免疫原性WT-1肽和其使用方法技术

本发明专利技术提供肽、免疫原性组合物和疫苗，以及治疗表达WT1的癌症、降低表达WT1的癌症的发病率和诱导表达WT1的癌症的免疫反应的方法，其包括由WT-1蛋白衍生的变态肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】免疫原性WT-1肽和其使用方法政府支持本申请得到来自美国国立卫生研究院的资助P0123766的支持。政府享有本专利技术的权利。
本专利技术提供肽、包含所述肽的组合物和疫苗，和治疗表达WT1的癌症、降低表达WT1的癌症的发病率和诱导表达WT1的癌症的免疫反应的方法，所述方法包括施用所述肽、包含所述肽的组合物和疫苗。
技术介绍
维尔姆斯瘤(Wilmstumor，WT)是在新生儿中以万分之一的频率出现的儿科肾母细胞瘤，数年来其一直是深入的临床和基础研究的主题。所述肿瘤具胚胎源性，其通常在年龄不到5岁的儿童中检测到并且可以单侧或双侧发生。当发育中的肾脏的浓缩后肾间质细胞不能适当分化时，出现WT。在WT的病因学中涉及维尔姆斯瘤1(WT1)肿瘤抑制基因，这说明了遗传改变可能对发育和肿瘤发生具有影响。维尔姆斯瘤蛋白I(WT1)是在正常个体发育期间例如在胎儿肾脏、睾丸和卵巢中表达的锌指转录因子。在成人中，WTI表达在造血干细胞、肌上皮祖细胞、肾足细胞以及睾丸和卵巢中的一些细胞上局限于低水平。近来证明WTI在若干类型的白血病中过度表达，这表明WTI对于各种癌症的免疫疗法将是有吸引力的靶标。维尔姆斯瘤致癌基因蛋白(WT1)对于白血病和多种癌症的免疫疗法是有吸引力的靶标。已鉴定了由WT1蛋白衍生的肽，其诱导能够杀死肿瘤细胞的HLA-A0201限制的细胞毒性CD8T细胞。两种结合于HLA-A0201(RMFPNAPYL；SEQIDNO:56)或HLA-A2402(CMTWNQMNL；SEQIDNO:57)的肽在世界范围内已得到广泛研究并且已经在白血病和其他实体肿瘤患者中进行临床试验(Oka等,科学世界杂志(ScientificWorldJournal)2007；7:649-665；Mundlos等,发育(Development)1993；119:1329-41；Keilholz等,白血病(Leukemia)2005；19:1318-1323)。这些结果是鼓舞人心的并且已对于针对白血病和多种人类癌症而治疗性靶向WT1源T细胞表位提供了强有力的证据和合理性。上述两种WT1衍生肽的治疗性应用局限于HLA-A0201型(在约40％的白种人中存在的HLA单倍型)和HLA-A2402型(在约40％的日本人和其他亚洲群体中存在的单倍型)人群。因此，对于可能用于世界上大部分群体的WT1衍生肽存在未满足的需求。为了扩展在更广泛群体范围中的治疗性应用，需要结合多种HLA单倍型的源自WT1蛋白的新型肽。这些肽因此将能够刺激来自较大百分比的目标群体的T细胞，从而允许将处理大部分群体的疫苗策略，其具有持久性细胞毒性记忆细胞。
技术实现思路
本专利技术提供肽、组合物和免疫原性组合物如包含免疫原性肽的疫苗，以及治疗表达WT1的癌症、降低表达WT1的癌症的发病率和诱导表达WT1的癌症的免疫反应的方法，所述方法包括施用免疫原性肽，或刺激人类患者外部的T细胞，其然后可以输注至所述患者中进行治疗。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分离肽，其具有由以下序列中的任一个组成的氨基酸(AA)序列：SEQIDNO:6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、30、31、32、33、35、36、37、38、39、41、42、43、44、46、47、48、49、50和55。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分离的HLAI类结合肽，其具有由以下序列中的任一个组成的氨基酸(AA)序列：SEQIDNO:6、7、30、31、32、33、34、35、36、37、38、41、42、47和48。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分离的HLAII类结合WT1肽，其具有由以下序列中的任一个组成的氨基酸(AA)序列：SEQIDNO:8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、39、43、44、46、49、50和55。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分离肽，其具有由序列SEQIDNO:6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、30、31、32、33、35、36、37、38、39、41、42、43、44、46、47、48、49、50和55中的任一个组成的氨基酸(AA)序列，或前述中的任一个的片段。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分离的HLAI类结合肽，其具有由序列SEQIDNO:6、7、30、31、32、33、34、35、36、37、38、41、42、47和48中的任一个组成的氨基酸(AA)序列，或前述中的任一个的片段。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分离的HLAII类结合WT1肽，其具有由序列SEQIDNO:8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、39、43、44、46、49、50和55中的任一个组成的氨基酸(AA)序列，或前述中的任一个的片段。在另一个实施方案中，本专利技术提供一种组合物，其包含(a)抗原呈递细胞和(b)选自SEQIDNO:6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、30、31、32、33、35、36、37、38、39、41、42、43、44、46、47、48、49、50和55的肽。在另一个实施方案中，本专利技术提供一种组合物，其包含(a)抗原呈递细胞和(b)选自SEQIDNO:6、7、30、31、32、33、34、35、36、37、38、41、42、47和48的HLAI类结合肽。在另一个实施方案中，本专利技术提供一种组合物，其包含(a)抗原呈递细胞和(b)选自SEQIDNO:8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、39、43、44、46、49、50和55的HLAII类结合肽。在另一个实施方案中，本专利技术提供一种疫苗，其包含SEQIDNO:6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、30、31、32、33、35、36、37、38、39、41、42、43、44、46、47、48、49、50和55的一种或多种肽。在另一个实施方案中，本专利技术提供一种疫苗，其包含选自SEQIDNO:6、7、30、31、32、33、34、35、36、37、38、41、42、47和48的一种或多种HLAI类结合肽。在另一个实施方案中，本专利技术提供一种疫苗，其包含选自SEQIDNO:8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、39、43、44、46、49、50和55的一种或多种HLAII类结合肽。在另一个实施方案中，本专利技术提供一种疫苗，其包含选自SEQIDNO:6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、30、31、32、33、35、36、37、38、39、41、42、43、44、46、47、48、49、50和55的一种或多种HLAI类结合肽，和选自SEQIDNO:8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、39、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离肽，其由氨基酸序列SEQ ID NO:6组成。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.01.15 US 61/752,7991.一种分离肽，其由SEQIDNO:6所示的氨基酸序列NLMNLGATL组成。2.一种分离肽，其由选自以下之一的氨基酸序列组成：SEQIDNO:14所示的氨基酸序列CMTWNLMNLGATLKG、SEQIDNO:15所示的氨基酸序列MTWNLMNLGATLKGV、SEQIDNO:16所示的氨基酸序列TWNLMNLGATLKGV、SEQIDNO:17所示的氨基酸序列WNLMNLGATLKGVAA和SEQIDNO:22所示的氨基酸序列CMTWNLMNLGATLKGVA。3.一种用于结合HLAI类分子的分离肽，其中所述肽是包含SEQIDNO:6所示的氨基酸序列NLMNLGATL的WT1蛋白的片段，且其中所述肽适合被加工为HLAI类结合基序，所述结合基序长度为9-11个氨基酸且包含SEQIDNO:6所示的氨基酸序列NLMNLGATL。4.一种用于结合HLAII类分子的分离肽，其中所述肽是包含选自以下之一的氨基酸序列的WT1蛋白的片段：SEQIDNO:14所示的氨基酸序列CMTWNLMNLGATLKG、SEQIDNO:15所示的氨基酸序列MTWNLMNLGATLKGV、SEQIDNO:16所示的氨基酸序列TWNLMNLGATLKGV、SEQIDNO:17所示的氨基酸序列WNLMNLGATLKGVAA和SEQIDNO:22所示的氨基酸序列CMTWNLMNLGATLKGVA；且其中所述肽适合被加工为HLAII类结合基序，所述结合基序长度为14-20个氨基酸且包含选自以下之一的氨基酸序列：SEQIDNO:14所示的氨基酸序列CMTWNLMNLGATLKG、SEQIDNO:15所示的氨基酸序列MTWNLMNLGATLKGV、SEQIDNO:16所示的氨基酸序列TWNLMNLGATLKGV、SEQIDNO:17所示的氨基酸序列WNLMNLGATLKGVAA和SEQIDNO:22所示的氨基酸序列CMTWNLMNLGATLKGVA。5.根据权利要求1所述的分离肽，其中所述分离肽结合于HLAI类分子。6.根据权利要求2所述的分离肽，其中所述分离肽结合于HLAII类分子。7.一种核酸分子，其包含编码权利要求1至4中任一项所述的分离肽的核酸序列。8.一种表达载体，其包含根据权利要求7所述的核酸分子。9.根据权利要求8所述的表达载体，其中所述载体为减毒病毒载体或伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphi)载体。10.根据权利要求8或9所述的表达载体，进一步编码免疫调节化合物。11.根据权利要求10所述的表达载体，其中所述免疫调节化合物为白介素1至15之一、干扰素α、β或γ、肿瘤坏死因子、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、嗜中性粒细胞激活蛋白(NAP)、巨噬细胞趋化和活化因子(MCAF)、RANTES或巨噬细胞炎性肽MIP-Ia和MIP-Ib。12.根据权利要求10所述的表达载体，其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·A·沙因贝格，T·道，
申请(专利权)人：纪念斯隆凯特林癌症中心，
类型：发明
国别省市：美国;US