一种从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法技术

本发明专利技术公开一种从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法，以解决现有工艺分离得到芒果苷的纯度较低、回收率低、操作复杂等问题。以白木香树叶为原材料，采用正相柱层析与高速逆流色谱联用的方法，快速制备高纯度芒果苷。具有制备量大，高效，快速，成本低，操作简单，产品质量高，无污染的优点，且溶剂可回收利用，降低溶剂成本及溶剂处理费用，该技术能够广泛应用于产业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法
本专利技术属于天然化合物的提取分离纯化领域，具体涉及采用柱层析与HSCCC联用技术快速制备高纯度化合物的方法。
技术介绍
白木香(Aquilariasinensis)，又称土沉香、沉香树、莞香、牙香、女儿香等，为瑞香科沉香属植物，常绿乔木，为我国特有国家二级保护植物，在广东，海南，广西、福建等地均有种植，是中医常用的名贵药材。白木香心材性辛、苦，微温，具有降气调中、暖肾止痛功效，常用于胸腹疼痛、胸闷、呕吐呃逆、腹鸣泄泻、气逆喘促等症。白木香树体含树脂的心材(俗称沉香)，可作香料原料，并为治胃病特效药；树皮纤维柔韧，色白而细致，可做高级纸原料及人造棉；木质部可提取芳香油，花可制浸膏，是一种经济效益较高的植物。其入药部位为含油脂的心木或是树脂(俗称结香)。自然条件下，结香需在特殊情况下才能进行，周期为10年甚至更长，而近年来人工种植采用新技术使白木香结香，虽缩短沉香结香周期，但也要5～8年。而资源丰富的白木香树叶部分，尤其是人工促进结香的树体采香后的叶子常作为废物处理，导致资源浪费。本专利技术以白木香树叶作为原材料，采用正相柱层析与高速逆流色谱联用技术，快速制备高纯度降血糖活性成分芒果苷，作为降血糖系列产品的物质材料。芒果苷(mangiferin)，又称芒果素、莞知母宁，为四羟基吡酮碳糖苷，属双苯吡酮类化合物。芒果苷在植物中存在广泛，在漆树科植物芒果(MangiferaindicaL.)叶片中含量为0.33％～2.98％；在百合科植物知母(AnemarrhenaasphodeloidesBunge)干燥块根中的含量为0.320％～0.325％；在金丝桃科植物元宝草(HypericumsampsoniiHance)全草的含量为0.048％～0.66％；在龙胆科植物川东獐牙菜(SwertiadavidiiFranch.)全草的含量为0.094％～0.216％。近年来发现在白木香中亦有分布，含量为2.76％～3.24％(帅欧等.沉香叶中芒果苷的提取工艺[J].林业科技开发,2013,27(5):101-104.)。芒果苷具有较佳的生理活性。在降血糖活性方面，S.Muruganandan等通过研究发现，芒果苷具有抗高血糖、抗高血脂、抗动脉粥样化的功效，提出芒果苷可用于糖尿病、动脉粥样化等相关心血管并发症的辅助治疗(S.Muruganandan,etal.Effectofmangiferinonhyperglycemiaandatherogenicityinstreptozotocindiabeticrats.JournalofEthnopharmacology.97(2005):497-501.)；而Yao-WuLiu，PrabhuSukumaranNair等再次证实芒果苷具有抗高血糖、抗高血脂的作用(Yao-WuLiu,etal.Up-regulationofglyoxalase1bymangiferinpreventsdiabeticnephropathyprogressioninstreptozotocin-induceddiabeticrats.EuropeanJournalofPharmacology(2013)1-10.)；上述研究均表明芒果苷具有显著地降血糖活性。此外，芒果苷在辐射防护、减少因活性氧引起的细胞调亡、通过抗氧化的途径改善心脏防御功能、抗神经性中毒、抗炎、抗菌、退热、镇痛、抗癌、抗帕金森综合症、抗阿尔兹海默氏病等方面均表现出良好的生理活性，被广泛应用于医药、化妆品、保健品中。但是，由于分离制备工艺操作复杂、制备周期长、回收率低、经济效益低下等原因，以芒果苷为主要成分的相关产品至今未能产业化生产。芒果苷结构为：因医药及保健品方面对芒果苷的需求量较大，出现了一些从天然植物中分离纯化芒果苷及化学合成的研究成果和专利。名称为《知母提取物及其制备方法和用途》(申请号为03115509.X)的专利中公开了一种以知母为原材料，经粉碎，醇浸提，大孔树脂吸附洗脱，醇沉，干燥后，得到了芒果苷及新芒果苷总含量为50％的用于糖尿病防治的提取物。名称为《芒果总甙制剂及其生产方法》(申请号为03128247.4)的专利中公开了一种以芒果叶或扁桃叶为原材料，分离纯化得到芒果总甙达50％或以上的提取物，用于止咳祛痰口服中药制剂的方法。名称为《高纯度芒果苷的制备方法》(申请号为200610079234.5)的专利中公开了一种以芒果叶或扁桃叶为原料，采用树脂法脱色，得到芒果苷纯度≥90％提取物的方法。名称为《提取芒果苷的一种方法》(申请号为200710066354.6)的专利中公开了一种以芒果叶或扁桃叶为原料，采用高温高压的方法，以水或醇-水为溶媒提取芒果苷的方法。名称为《芒果苷的制备方法》(申请号为200910175781.7)的专利中公开了一种以芒果叶为原材料，采用酶法处理，经石油醚脱脂，60％～80％醇提，离心等工艺分离得到芒果苷。名称为《一种芒果苷的制备方法》(申请号为200910234065.1)的专利中公开一种以芒果叶为原材料，粉碎后加入饱和石灰水浸泡提取，再由大孔树脂吸附洗脱，浓缩后重结晶得到芒果苷产品。名称为《一种芒果苷的制备方法》(申请号为201010543720.4)的专利中公开了一种以含有芒果苷的天然植物为原材料，加入碱水，煮沸提取，提取液酸沉，经大孔树脂富集脱色，活性炭处理后，浓缩得到高纯度芒果苷的方法。名称为《从芒果叶中提取芒果苷的方法》(申请号为200910194672.X)的专利中公开了一种以芒果叶为原料，采用碱水温提，酸化，醇沉离心，用sephadexLH-20富集后，重结晶得到高纯度芒果苷的方法。名称为《芒果苷元的全化学合成方法》(申请号为201010529474.7)的专利中提供一种用化学合成方法制备芒果苷元的方法。名称为《一种芒果苷的制备方法》(申请号为201010292465.0)的专利中公开了一种以芒果树果实、芒果叶、芒果树皮和知母根茎为原料，采用醇水提取，萃取，重结晶等方法，制备高纯度芒果苷。名称为《从白木香叶和嫩枝中制备的高纯度芒果苷及其方法》(申请号为201110411308.1)的专利中公开了一种以白木香叶及嫩枝为原料，采用醇提，水沉，醇沉，析晶，重结晶制备出高纯度芒果苷的方法。名称为《一种从芒果果皮中分离纯化芒果苷的方法》(申请号为201210053385.9)的专利中公开了一种以芒果果皮干燥粉末为原料，采用液液萃取，大孔树脂与HSCCC联用技术分离纯化得到高纯度芒果苷的方法。上述中现有公开制备芒果苷的方法主要存在的问题有：1、大部分工艺分离得到芒果苷的纯度较低，或是没有确切的纯度保障；2、部分工艺操作复杂，需采用大量的溶剂进行洗脱，容易对操作人员造成伤害，且溶剂成本高；3、大部分工艺的制备周期长，回收率低，经济效益低下；4、芒果苷在酸性或碱性条件下不稳定，采用酸提或是碱提，大部分芒果苷可能在制备过程变性失活；5、大部分采用芒果叶作为原材料，易出现农残超标，不安全；
技术实现思路
本专利技术意在解决上述问题，提供一种从白木香叶提取物中快速制备高纯度芒果苷的方法，通过以下步骤实现：一种从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法，其特本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：⑴以人工促进结香的白木香树体采香后的叶片为原料，烘干打成粗粉后进行渗漉或浸提，合并所有渗漉液或浸提液，浓缩除去有机溶剂；⑵依次用石油醚萃取2‑4次，除去脂质及脂溶性色素，取水相，用正丁醇进行萃取2‑4次后，合并正丁醇部位，于40‑60℃下低压浓缩，即得到主含芒果苷部位的白木香叶浸膏；⑶将所得白木香叶浸膏正丁醇部位与正相硅胶拌样后，采用正相柱层析分离，将主含芒果苷的流份进行合并后于35‑45℃低压回收溶剂，即得到主含芒果苷的正相柱层析粗分；⑷将所得正相柱层析粗分与正相硅胶拌样后，再次上正相柱层析分离，将主含芒果苷的流份进行合并后，低压回收溶剂，得到主含芒果苷的黄色粉末；⑸配制乙酸乙酯‑甲醇‑水溶剂体系，静置分层后，以上相为固定相，下相为流动相；将所得黄色粉末溶样后上HSCCC分离，将含单一物质芒果苷的流份合并后低压回收溶剂，即得芒果苷纯品。

【技术特征摘要】
1.一种从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：⑴以人工促进结香的白木香树体采香后的叶片为原料，烘干打成粗粉后进行渗漉或浸提，合并所有渗漉液或浸提液，浓缩除去有机溶剂；⑵依次用石油醚萃取2～4次，除去脂质及脂溶性色素，取水相，用正丁醇进行萃取2～4次后，合并正丁醇部位，于40～60℃下低压浓缩，即得到主含芒果苷部位的白木香叶浸膏；⑶将所得白木香叶浸膏与正相硅胶拌样后，采用氯仿-甲醇体系，以体积比分别为9:2→7:3→6:4→1:1→0:1的阶段式进行洗脱，以1柱体积接为一份，同时将接收的流份低压浓缩后，与芒果苷对照品点于同一板上，采用体积比为(10:3:1)的氯仿-甲醇-水溶剂体系下相的展开体系进行TLC检测，将主含芒果苷的流份进行合并后于35-45℃低压回收溶剂，即得到主含芒果苷的正相柱层析粗分；⑷将所得正相柱层析粗分与正相硅胶拌样后，再次上正相柱层析分离，将主含芒果苷的流份进行合并后，低压回收溶剂，得到主含芒果苷的黄色粉末；⑸配制乙酸乙酯-甲醇-水溶剂体系，静置分层后，以上相为固定相，下相为流动相；将所得黄色粉末溶样后上HSCCC分离，将含单一物质芒果苷的流份合并后低压回收溶剂，即得芒果苷纯品。2.根据权利要求1所述的从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法，其特征在于，所述渗漉或浸提是采用50％～80％丙酮水溶液进行渗漉，或采用体积比为1:20的料液比室温浸提。3.根据权利要求1所述的从白木香树叶中分离纯化芒果苷的方法，其特征在于，在所述步骤⑶的正相柱层析分离中，所述浸膏与正相硅胶按质量比1:1进行拌样，流份接收体积为1/3～1柱体积接收为一...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁耀光，杨懋勋，张天佑，
申请(专利权)人：中山市格好生物科技发展有限公司，杨懋勋，梁耀光，
类型：发明
国别省市：广东;44