用于上调抗原表达的方法技术

本发明专利技术涉及放射免疫偶联物，其能够上调一种或多种抗原的表达。上调的抗原可以是由放射免疫偶联物靶向的抗原或在相同的细胞上表达的不同抗原。本发明专利技术还涉及通过利用抗原的这种增强表达治疗癌症和免疫系统的疾病和病症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】本专利技术的
本专利技术涉及放射免疫偶联物，其能够上调一种或多种抗原的表达。该上调的抗原 可以是由所述放射免疫偶联物靶向的抗原或者是在相同的细胞上表达的不同抗原。 本专利技术的背景 单克隆抗体治疗(MAT)的使用已是引起极大的兴趣和较强的科研努力的领域。为 了有效，MAT取决于每个细胞的足够数目的抗原，细胞的抗原可以结合用于触发响应 (Sugimoto等人，2009，Czuczman等人，2008) 〇 放射免疫治疗（RIT)的使用已被批准为癌症治疗中的治疗选择（Stevens等人， 2012)。如今放射免疫治疗主要用于经历从化疗和/或MAT复发的那些患者（Stevens等人， 2012)。从文献中已知，高剂量率外束照射可导致B细胞中CD20的增加，而且该响应受到如 抗坏血酸、PEG-过氧化氢酶等等的抗氧化剂的抑制并且通过例如H2O2和丁硫氨酸亚砜胺的 氧化剂增强(Kunala等人，2001;Gupta等人，2008)。值得注意的是，在外束曝光后该效果仅 持续约48h。 但是，未知的是低剂量率放射免疫治疗是否可上调抗原表达。事实上，Blgstoam 等人(2012)发现试验性放射免疫治疗后抗原表达减少。 此外，单克隆抗体治疗可引起肿瘤细胞上的抗原表达减少(MustO等人，2011)以及 与化疗联合的抗体减少(Hiraga等人，2009)。 因此，在该领域已知的是外束高剂量率照射可引起抗原表达增加以及放射免疫治 疗和单克隆抗体治疗可引起癌细胞中抗原表达减少。施用放射免疫治疗作为还原治疗(例如，利妥昔单抗(抗体））的目前标准是作为调 理治疗在Zevalin(放射免疫偶联物)之前给予。 这种方法的一个问题是实验工作和临床数据已经表明，抗体治疗可引起抗原漂 移，即朝向具有低抗原表达的细胞的选择压力，这成为治疗抗性(Musto和D'Auria，2011)。 这也已在实验RIT中表明（Elgstr6m等人，2012)。 因此，可导致相反效应，即，经处理的细胞上的抗原增加的针对性的治疗选择将是 一种非常有价值的治疗工具。 专利技术概述 本专利技术涉及放射免疫偶联物，其能够上调一种或多种抗原的表达。上调的抗原可 以是由放射免疫偶联物靶向的抗原，在相同的细胞上表达的不同抗原，或二者的组合。 该表达允许靶向和特异性抑制癌细胞和免疫系统的细胞。 因此，本专利技术的一个方面涉及包含单克隆抗体，可选的连接子和放射性核素的放 射免疫偶联物，所述放射免疫偶联物用于上调一种或多种抗原的抗原表达。 本专利技术的一个实施方案中，被上调的所述一种或多种抗原是在B细胞癌细胞的表 面上表达的抗原。 本专利技术的另一个实施方案中，在患有癌症的患者中在免疫治疗或免疫偶联物治疗 之前进行上调。 本专利技术的另一个实施方案中，患者患有B细胞恶性肿瘤，其选自非霍奇金淋巴瘤和 慢性淋巴细胞白血病。 本专利技术的又一个实施方案中，放射性标记的是单克隆抗体HH1。 本专利技术的一个实施方案中，连接子是选自p-SCN-bn-D0TA、D0TA-NHS-酯、P-SCN-Bn-DTPA和CHX-A" -DTPA的螯合连接子。 本专利技术的另一个实施方案中，放射性核素选自47Sc、67Cu、9()Y、 1()5Rh、117mSn、131I、 149Tb ^ 153Sm ^ 161Tb ^ 165Dy ^ 177Lu ^ 186Re ^ 188Re ^ 211At ^ 212Pb ^ 212Bi ^ 213Bi ^ 223Ra ^ 224Ra ^ 225Ac^P227Th 〇 本专利技术的进一步实施方案中，上调的抗原选自⑶37,⑶19，CD20,ro21，CD22，HLA-DR，CD23，CD39，CD52，CDw75和CD80。 本专利技术的又一个实施方案中，所述放射免疫偶联物被配制成药物组合物。 本专利技术的另一个实施方案中，所述药物组合物包括一种或多种药学上可接受的载 体或佐剂。 本专利技术的进一步的实施方案中，用途是组合治疗，其中在放射免疫偶联物之后是 用抗体治疗、免疫偶联物治疗或它们的组合的同时或后处理。 本专利技术的另一个实施方案中，上调的抗原是CD20,以及上调之后是以单次施用或 重复施用模式使用利妥昔单抗的抗CD20抗体治疗。 本专利技术的又一个实施方案中，所述同时或后处理是靶向不同于放射免疫偶联物的 抗原。 本专利技术的另一个方面涉及上调抗原表达的方法，其包括对其中上调抗原表达将是 有利的患者施用放射免疫偶联物。 本专利技术的一个实施方案中，患者患有B细胞恶性肿瘤。 本专利技术的另一个实施方案中，用途是组合治疗，其中在放射免疫偶联物之后是用 抗体治疗、免疫偶联物治疗或它们的组合的同时或后处理。 在另一个实施方案中，重复进行放射免疫治疗和免疫治疗或免疫偶联物治疗几个 周期。 在另一个实施方案中，以低剂量给予放射免疫治疗，这本身在肿瘤中具有低细胞 杀伤效果，但具有显著的抗原上调。附图的简要说明 图1显示如通过流式细胞术所测定的用Betalutin孵育24h后Daudi细胞的CD20和 ⑶37表达增加 (t = 0表示在去除Betalutin之后加入新鲜培养基时）。 图2显示如通过流式细胞术所测定的用mLu_tetulomab(Betalutin)孵育Daudi细 胞Ih和24h期间CD37和CD20的上调。 图3(表1)显示如通过流式细胞术所测定的用mLu_tetulomab(Betalutin)孵育Ih 之后抗原表达增加。图4(表2)显示如通过流式细胞术所测定的对于用mLu-利妥昔单抗(Betalutin) 处理的细胞，⑶20和⑶37的上调。图5(表3)显示如通过细胞结合测定法所测定的在加入Betalutin或对照之后4天/ 8天/11天/15天，125I-利妥昔单抗与放射免疫治疗之后的肿瘤细胞的结合相对于对照的％ 增加。 图6示出注射125I-利妥昔单抗3天后125I-利妥昔单抗的生物分布。用350MBq/kg Betalutin(处理)或冷HHl (对照）提早5天注射老鼠。 本专利技术现在将更加详细地描述如下。本专利技术的详细描述本专利技术人惊讶地发现，当用低剂量率β发射177Lu标记HHl抗体（也称为177Lu-tetulomab或Betalut in)对B细胞相关的抗原⑶37进行实验时，由此处理的细胞将上调⑶37 和⑶20(另一个B细胞相关的抗原）的表达。 因此，它表明用mLu-HHl治疗可以改善MAT在如癌症和自身免疫性疾病的B细胞疾 病中的情况。 这也是意外的发现，对⑶37抗原阳性细胞使用mLu-HH-I的低剂量率放射免疫治 疗不仅造成癌细胞中抗原表达的增加，并且与外束曝光的公开数据相比也造成了延长效 应。 放射免疫治疗导致⑶37和⑶20抗原的表达增加。这暗示，使用例如mLu-HH-I的放 射免疫治疗可以用作对抗体治疗的引导治疗，由于抗体治疗在很大程度上取决于抗原的良 好表达。 另一个值得注意的发现是，对比于在外束曝光后上调抗原表达将持续仅约两天， 在暴露于放射免疫治疗后上调抗原表达将持续一周到两周之间。 可以设想使用有针对性的抗体治疗的新方法，即，使用放射免疫治疗的诱导治疗， 之后是在接下来的几天和几周内的抗体或抗体偶联物治疗以利用增加的抗原表达。 因此，本专利技术涉及放射免疫偶联物，其能够上调一种或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种放射免疫偶联物，所述放射免疫偶联物包括：‑单克隆抗体，‑可选的连接子，‑放射性核素，并且用于上调一种或多种抗原的抗原表达。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗伊·H·拉森，阿达·雷佩托利亚马萨雷斯，
申请(专利权)人：诺帝克纳诺维科特公司，
类型：发明
国别省市：挪威;NO