【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药检测
，具体而言，涉及一种人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量的检测方法。
技术介绍
Tau蛋白是与阿尔兹海默症相关的一种重要蛋白。人静脉注射免疫球蛋白(intravenousimmunoglobulin，IVIG)是临床用于一种治疗免疫缺陷的药物，含多种抗体。同时，有研究者发现静脉注射人免疫球蛋白制品能够治疗阿尔兹海默症，其作用机理可能与免疫球蛋白中含有的Tau蛋白抗体有关。IVIG若用于阿尔兹海默症的治疗，其中的Tau蛋白抗体含量的多少将是与其治疗阿尔兹海默症效果相关的重要指标，因此，有必要对IVIG中Tau蛋白抗体含量进行检测。由于IVIG是以数千人份混合血浆为原料制备的血浆蛋白制品，因此其具有非常丰富的抗体多样性，包含成千上万种蛋白、多肽、核酸甚至小分子物质的IgG抗体，能够与多种成分发生抗原抗体反应，而单一一种抗体的含量也较少。常规的酶联免疫吸附实验中用到的封闭液、稀释液中，常含有各种复杂成分，会与待测样品发生交叉反应而影响检测方法的准确性；同时，因免疫球蛋白中的Tau蛋白抗体含量较低而不易检测，也会对检测方法的准确性产生影响。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量的检测方法，以提高检测方法的准确性。本专利技术所采用的技术方案为:一种人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量的检测方法，...
【技术保护点】
一种人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤:A.抗原包被：在酶标板的每孔中加入Tau蛋白溶液，经孵育操作后用洗涤液洗涤；B.封闭：在所述酶标板的每孔中加入无蛋白封闭液，经孵育操作后用洗涤液洗涤；C.一抗孵育：在所述酶标板的每孔中加入待测样品，经孵育操作后用洗涤液洗涤；所述待测样品为用稀释液稀释的人免疫球蛋白制品，所述稀释液为采用去免疫球蛋白G的牛血清白蛋白和磷酸钠‑吐温缓冲液配制的混合液，所述稀释液中的去免疫球蛋白G的牛血清白蛋白的质量含量为0.5％‑1.5％；D.二抗孵育：在所述酶标板的每孔中加入生物素偶联的抗一抗的抗体，经孵育操作后用洗涤液洗涤；E.酶标三抗孵育：在所述酶标板的每孔中加入标记酶偶联的链抗生物素蛋白，经孵育操作后用含有NaCl和Tween‑20的Tris‑HCl缓冲液洗涤；F.吸光度检测及含量计算：在所述酶标板的每孔中加入显色底物进行显色反应，经孵育操作后再加入终止液终止反应，然后将所述酶标板放入检测装置中进行吸光度检测，得待测样品的吸光度值OD待测样品，并采用标准曲线法计算出待测样品中的Tau蛋白抗体的含量。
【技术特征摘要】
1.一种人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量的检测方法，其特
征在于，包括以下步骤:
A.抗原包被：在酶标板的每孔中加入Tau蛋白溶液，经孵育操
作后用洗涤液洗涤；
B.封闭：在所述酶标板的每孔中加入无蛋白封闭液，经孵育操
作后用洗涤液洗涤；
C.一抗孵育：在所述酶标板的每孔中加入待测样品，经孵育操
作后用洗涤液洗涤；所述待测样品为用稀释液稀释的人免疫球蛋白
制品，所述稀释液为采用去免疫球蛋白G的牛血清白蛋白和磷酸钠-
吐温缓冲液配制的混合液，所述稀释液中的去免疫球蛋白G的牛血
清白蛋白的质量含量为0.5％-1.5％；
D.二抗孵育：在所述酶标板的每孔中加入生物素偶联的抗一抗
的抗体，经孵育操作后用洗涤液洗涤；
E.酶标三抗孵育：在所述酶标板的每孔中加入标记酶偶联的链
抗生物素蛋白，经孵育操作后用含有NaCl和Tween-20的Tris-HCl
缓冲液洗涤；
F.吸光度检测及含量计算：在所述酶标板的每孔中加入显色底
物进行显色反应，经孵育操作后再加入终止液终止反应，然后将所
述酶标板放入检测装置中进行吸光度检测，得待测样品的吸光度值
OD待测样品，并采用标准曲线法计算出待测样品中的Tau蛋白抗体的含
量。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述生物素偶
联的抗一抗的抗体为生物素偶联的免疫球蛋白G的Fc片段的抗体，
\t所述生物素偶联的免疫球蛋白G的Fc片段的抗体为来源于其他物
种的针对于人免疫球蛋白G的Fc片段的抗体与生物素偶联后形成
的抗体。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述生物素偶
联的免疫球蛋白G的Fc片段的抗体为生物素偶联的羊抗人免疫球
蛋白G的Fc片段的抗体、生物素偶联的兔抗人免疫球蛋白G的Fc
片段抗体或者生物素偶联的鼠抗人免疫球蛋白G的Fc片段抗体。
4.根据权利要求1-3任一项所述的检测方法，其特征在于，所述
Tau蛋白溶液的浓度为5...
【专利技术属性】
技术研发人员：叶生亮，曹海军，李长清，马莉，杜晞，王宗奎，
申请(专利权)人：中国医学科学院输血研究所，
类型：发明
国别省市：四川;51
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