含有至少两种甲型流感病毒中和结合分子的组合物制造技术

本发明专利技术提供了一种组合物，其含有至少两种结合于甲型流感病毒血球凝集素(HA)蛋白干区表位的甲型流感病毒中和结合分子，所述组合物含有：i)第一结合分子，其可中和至少一种选自下组的甲型流感病毒亚型：H1、H2、H5和H9；和ii)第二结合分子，其可中和至少一种选自下组的甲型流感病毒亚型：H1、H3、H5、H7和H9。本发明专利技术的混合组合物可有效中和系统发育群1和系统发育群2的多种流感亚型，并能与化学化合物联用；因此，本发明专利技术组合物在预防和治疗流感病毒所引起的疾病中非常有效。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】含有至少两种甲型流感病毒中和结合分子的组合物
本专利技术涉及一种含有至少两种甲型流感病毒中和结合分子的组合物，更具体地， 涉及一种含有至少两种具有甲型流感病毒中和活性的人单克隆抗体的组合物，所述单克隆 抗体由源自甲型流感病毒感染痊愈的患者血液中的人B细胞产生。 【
技术介绍
】 流感是一种由流感病毒引起的呼吸道感染性疾病，通常发生于冬季。已知其 具有非常高的感染性并会影响所有年龄段，尤其是老年人（Treanor J，2004，N Engl J. Med. 350(3) :218-20)。流感病毒是属于正黏病毒科的包膜RNA(核糖核酸）病毒，其 基因组由八条反义单股RNA(核糖核酸）区段构成。这些流感病毒被分为甲型、乙型和丙 型。基于主要表面蛋白血球凝集素（HA)和神经氨酸酶（NA)，甲型流感病毒进一步分为 各种亚型。截止目前，已鉴定有17种HA和10种NA (Cheung TK和Poon LL 2007, Ann N Y Acad. Sci. 1102:1-25 ;Tong S，等 2012, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S. A. 109:4269-4274) 〇 根据其类型的不同，流感病毒可感染鸟类、猪以及人类，且由于基因组由RNA区段构 成这一原因，其基因会持续突变和重组，导致新的遗传变异（Treanor J，2004.N Engl J. Med. 350 (3) : 218-20)。鉴于这种持续突变，难以获得针对流感病毒的永久免疫力，因此目 前认为最有效的预防方法是施用一种针对当年预计要流行的特定类型流感病毒的疫苗以 产生针对当年流感病毒的免疫力。 目前每年施用的流感病毒疫苗是含有甲型流感Hl、H3亚型HA和乙型流感HA的三 价疫苗。 通常利用鸡蛋来制备抗流感病毒的疫苗，但该制备方法费时且低效。因此，该方法 的问题在于每年难以在有限的时间段内生产足够量的疫苗。为了解决这个问题，多个制药 公司（GSK、百特（Baxter)等）在积极研究通过细胞培养来生产疫苗的方法。此外，如果发 生大规模的流感病毒感染，则很难在短期内生产出抵御该感染的疫苗。同样，由于出现了耐 药性突变病毒株的问题，抗病毒药物并非完全可靠。 为了克服这个问题，目前积极开发了抗流感病毒的抗体（Throsby等，2008, PloS One 3 (e3942) ;Sui 等，2009,Nature structural&molecular biology.16(265-273); Simmons 等，2007, PloS Medicine 4 (el78) ;Wrammert 等，2011，J Exp Med. 208 (181-193); Corti 等，2011，Science 333(850-856)) 采用痊愈患者的血制品来治疗感染了各种病毒的患者并治疗大规模流感感染。例 如，当感染了西班牙流感病毒的患者有肺炎症状，则从感染该流感病毒并痊愈的患者处采 集血制品以用于治疗流感病毒（Luke 等，2006. Annals of internal medicine. 145:599)。 同样，从人血浆中纯化超免疫球蛋白（IgIv)并用于治疗感染了各种病毒的患者，但是上述 得到的产品可能因血液内潜在的感染性物质而不安全，且大规模生产的效率较低。 申请人最近申请专利保护的抗甲流病毒抗体对多种流感亚型显示出中和活性。具 体地，韩国专利申请（10-2011-0020061)中公开的抗体主要对系统发育群（phylogenetic group) I (H1、H2、H5和H9)表现出中和活性，韩国专利申请（10-2012-0107512)中公开的抗 体主要对系统发育群2 (H3和H7)表现出中和活性。因此，本专利技术人对开发含有至少两种抗 体的鸡尾酒制剂进行了研究，所述抗体对属于群1和2的所有病毒（可能会流行的）表现 出预防和治疗效果。【内容】【技术问题】 本专利技术的目的之一在于提供一种含有至少两种甲型流感病毒中和结合分子的组 合物，所述组合物对系统发育群1和系统发育群2表现出中和活性。 本专利技术的另一目的在于提供一种通过施用所述组合物而诊断、预防或治疗由甲型 流感引起的疾病的方法。 本专利技术的另一目的在于提供一种利用所述组合物诊断甲型流感病毒感染的方法。 本专利技术还有另一目的在于提供一种用于诊断甲型流感病毒的试剂盒，其含有所述 的组合物。 【技术方案】 为了达成上述目的，本专利技术提供了一种组合物，其含有至少两种结合于甲型流感 病毒血球凝集素（HA)蛋白干区（stem region)表位的甲型流感病毒中和结合分子，所述组 合物含有： i)第一结合分子，其可中和至少一种选自下组的甲型流感病毒亚型：H1、H2、H5和 H9 ;和 ii)第二结合分子，其可中和至少一种选自下组的甲型流感病毒亚型：H1、H3、H5、 H7 和 H9。 在本专利技术的一实施方式中，所述第一结合分子的表位可含有HAl多肽第18、38、 40、291、292和318位的氨基酸残基。此外，第一结合分子的表位可含有HA2多肽第18、19、 20、21、41、42、45、48、49、52 和 53 位的氨基酸残基。 在本专利技术的一实施方式中，所述第一结合分子的表位可含有HAl多肽第18、38、 40、291、292和318位的氨基酸残基，且可含有HA2多肽第18、19、20、21、41、42、45、48、49、 52和53位的氨基酸残基。 在本专利技术的一实施方式中，所述第二结合分子的表位可含有HAl多肽第278和318 位的氨基酸残基。此外，所述第二结合分子的表位可含有HA2多肽第38、39、41、42、45、48、 49、52和53位的氨基酸残基。此外，所述第二结合分子的表位可含有HA第一单体的HAl多 肽和/或HA2多肽诸位置的氨基酸残基，还可含有邻近该第一单体的第二单体的HAl多肽 第25、32和33位的氨基酸残基。 在本专利技术的一实施方式中，第二结合分子的表位可含有HAl多肽第278和318位 的氨基酸残基，且还可含有HA2多肽第38、39、41、42、45、48、49、52和53位的氨基酸残基。 在另一实施方式中，第二结合分子的表位可含有第一 HA单体的HAl多肽和HA2多肽诸位置 的氨基酸残基，且还可含有邻近该第一单体的第二单体的HAl多肽第25、32和33位的氨基 酸残基。 在本专利技术的一实施方式中，第二结合分子的表位可含有HAl多肽第278和318位 的氨基酸残基，且还可含有HA2多肽第38、39、41、42、45、48、49、52、53、58和99位的氨基酸 残基。在另一实施方式中，第二结合分子的表位可含有HA第一单体的HAl多肽和HA2多肽 诸位置的氨基酸残基，且还可含有邻近该第一单体的第二单体的HAl多肽第25、27、32和33 位的氨基酸残基。 在本专利技术的一实施方式中，第二结合分子的表位可含有HAl多肽第54、55、278、 291和318位的氨基酸残基，且还可含有HA2多肽第19、20、21、38、39、41、42、45、46、48、49、 52、53、56、57和60位的氨基酸残基。在另一实施例中，所述第二结合分子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组合物，其含有至少两种结合于甲型流感病毒血球凝集素(HA)蛋白干区表位的甲型流感病毒中和结合分子，所述组合物含有：i)第一结合分子，其可中和至少一种选自下组的甲型流感病毒亚型：H1、H2、H5和H9；和ii)第二结合分子，其可中和至少一种选自下组的甲型流感病毒亚型：H1、H3、H5、H7和H9。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪承绪，张宸在，权起圣，李癸淑，金成桓，李殷范，李在元，李昭贞，辛知泳，曹明三，
申请(专利权)人：赛特瑞恩股份有限公司，
类型：发明
国别省市：韩国;KR