本发明专利技术提供一种克拉霉素的杂质检测方法，具体是包括原料药供试品溶液的配置；评价溶液的配置；自身对照品溶液的配置；系统灵敏度评价溶液的配置；系统适用性溶液的配置；空白溶剂的配置；依次进样后要求图谱中杂质D峰高/主成分峰与杂质D相邻峰谷的比值不得低于3.0；并参照系统适用性图谱找出供试品图谱中的杂质位置及峰面积，按自身对照法计算各杂质的含量即可完成检测。该方法减轻了系统及色谱柱的负荷。杂质测定水平提高，并通过系统调整达到了理想的测定效果。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术提供一种克拉霉素原料药中杂质的检测方法，属于分析方法一类。
技术介绍
克拉霉素是红霉素的衍生物，20世纪90年代初由日本大正公司开发成功，并以商 品名Clarith注册。尔后，大正公司首先将其技术转让给美国雅培公司生产；1990年在爱 尔兰、意大利上市，1991年10月获FDA批准定为IB类新药上市，商品名Biaxin，1993年以 Klacid在中国香港上市，在欧洲和亚洲的商品名为克拉仙，已在全球50多个国家上市，市 场用量稳步增长，并在临床中发挥了重要作用。克拉霉素及其片剂、目前生产的剂型还有颗 粒剂、分散片、缓释片、注射剂和干混悬剂。 临床主要用于敏感细菌所致的上、克拉霉素下呼吸道，包括扁桃体炎、咽喉炎、glj 窦炎、支气管炎、肺炎等、皮肤、软组织感染、脓疖、丹毒、毛囊炎、伤口感染等，疗效与其他大 环内酯类相仿。该品也可用于沙眼衣原体或溶脲脲原体所致生殖泌尿系感染、艾滋病患者 的非典型分支杆菌感染等。成人用量：口服，常用量一次〇.25g(l片），每12小时1次。不 良反应主要有口腔异味，腹痛、腹泻、恶心、呕吐等胃肠道反应，头痛，血清氨基转移酶短 暂升高。可能发生过敏反应，轻者为药疹、荨麻疹，重者为过敏及Stevens-Johnson症。 上述信息足以可见克拉霉素在临床中治疗的适用范围广、市场空间大、临床疗效 高且临床用药剂量大，同时不良反应也颇多。本公司现生产有克拉霉素原料药（批准文号 国药准字H20057986)制剂有克拉霉素片（国药准字H20046345)，克拉霉素分素片（国药准 字H20066047)，规格250mg。现产品的质量控制标准采用的是中国药典标准。 根据国家食品药品监督管理总局办公厅关于2013年度仿制药质量一致性评价方 法研究任务的通知（食药监办药化管 38号），通过仿制药质量一致性评价，要淘汰内 在质量达不到要求的品种，促进我国仿制药整体水平提升，达到或接近国际先进水平的目 标。本公司积极响应，对本公司生产的克拉霉素原料药、片于分散片的仿制药均进行了质量 统计分析，并购买原研制剂进行了溶出曲线相似研究，有关物质控制水平收集了国内外标 准进行对比分析。发现公司产品质量均高于中国药典的标准规定，还有很多批次产品的质 量能达到国际标准，本公司即以国际最高标准为目标制定了该产品的再研究方案。 现有技术缺陷 现有有关物质测定法在日常运行中，未出现不适应，但与国际标准对比杂质控制 标准太低，与仿制药质量一致性评价的目标相距太远，想打入国际市场只能是一种愿望而 已。与国际标准对比见表1表1 上述列表中的代号分别表示：USP(API)代表美国药典标准中收载的克拉霉素原 料药的杂质控制标准；EP(API)代表欧洲药典标准中收载的克拉霉素原料药的杂质控制标 准；JP(API)代表日本药典标准中收载的克拉霉素原料药的杂质控制标准；BP(片）代表英 国药典标准中收载的克拉霉素片的杂质控制标准；Ch.P. (API.片）代表中国药典标准中收 载的克拉霉素原料药和片剂的杂质控制标准 终上述比较，本公司决议以USP(API)的标准为目标，对本公司的产品进行标准提 升，提高产品质量，并购买国际标准杂质定位的系统适用性对照品，标准品报告的标准图谱 (见图1)，取国际标准杂质定位的系统适用性对照品在《中国药典》收载标准中的有关物质 测定法的系统下进行了测试，结果显示现中国药典收载的测定系统根本无法区分国外标准 的杂质定位要求，见图2。 图谱1、2明显显示，国际标准杂质定位的系统适用性对照品在中国药典标准收载 的系统下运行所得的图谱差别极大，各杂质无法归属且杂质间也无法分离，说明用该测定 法的色谱条件来检测与国际标准相当的克拉霉素产品不合适。
技术实现思路
本专利技术根据上述问题提供了一种克拉霉素的液相检测方法，具体步骤如下： 步骤一：溶液配制称取含克拉霉素原料药150mg(含克拉霉素原料药细粉相当于克拉霉素150mg)， 置100ml量瓶中，加入溶剂（乙腈与水的体积比为1:1) 80ml，振摇并超声5分钟使溶解，放 冷，用溶剂稀释至刻度，摇匀，片剂离心，取上清液作为供试品溶液。（命名溶液1) 量取供试品溶液5ml于100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，作为溶液系统拖尾因子 的评价溶液。（命名溶液2) 量取系统拖尾因子的评价溶液10ml于100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，作为自 身对照溶液。（命名溶液3) 量取自身对照溶液2ml于100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，作为系统灵敏度评价 溶液。（命名溶液4) 称取国际标准杂质系统适应性对照品配制成1ml中含克拉霉素1.5mg的溶作为系 统适用性溶液。（命名溶液5) 步骤二：高效液相测定法的色谱条件 高效液相色谱仪Agilentl200/1260 ;检测器VWD;色谱柱 UItimate-XB_Cls (4. 6X150mm、3um)流动相A为0. 035mol/L磷酸二氢钾缓冲液（氢氧化钾 溶液调节pH值至5. 1 ±0. 1)，流动相B为乙腈；乙腈与水的体积比为1:1为溶剂；进样量为 20ul;流速为每分钟1.lml;检测波长为205nm;柱温40°C。 步骤三：测定操作 取空白溶剂进样一针检测记录色谱图，要求对杂质的测定无干扰。 取灵敏度溶液进样一针检测记录色谱图，要求信噪比不低于10:1。 取系统拖尾因子的评价溶液进样一针检测记录色谱图，要求克拉霉素峰的拖尾因 子不得过1.7。 取自身对照溶液进样一针检测记录色谱图，取克拉霉素峰的峰面积用于杂质计算 的自身对照。 取系统适用性溶液进样一针检测记录色谱图，要求图谱中杂质D/主成分峰峰高 峰谷比值Hp/Hv不得低于3. 0(或是分离度不低于1. 0)。 取供试品溶液进样一针检测记录色谱图，并参照系统适用性图谱找出供试品图谱 中的杂质位置（保留时间）及峰面积，按自身对照法计算各杂质的含量即可完成检测。 步骤四：杂质计算 供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，出去杂质I之前的溶剂与辅料峰外，任一杂 质峰面积不得过溶液（3)主峰面积的2倍（1. 0% )(杂质G、Η的校正因子分别为0. 27、 〇. 15);大于溶液（3)主峰面积的0. 8倍（0. 4% )的杂质不得过4个；杂质总和不得过溶 液（3)主峰面积的7倍（3. 5% )。（杂质峰面积低于灵敏度溶液中兰索拉唑峰面积的忽略 不计）。 步骤五：相关制剂的杂质控制 本公司生产的制剂品种：含克拉霉素原料药的包括克拉霉素片；克拉霉素分散 片，根据处方的再研究及稳定性考察，杂质控制限度与原料药一致。 所述含克拉霉素原料药包括克拉霉素片、克拉霉素分散片。 本专利技术中所述系统适用性对照品属国际标准杂质系统适用性对照品，对照品中含 12中组分，按在图谱中保留顺序为：杂质13、1^、(：、0、主成分4、？、？、6、!1(见国际标准 杂质系统适用性对照品图3);且各杂质在该系统下的保留时间见列表2 ;各杂质的名称见 列表3。[003当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种克拉霉素的杂质检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)称取含克拉霉素原料药150mg，置于100ml量瓶中，加入乙腈与水的体积比为1:1溶剂80ml，振摇并超声5分钟使溶解，放冷，溶剂稀释至刻度，配置克拉霉素的浓度为1.5mg/ml的溶液，取上清液作为供试品溶液，命名溶液1；(2)量取供试品溶液5ml于100ml量瓶中，加乙腈与水的体积比为1:1溶剂，配置克拉霉素的浓度为75μg/ml的溶液，作为溶液系统拖尾因子的评价溶液，命名溶液2；(3)量取系统拖尾因子的评价溶液10ml于100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，配置克拉霉素的浓度为7.5μg/ml作为自身对照溶液，命名溶液3；(4)量取自身对照溶液5ml于25ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，配置克拉霉素的浓度为1.5μg/ml作为系统灵敏度评价溶液，命名溶液4；(5)称取国际标准杂质系统适应性对照品配制成克拉霉素的浓度为1.5mg/ml的溶作为系统适用性溶液，命名溶液5；(6)乙腈与水的体积比为1:1为空白溶剂，命名溶液6；(7)对上述配置的溶液进行高效液相色谱检测，取溶液6进样一针检测记录色谱图，要求对杂质的测定无干扰；取溶液4进样一针检测记录色谱图，要求信噪比不低于10:1；取溶液2进样一针检测记录色谱图，要求克拉霉素峰的拖尾因子不过1.7；取溶液3进样一针检测记录色谱图，取克拉霉素峰得峰面积用于杂质计算的自身对照；取溶液5液进样一针检测记录色谱图，要求图谱中杂质D峰高(Hp)/主成分峰与杂质D相邻峰谷(Hv)的比值不得低于3.0，或是分离度不低于1.0；取溶液1进样一针检测记录色谱图，并参照系统适用性图谱找出供试品图谱中的杂质位置及峰面积，按自身对照法计算各杂质的含量即可完成检测。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李芳，
申请(专利权)人：宜昌东阳光长江药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。