一种诊治颅内动脉瘤的分子标志物制造技术

本发明专利技术公开了DMBX1基因可以作为颅内动脉瘤诊断的分子标志物，本发明专利技术的实验证明：与正常人相比，DMBX1基因在颅内动脉瘤患者中表达量高。本发明专利技术还公开了DMBX1基因可以用于制备治疗颅内动脉瘤的药物，细胞凋亡实验证明DMBX1基因过表达能促进血管平滑肌细胞凋亡。本发明专利技术的研究成果提供了一种新的颅内动脉瘤临床诊断方法，同时提供了一种治疗颅内动脉瘤的药物新靶标。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地涉及人DMBXl基因在颅内动脉瘤的诊断、治疗 中的用途。
技术介绍
颅内动脉瘤又叫做脑动脉血管瘤，是指脑动脉内腔的局限性异常扩大造成动脉壁 的一种瘤状突出。颅内动脉瘤多因脑动脉管壁局部的先天性缺陷和腔内压力增高的基础上 引起囊性膨出，是造成蛛网膜下腔出血的首位病因。过去人们称之为先天性脑动脉瘤，事实 上先天性脑动脉瘤占脑动脉瘤的70%~80%。由于病程隐匿，起病突然，一旦发病，死、残 率极高，因而被称为颅内的"不定时炸弹"，是最危险的脑血管病之一。在脑血管意外中，仅 次于脑血栓和高血压脑出血，位居第三。由于该病的年发病率高达1~2/10000,我国每年 新增动脉瘤患者多达20万，颅内动脉瘤是威胁人类生命和健康的最常见的重大疾病。目前关于颅内动脉瘤的形成和破裂的具体机制还不完全清楚，故在动脉瘤破裂之 前尚无有效的筛选方法和令人满意的防治措施。在分子水平探讨颅内动脉瘤的发病机制， 将有助于人们发现动脉瘤的早期诊断的分子标记物，为颅内动脉瘤的防治提供新的分子靶 点。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种可用于颅内动脉瘤早期诊 断的分子标志物。相比传统的颅内动脉瘤的诊断方法，使用基因标志物来诊断颅内动脉瘤 的具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者在疾病早期就能知晓疾病风险，针对风险高 低，采取相应的预防和治疗措施。 为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案： 本专利技术提供了检测DMBXl基因表达的产品在制备诊断颅内动脉瘤的工具中的应 用。 进一步，所述检测DMBXl基因表达的产品包括检测DMBXl基因 mRNA水平的产品、 和/或检测DMBXl蛋白水平的产品。 进一步，所述检测DMBXl基因表达的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检 测、原位杂交或芯片检测DMBXl基因表达以诊断颅内动脉瘤的产品。 进一步，所述用RT-PCR诊断颅内动脉瘤的产品至少包括一对特异扩增DMBXl基因 的引物；所述用实时定量PCR诊断颅内动脉瘤的产品至少包括一对特异扩增DMBXl基因的 引物；所述用免疫检测诊断颅内动脉瘤的产品包括：与DMBXl蛋白特异性结合的抗体；所述 用原位杂交诊断颅内动脉瘤的产品包括：与DMBXl基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯 片诊断颅内动脉瘤的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与DMBXl蛋白特 异性结合的抗体，基因芯片包括与DMBXl基因的核酸序列杂交的探针。 所述用实时定量PCR诊断颅内动脉瘤的产品至少包括的一对特异扩增DMBXl基因 的引物如SEQ ID NO. 3和SEQ ID NO. 4所示。 所述检测DMBXl基因表达的产品可以是检测DMBXl基因表达的试剂、也可以是包 含所述试剂的试剂盒、芯片、试纸等，也可以是使用所述试剂的高通量测序平台。 所述诊断颅内动脉瘤的工具包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平 台；高通量测序平台是一种特殊的诊断颅内动脉瘤的工具，随着高通量测序技术的发展，对 一个人的基因表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的基因 表达谱，容易分析出哪个基因的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知DMBXl基因的 异常与颅内动脉瘤相关也属于DMBXl基因的用途，同样在本专利技术的保护范围之内。 本专利技术还提供了一种诊断颅内动脉瘤的工具，所述工具包括检测DMBXl基因表达 的试剂；所述试剂包括检测DMBXl基因 mRNA的引物和/或探针、和/或检测DMBXl蛋白的 抗体。 所述工具包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。 其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定 在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测DMBXl基因转录水平的针对 DMBXl基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的DMBXl 蛋白的特异性抗体；所述基因芯片可用于检测包括DMBXl基因在内的多个基因（例如，与颅 内动脉瘤相关的多个基因）的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括DMBXl蛋白在内 的多个蛋白质（例如与颅内动脉瘤相关的多个蛋白质）的表达水平。通过将多个与颅内动 脉瘤的标志物同时检测，可大大提高颅内动脉瘤诊断的准确率。 其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试 剂盒包括用于检测DMBXl基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括DMBXl蛋白 的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯 片方法检测DMBXl基因表达水平过程中所需的试剂。优选度，所述试剂包括针对DMBXl基 因的引物和/或探针。根据DMBXl基因的核苷酸序列信息容易设计出可以用于检测DMBXl 基因表达水平的引物和探针。 所述试纸包括检测DMBXl基因表达的试剂。 所述高通量测序平台包括检测DMBXl基因表达的试剂。 与DMBXl基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其 它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结 合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述 探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针 长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最 长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探 针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。 进一步，所述DMBXl蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述DMBXl 蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰（例如，，嵌合抗体、scFv、 Fab、F(ab'）2、Fv等。只要所述片段能够保留与DMBXl蛋白的结合能力即可。用于蛋白质 水平的抗体的制备时本领域技术人员公知的，并且本专利技术可以使用任何方法来制备所述抗 体。 在本专利技术的具体实施方案中，所述检测DMBXl基因 mRNA的引物包括SEQ ID NO. 3 和SEQ ID NO. 4所示的引物对。 本专利技术还提供了 DMBXl基因和/或其表达产物的抑制剂在制备治疗颅内动脉瘤的 药物中的应用。所述抑制剂包括抑制DMBXl基因表达的试剂、和/或抑制DMBXl基因表达 产物的试剂。 进一步，所述抑制DMBXl基因表达的试剂包括抑制基因转录的试剂、抑制基因翻 译的试剂；所述抑制DMBXl基因表达产物的试剂包括抑制DMBXl基因 mRNA的试剂、抑制 DMBXl蛋白的试剂。所述抑制DMBXl基因 mRNA的试剂包括抑制mRNA稳定性的试剂、抑制 mRNA翻译活性的试剂。所述抑制DMBXl蛋白的试剂包括抑制DMBXl蛋白稳定性的试剂、抑 制DMBXl蛋白活性的试剂、抑制DMBXl蛋白功能的试剂。 进一步，抑制DMBXl基因 mRNA的试剂包括针对DMBXl基因 mRNA的双链核糖核酸； 抑制DMBXl蛋白功能的试剂包括DMBXl抗原蛋白的肿瘤疫苗、抑制DMBXl蛋白功能的抗体。 所述抗体可以是本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测DMBX1基因表达的产品在制备诊断颅内动脉瘤的工具中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李志立，黄光富，陈隆益，谭海斌，王振宇，石毅，刘泠，殷成，王奇，
申请(专利权)人：四川省人民医院，
类型：发明
国别省市：四川;51