)中获得的种子液按5 %的接种量接种于发酵培养基，然后在37°C， 220r/min的条件下发酵12~24h。 本专利技术还提供一种控制芽孢杆菌产生臭味的培养基，所述培养基按质量百分比进 行配比，含有酵母粉0.5%、蛋白胨1 %、NaCl 1 %，此外还含有葡萄糖2 %~3 %或甘油2 %~ 3%，其余为水。 与现有技术相比，本专利技术具有以下优势和有益效果： 本专利技术通过向发酵培养基中添加葡萄糖或甘油，来达到控制芽孢杆菌产生臭味的 目的，使其臭味降低或消失，避免了将芽孢杆菌添加至食品发酵过程中因其自身臭味导致 的对食品品质的影响。【具体实施方式】 以下结合具体的实例对本专利技术做进一步的详细说明。 实施例1 1.苏云金芽孢杆菌LG1的菌株活化将保藏在_80°C甘油管中的苏云金芽孢杆菌LG1划线接种于固体培养基，置于37°C 恒温培养箱中培养12h获得单菌落。固体培养基的组成：酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、NaCl 1 〇g/L、琼脂 20g/L，初始 pH7 · 0。 2.苏云金芽孢杆菌LG1的种子液培养挑取固体培养基上的单菌落接种于种子培养基，摇瓶种子培养基的装液量25/ 250mL。在37°C，220r/min的条件下摇床培养12h得到种子液。种子培养基的组成:酵母粉5g/ L、蛋白胨 1 Og/L、NaCl 1 Og/L，初始 pH7 · 0。 3.苏云金芽孢杆菌LG1的菌体发酵 将步骤2中获得的种子液按5%的接种量接种于发酵培养基(A~F)，然后在37°C， 220r/min的条件下发酵培养12~24h，评价发酵培养基中菌体产生臭味情况。发酵培养基的组成如下：发酵培养基 A:酵母粉 5g/L、蛋白胨 10g/L、NaCl 10g/L，pH7.0; 发酵培养基 B:酵母粉 5g/L、蛋白胨 10g/L、NaCl 10g/L，甘油 5g/L，pH7.0; 发酵培养基C:酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、NaCl 10g/L，葡萄糖5g/L，pH7.0; 发酵培养基 D:酵母粉 5g/L、蛋白胨 10g/L、NaCl 10g/L，甘油 20g/L，pH7.0。 发酵培养基E:酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、NaCl 10g/L，葡萄糖20g/L，pH7 · 0。 发酵培养基F:酵母粉5g/L、蛋白胨1 Og/L、NaCl 1 Og/L，麦芽糖20g/L，pH7 · 0。 分别将苏云金芽孢杆菌用上述6种发酵培养基发酵12h至24h后，建立20人感官评 定小组，以3个等级评估发酵液的臭味程度:有明显臭味(6~10分），有轻微臭味（1~5分）， 无臭味(〇分）。结果如表1所示。 表1苏云金芽孢杆菌LG1发酵结束后发酵液气味评价统计表经过统计，菌体发酵过程使用发酵培养基A、B、F的苏云金芽孢杆菌LG1的发酵液有 明显臭味，并且经12000r/min离心弃上清后的菌泥仍有明显臭味。菌体发酵过程使用发酵 培养基C获得的苏云金芽孢杆菌LG1的发酵液有轻微臭味，并且经12000r/min高速离心弃上 清后的菌泥也有轻微臭味。而菌体发酵过程使用发酵培养基D、E获得的苏云金芽孢杆菌LG1 的发酵液无臭味形成，并且经12000r/min高速离心弃上清后的菌泥也无臭味。 实施例2 1.解淀粉芽孢杆菌JY06的菌株活化将保藏在_80°C甘油管中的解淀粉芽孢杆菌JY06划线接种于固体培养基，置于37 °C恒温培养箱中培养12h获得单菌落。固体培养基的组成:酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、NaCl 1 〇g/L、琼脂 20g/L，初始 pH7 · 0。[00411 2.解淀粉芽孢杆菌JY06的种子液培养挑取固体培养基上的单菌落接种于种子培养基，摇瓶种子培养基的装液量25/ 250mL。在37°C，220r/min的条件下摇床培养12h得到种子液。种子培养基的组成:酵母粉5g/ L、蛋白胨 1 Og/L、NaCl 1 Og/L，初始 pH7 · 0。 3.解淀粉芽孢杆菌JY0本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种控制芽孢杆菌产生臭味的方法，其特征在于，所述方法是在菌体发酵过程使用发酵培养基；所述发酵培养基，按质量百分数进行配比，含有酵母粉0.5％、蛋白胨1％、NaCl1％，并向其中添加葡萄糖或甘油，调节初始pH为7.0～7.2，其余为水。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：方芳，张梦寒，张继冉，堵国成，陈坚，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32