本发明专利技术提供一种贝利司他顺式异构体的制备方法,该方法以3-苯基氨基磺酰基苯甲醛为起始原料,经Wittig缩合反应,水解,氯化反应,羟胺缩合反应得到Belinostat和Belinostat异构体混合物,混合物中Belinostat顺式异构体的含量较现有技术有显著的提高。对反应得到Belinostat和Belinostat异构体混合物采用反相高效制备液相色谱法进行分离纯化,梯度洗脱得到纯度99%以上的符合Belinostat有关物质检查中杂质对照品要求的Belinostat异构体。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及药物化学领域,具体设及的是抗肿瘤药物belinostat顺式异构体的 制备方法。
技术介绍
[000引 贝利司他度elinostat,PXD101)是由丹麦TopotargetAS公司开发的一种组蛋白 脱乙酷基酶抑制剂(HDACi)。组蛋白去乙酷化酶(HDAC)的过度表达或异常调控会使组蛋白 过度去乙酷化,使染色质被重塑为抑制转录的构型,引起相应基因表达下降,导致癌变的产 生,因此对HDAC的抑制作用被认为是具有发展前景的抗癌药物祀标。Belinostat可W直 接作用于基因异常表达运一环节,从而抑制和纠正肿瘤细胞过度增殖、异常分化,针对常见 的耐药问题,还可W与其他作用机制的药物联合用药。Be1inostat能有效抑制结肠癌、肺 癌、卵巢癌、骨髓瘤等实体瘤细胞的增殖,对白血病和淋己癌等血液系统的恶性肿瘤也有治 疗作用。 美国FDA于2009年9月指定Belinostat为孤儿药,列入快速审批通道,用于治 疗复发或难治性外周T细胞淋己瘤(R/RPT化),欧盟于2012年10月也指定本品为孤儿药 用于PTCL。目前,TopotargetAS及SpectrumPharmaceuticals公司已完成belinostat 治疗ΡΤ化的II期临床试验,结果超过设计预期值。2013年12月,原研公司向FDA提交 Belinostat的R/RPTCL新药申请。2014年7月3日,FDA批准Belinostat用于治疗有外 周T细胞淋己癌(PTCL)的患者,主要依据是研究表明,在接受了该药物治疗的患者中总缓 解率达到了近26%。 Belinostat化学名为巧)-N-径基-3-(3-苯基氨基横酷基苯基)丙締酷胺,其结 构式如下:Belinostat存在一个不对称的双键结构,合成中可能会产生其顺式异构体,结构 式如下:Belinostat结构式为E型,其顺式异构体为Z型。为了严格控制药品质量,保证其 临床用药的安全有效,在建立Belinostat有关物质的检查方法的同时,需要高纯度的异构 体II作为杂质对照。现有已报道的Belinostat的合成方法产生的异构体II极少,且该异构 体与Belinostat采用传统纯化方法如重结晶和硅胶柱层析难W将其分开,因此制备得到 纯度高符合杂质对照品要求的异构体II具有一定的难度。
技术实现思路
本专利技术提供了一种贝利司他顺式异构体的制备方法,该方法W3-苯基氨基横酷 基苯甲醒为起始原料,经Wittig缩合反应,水解,氯化反应,径胺缩合反应得到Belinostat 和Belinostat异构体混合物,经反相高效制备液相色谱法分离纯化,得到纯度99%W上的 Belinostat异构体II,能够作为杂质对照品用于Belinostat有关物质的检查。 本专利技术提供的一种贝利司他顺式异构体的制备方法,其特征在于,按W下路线合 成: 具体包含W下步骤: 1)化合物IV与Wittig试剂、碱试剂在极性质子溶剂中进行Wittig缩合反应,所述 Wittig试剂可选自乙氧甲酯基甲基Ξ苯基氯化麟、乙氧甲酯基甲基Ξ苯基漠化麟或乙氧甲 酷基甲基Ξ苯基舰化麟,所述极性质子溶剂可选自甲醇、乙醇或异丙醇,所述碱试剂可选自 甲醇钢、乙醇钢、叔下醇钟,反应完毕后在反应液中加碱水解后得到化合物V,水解所用碱 可选自氨氧化裡,氨氧化钢,氨氧化钟; 2)化合物V先进行氯化反应得到氯化产物化合物VI,所得反应液与盐酸径胺在碱 试剂存在下反应得到belinostat和belinostat异构体混合物III,所述氯化试剂可选自草 酷氯、氯化亚讽或横酷氯,碱试剂可选自碳酸氨钢、碳酸钢或碳酸钟; 3)将belinostat和belinostat异构体混合物III采用反相高效制备液相色谱法分 离纯化得到化合物IIbelinostat异构体。 其中,步骤DWittig试剂优选乙氧甲酯基甲基Ξ苯基漠化麟;缩合反应所述极性 质子溶剂优选甲醇;碱试剂优选乙醇钢;Wittig试剂与化合物IV的摩尔比为1~3 :1,优选 1. 5:1 ;水解所用的碱优选氨氧化钢;氨氧化钢与化合物IV的摩尔比为2~5:1,优选3:1。 步骤2)所述氯化试剂采用草酷氯时,草酷氯与化合物V的摩尔比2~5 :1,优选 3 :1;碱试剂优选碳酸钢,碳酸钢与化合物VI的摩尔比为2~5:1,优选4:1;盐酸径胺与化 合物VI的摩尔比为5~20:1,优选10:1。 步骤3)所述反相高效制备液相色谱法纯化的具体的操作方法包括W下步骤: (a)溶解、过滤:将Belinostat和Belinostat异构体混合物III用0. 05~2%憐 酸溶液/乙腊(85/15体积比)混合液溶解,其中Belinostat和Belinostat异构体混合物 III:0. 05~2%憐酸溶液/乙腊(85/15)混合液的比例为Ig:200ml~500ml,溶解后用孔 径0. 45μm的有机微孔滤膜过滤,滤去不溶物。 化)分离、洗脱:将步骤(a)中所得的溶液,注入反相高效制备液相色谱仪,梯度洗 脱,收集Belinostat异构体的制备组分,得Belinostat异构体溶液; (C)产品回收:将步骤化)所得到的Belinostat异构体溶液中的乙腊经蒸馈除去 后,用二氯甲烧提取,蒸馈除去二氯甲烧,得Belinostat异构体。 专利技术人在进行反相高效制备液相分离前,用液质联用确定高效液相色谱中 Belinostat异构体的出峰时间,摸索合适的色谱条件W进一步应用于制备液相用于分离 Belinostat、Belinostat异构体及其它杂质。采用YMC-TriartC18色谱柱,柱溫30°C,紫外 检测器220皿,流速Iml/min下,通过变换流动相和洗脱梯度摸索能够将上述各物质分离的 色谱条件,得出下表洗脱程序能将Belinostat、Belinostat异构体及其它杂质全部分开, 出峰顺序为杂质f,Belinostat异构体(杂质b),Belinostat,杂质h,杂质d,杂质C,杂质 邑,杂质曰,分离度最低为1. 9 (见附图1)。 ~~W上述色谱条件基础在制备液相上进行条件摸索,由于制备液相的色谱柱与高效 液相的色谱柱不同,本专利技术制备液相色谱柱采用了动态轴向压缩柱,流速要大很多,同时考 虑避免使用缓冲液,尝试将缓冲液换成憐酸溶液,为得到纯度和收率均较高的Belinostat 异构体,需对制备液相色谱洗脱程序进行进一步优化。经试验摸索得出,步骤3)所述反相高效制备液相色谱法,色谱条件为:色谱柱采 用动态轴向压缩柱,直径50mm,填料长度250mm,填料为十八烷基硅烷键合硅胶微球,粒径 为10μm,孔径120,V洗脱液采用乙腊和憐酸溶液组成的混合溶液;柱溫为室溫;紫外检测 器在线检测,检测波长为221nm;流速为60-100ml/min,优选80ml/min;通过变换洗脱液中 乙腊和憐酸盐溶液的比例进行梯度洗脱,所述憐酸溶液浓度为0. 05~2 %,优选0. 1 %,优 选按照如下梯度进行洗脱: 制备液相分离时Belinostat与Belinostat异构体的分离情况见附图2。 本专利技术提供的贝利司他顺式异构体的制备方法,W3-苯基氨基横酷基苯甲醒 为起始原料,经Wit本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种贝利司他顺式异构体的制备方法,其特征在于,按以下路线合成:具体包含以下步骤:1)化合物Ⅳ与Wittig试剂、碱试剂在极性质子溶剂中进行Wittig缩合反应,所述Wittig试剂可选自乙氧甲酰基甲基三苯基氯化膦、乙氧甲酰基甲基三苯基溴化膦或乙氧甲酰基甲基三苯基碘化膦,所述极性质子溶剂可选自甲醇、乙醇或异丙醇,所述碱试剂可选自甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾,反应完毕后在反应液中加碱水解后得到化合物Ⅴ,水解所用碱可选自氢氧化锂,氢氧化钠,氢氧化钾;2)化合物Ⅴ先进行氯化反应得到氯化产物化合物Ⅵ,所得反应液与盐酸羟胺在碱试剂存在下反应得到belinostat和belinostat异构体混合物Ⅲ,所述氯化试剂可选自草酰氯、氯化亚砜或磺酰氯,碱试剂可选自碳酸氢钠、碳酸钠或碳酸钾;3)将belinostat和belinostat异构体混合物Ⅲ采用反相高效制备液相色谱法分离纯化得到化合物Ⅱ的belinostat异构体。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:王庆秋,罗锦,曹艳,张莉,李昌希,袁庆,
申请(专利权)人:深圳万乐药业有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
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