一种检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法技术

本发明专利技术提供一种检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法，本发明专利技术的检测方法操作简便快速，灵敏度高，水产品基质下其检出限可达2ppb以下，其回收率及重复性能满足日常检测的要求，采用基质分散法净化样品，有效地减少了基体成分的干扰，而且，本方法具有高通量、高灵敏度、高分辨率，高质量精确度及可行的线性范围，利用气相色谱质谱定性定量的功能，对水产品中含硫类致嗅物质进行检测，大大地减少了假阳性等误判事件，极大地提高了检测机构对水产品风险的监测能力，经检测后的水产品更为卫生安全。

【技术实现步骤摘要】
一种检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法
本专利技术属于水产品检测
，具体涉及一种检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法。
技术介绍
含硫类致嗅物质多为挥发性含硫化合物(volatilesulfurcompounds，VSC)，主要包括硫化氢(hydrogendisulfide,H2S)、甲硫醇(methanethiol，MT)、羰基硫(carbonylsulfide，COS)、甲硫醚(dimethylsulfide，DMS)、二硫化碳(carbondisulfide，CS2)、二甲二硫(dimethyldisulfide,DMDS)、二甲三硫(dimethylTrisulfide，DMTS)和二甲四硫(dimethyltetrasulfide，DMTeS)，其嗅阈值(odorthresholdconcentration，OTC)一般都很低，即使以很低的浓度存在于环境及水生动物体内也会产生嗅味问题。当含硫类致嗅物质通过食物链被水产动物摄食而进入体内，并蓄积达到一定限量后，会导致水产品产生明显的异味，引起消费者明显的不适应。另外，大部分含硫类致嗅物质有较强的毒性，即使很低的浓度，也能造成对人呼吸系统的损害，在高浓度条件下暴露危害最大,可以导致昏迷。此外，硫化氢可与人体内细胞色素、氧化酶及该类物质的二硫键作用，影响细胞氧化过程,造成细胞组织缺氧,危及人类的生命。因此，提供一种有效检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法就非常重要。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对上述现有技术现状而提供一种操作简便快速、能有效地减少了基体成分的干扰、高灵敏度、高分辨率，利用气相色谱-质谱定性定量的功能，对水产品中挥发性含硫类致嗅物质进行检测。本专利技术检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法，其步骤如下：1)对标准品的配置：准确称量6种含硫类致嗅物质的标准品用正己烷溶解来配置标准品溶液，优选标准品溶液的浓度为10ng/ml-1000ng/ml；2)待检测样品前处理：取待检测的水产品样品粉碎后，加入正己烷进行超声提取30min，提取结束后低温条件下离心分出有机相；作为优选，超声提取时保持温度在30℃以下；3)测定：标准品通过顶空进入质谱，进行一级准确质量数的采集，扫描采集参数；其中顶空条件为平衡温度110℃，平衡时间15min；进样针温度120℃，传输线温度130℃；顶空瓶压力172kPa，加压时间3min，进样时间0.05min，干吹2min，分流进样，分流比5:1；色谱条件如下：色谱柱为60m×0.4mm×0.32μm的DB-1柱；升温程序：起始温度40℃，保持3min，以10℃/min升温至110℃，再以15℃/min升温至200℃，再以40℃/min升温至240℃；进样口温度：250℃；载气为氦气He(纯度>99.999％)；隔垫吹扫流量：3ml/min；进样模式：不分流进样；进样量1.0μl；质谱条件：离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；接口温度：240℃；电离方式为电子轰击(EI)离子源；电子能量为70eV；电子倍增器电压为1671V；SIM采集模式，扫描质量范围：40～350m/z；阈值：150；采样频率：2；溶剂延迟：4min。4)选取不同种类的水产品粉碎后，加入正己烷进行超声提取30min，提取结束后低温条件下离心分出有机相；然后对有机相按照步骤3)进行测定，确定是否含有含硫类致嗅物质。所述的6种含硫类致嗅物质，是硫化氢(hydrogendisulfide,H2S)、甲硫醇(methanethiol，MT)、甲硫醚(dimethylsulfide，DMS)、二硫化碳(carbondisulfide，CS2)、二甲二硫(dimethyldisulfide,DMDS)、二甲三硫(dimethylTrisulfide，DMTS)。通过上述优化建立水产品中含硫类致嗅物质快速、高效、灵敏的检测方法。现有技术相比，本专利技术的优点在于：本专利技术的检测方法操作简便快速，灵敏度高，水产品基质下其检出限可达2ppb以下，其回收率及重复性能满足日常检测的要求，采用基质分散法净化样品，有效地减少了基体成分的干扰，而且，本方法具有高通量、高灵敏度、高分辨率，高质量精确度及可行的线性范围，利用气相色谱质谱定性定量的功能，对水产品中含硫类致嗅物质进行检测，大大地减少了假阳性等误判事件，极大地提高了检测机构对水产品风险的监测能力，经检测后的水产品更为卫生安全。附图说明图1：6种含硫类致嗅物质标准品的气相色谱-质谱总离子流图(浓度为200ng/ml)；图2：H2S选择性离子色谱图A和扫描质谱图B(9.671min)；图3：MT选择性离子色谱图A和扫描质谱图B(10.775min)；图4：DMS选择性离子色谱图A和扫描质谱图B(12.405min)；图5：CS2选择性离子色谱图A和扫描质谱图B(14.137min)；图6：DMDS选择性离子色谱图A和扫描质谱图B(14.389min)；图7：DMTS选择性离子色谱图A和扫描质谱图B(14.658min)。图8：6种含硫类致嗅物质标准品水产品机制下的气相色谱-质谱总离子流图(浓度为2ng/ml)具体实施方式申请人在长期的研究中对各个步骤和理化参数进行了优化，从而使本专利技术的方法可以在一次反应中精确的检测6种含硫类致嗅物质(硫化氢、甲硫醇、甲硫醚、二硫化碳、二甲二硫、二甲三硫)，从而促成了本专利技术。下面首先对本专利技术方法的所使用的仪器、试剂和方法进行如下的解释：1.主要仪器气相色谱-质谱联用仪(GC/MS)，AgilentGC7890A/MS5975C，美国Agilent公司，配备顶空进样器、增强型化学工作站；高速组织捣碎机，DS-1，上海标本模型厂；高速冷冻离心机，SERJSE09L31，USA；数控超声波清洗器，KQ5200DE，昆山市超声波仪器有限公司；数显型漩涡混合器，美国Talboys。2.试剂正己烷：色谱纯；标准品：含硫类致嗅物质(纯度98.0％)；硫化氢(hydrogendisulfide,H2S)、甲硫醇(methanethiol，MT)、甲硫醚(dimethylsulfide，DMS)、二硫化碳(carbondisulfide，CS2)、二甲二硫(dimethyldisulfide,DMDS)、二甲三硫(dimethylTrisulfide，DMTS)由上海安谱公司提供。3.顶空条件平衡温度110℃，平衡时间15min；进样针温度120℃，传输线温度130℃；顶空瓶压力172kPa，加压时间3min，进样时间0.05min，干吹2min，分流进样，分流比5:1。4.色谱条件色谱柱：DB-1，60m×0.4mm×0.32μm；升温程序：起始温度40℃，保持3min，以10℃/min升温至110℃，再以15℃/min升温至200℃，再以40℃/min升温至240℃；进样口温度：250℃；载气：He(纯度>99.999％)；隔垫吹扫流量：3ml/min；进样模式：不分流进样；进样量1.0μl。5.质谱条件离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；接口温度：240℃；电离方式：电子轰击(EI)离子源；电子能量：70eV；电子倍增器电压：1671V；SIM采集模式，扫本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1)对标准品的配置：准确称量6种含硫类致嗅物质的标准品用正己烷溶解来配置标准品溶液，2)待检测样品前处理：取待检测的水产品样品粉碎后，加入正己烷进行超声提取30min，提取结束后低温条件下离心分出有机相；3)测定：标准品通过顶空进入质谱，进行一级准确质量数的采集，扫描采集参数；其中顶空条件为平衡温度110℃，平衡时间15min；进样针温度120℃，传输线温度130℃；顶空瓶压力172kPa，加压时间3min，进样时间0.05min，干吹2min，分流进样，分流比5:1；色谱条件如下：色谱柱为60m×0.4mm×0.32μm的DB‑1柱；升温程序：起始温度40℃，保持3min，以10℃/min升温至110℃，再以15℃/min升温至200℃，再以40℃/min升温至240℃；进样口温度：250℃；载气为氦气；隔垫吹扫流量：3ml/min；进样模式：不分流进样；进样量1.0μl；质谱条件如下：离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；接口温度：240℃；电离方式为电子轰击离子源；电子能量为70eV；电子倍增器电压为1671V；SIM采集模式，扫描质量范围：40～350m/z；阈值：150；采样频率：2；溶剂延迟：4min；4)选取不同种类的水产品粉碎后，加入正己烷进行超声提取30min，提取结束后低温条件下离心分出有机相；然后对有机相按照步骤3)进行测定，确定是否含有含硫类致嗅物质。...

【技术特征摘要】
1.一种检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法，所述的6种含硫类致嗅物质为硫化氢、甲硫醇、甲硫醚、二硫化碳、二甲二硫、二甲三硫；其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1)对标准品的配置：准确称量6种含硫类致嗅物质的标准品用正己烷溶解来配置标准品溶液，2)测定：标准品通过顶空进入质谱，用气相色谱质谱联用技术对标准品进行检测，进行一级准确质量数的采集，扫描采集参数；其中顶空条件为平衡温度110℃，平衡时间15min；进样针温度120℃，传输线温度130℃；顶空瓶压力172kPa，加压时间3min，进样时间0.05min，干吹2min，分流进样，分流比5:1；色谱条件如下：色谱柱为60m×0.4mm×0.32μm的DB-1柱；升温程序：起始温度40℃，保持3min，以10℃/min升温至110℃，再以15℃/min升温至200℃，再以4...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛超波，蒋玲波，王萍亚，夏瑛瑛，
申请(专利权)人：舟山市食品药品检验检测研究院，
类型：发明
国别省市：浙江;33