本发明专利技术公开了一种多花指甲兰组织培养快繁方法，包括如下步骤：(1)取多花指甲兰果实作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到无菌试管苗；(3)将所述无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽。采用本发明专利技术所述的培养方法得到的多花指甲兰丛生芽增殖系数达到8-10倍，甚至更多，能够在短时间内提供健壮的多花指甲兰优质种苗，有效解决多花指甲兰的规模化育苗问题。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种多花指甲兰组织培养的繁殖方法。更具体地说，本专利技术涉及一种。
技术介绍
多花指甲兰(Aerides rosea Lodd.ex Lindl.et Paxt.)为兰科的附生兰，其总状花序-30cm密生许多花，花白色而带紫色斑点十分艳丽，是园艺上重点观赏植物。自然条件下只有老死时才能从中下部长出1-2个小苗，种子繁殖由于胚发育不完全，自然条件不很难萌发。加之人工采挖的压力，生存环境的恶化，野生资源日益减少，多花指甲兰以被列入国家重点保护野生植物。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的是提供一种多花指甲兰组织培养快繁方法，能够快速有效地提高多花指甲兰种苗的繁殖速度和质量，实现多花指甲兰优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，提供了一种，包括以下步骤:(1)培育无菌试管苗将经过预处理的多花指甲果实切开，取出种子接种到第一 MS培养基中，培养温度23-27°C，光照强度1300-16001ux，光照时间8_10小时/天，培养时间55-65天，得无菌试管苗，其中，第一 MS培养基的初始pH值为5.5-6.0，其包含:MS、0.4-0.6mg/L的6-苄基腺嘌呤、1.8-2.2mg/L的萘乙酸、1.8-2.2g/L的活性炭、25_35g/L的蔗糖以及4_6g/L的琼脂；(2)无菌试管苗快速繁殖培养将步骤(1)中得到的无菌试管苗置于第二 MS培养基中，培养温度23-27°C，光照强度1400-16001ux，光照时间为8-10小时/天，培养时间55-65天，得试管苗丛生芽，其中第二 MS培养基的初始pH值为5.8，其包含:MS、0.5-2.0mg/L的噻苯隆、0.2-1.5mg/L的2.4二氯苯氧乙酸、1.8-2.2mg/L的聚乙烯吡咯烷酮、25_35g/L的蔗糖和4_6g/L的琼脂。优选的是，所述的，所述步骤(1)中的预处理包括:选取多花指甲果实，用体积分数为1-3%的洗洁精水溶液浸泡4-6min，并用流水冲洗15-30min，再用氯化萊消毒10_15min，无菌水冲洗3_5次，除去表面水分，得到处理后的多花指甲果实，其中每100ml氯化汞加入2-3滴吐温-20。优选的是，所述的，所述预处理中，除去表面水分，具体为采用消毒滤纸除去表面水分。优选的是，所述的，所述活性炭为AC活性炭。优选的是，所述的，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。优选的是，所述的，所述预处理中，在除去表面水分后，还包括:将除去水分后的多花指甲果实用波长为200nm的紫外线照射处理lOmin。优选的是，所述的，萘乙酸的浓度为2.0mg/L。优选的是，所述的，所述步骤(1)中，取出种子接种到第一 MS培养基中，具体为:步骤A、向组培瓶底部由下至上依次铺设厚度为1_的火山泥层、厚度为2_的海底泥层以及厚度为1_的火山泥层形成的层状结构，在所述海底泥层表面覆盖一层防水透气膜，再向组培瓶中投入第一 MS培养基，此处的组培瓶为圆柱状的口径较大的组培瓶；步骤B、在所述第一 MS培养基表面放置水平设置的网板，按压所述网板至接触所述火山泥层，所述网板的网格均为边长为8_的正方形，所述网板表面均匀涂覆厚度为1_的聚丙烯酰胺层，并在聚丙烯酰胺层表面覆盖一层滤布，所述网板高度略低于所述第一 MS培养基的深度，以使得所述网板淹没在所述第一 MS培养基内；步骤C、在所述网板的每个网格靠近中间的位置，竖直设置一个直径为2mm的管体，使其卡设在所述层状结构上，其中，所述管体的高度高于所述第一 MS培养基的深度，所述管体位于所述第一 MS培养基的部分均匀间隔开设多个直径为0.8mm的通孔；步骤D、向所述第一 MS培养基中均匀投放种子。本专利技术至少包括以下有益效果:(1)采用生物技术对多花指甲兰进行组织培养快速繁殖，能够在短时间内培育出大量适合栽培种植的多花指甲兰幼苗，保障多花指甲兰种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。(2)采用本专利技术所述的培养方法得到的多花指甲兰丛生芽增殖系数达到8-10倍，丛生芽健壮，接种到生根培养基后容易生根。(3)本专利技术所采用的培养基选用新型高效的细胞分裂素-噻苯隆，其可以高效促进细胞分裂，用于组织培养，可以更好的促进植物的芽分化，对人畜低毒；而且培养基中还添加了 2，4-二氯苯氧乙酸，其作为一种生长素类似物，具有很好的调节植物生长的作用。(4)本专利技术在培养基中架设网板，并在网板上涂覆聚丙烯酰胺层，聚丙烯酰胺具有很好的保水作用，刚开始可以吸收培养基的水分进行保存，随着培养的进行，培养基中的水分逐渐减少，聚丙烯酰胺将释放其之前吸收的水分，为后期种子的发育提供更好的条件，而且在网格中间卡设一管体，管体开设多个通孔，每隔一段时间，可以往管体内输送空气，即为培养基内输送空气，提高培养基内的含氧量，为种子发芽的提高条件；并在组培瓶底部铺设海底泥和火山泥，其中含有大量的矿物元素，亦有利于种子发芽。本专利技术的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本专利技术的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。<实施例1>一种，包括以下步骤:(1)培育无菌试管苗将经过预处理的多花指甲果实切开，取出种子接种到第一 MS培养基中，培养温度23°C，光照强度13001ux，光照时间8小时/天，培养时间55天，得无菌试管苗，其中，第一MS培养基的初始pH值为5.5，其包含:MS、0.4mg/L的6-苄基腺嘌呤、1.8mg/L的萘乙酸、1.8g/L的活性炭、25g/L的蔗糖以及4g/L的琼脂；(2)无菌试管苗快速繁殖培养将步骤(1)中得到的无菌试管苗置于第二MS培养基中，培养温度23-27°C，光照强度14001ux，光照时间为8小时/天，培养时间55天，得试管苗丛生芽，其中第二 MS培养基的初始pH值为5.8，其包含:MS、0.5mg/L的噻苯隆、0.2mg/L的2.4 二氯苯氧乙酸、1.8mg/L的聚乙烯吡咯烷酮、25-35g/L的蔗糖和4-6g/L的琼脂。所述的，所述步骤(1)中的预处理包括:选取多花指甲果实，用体积分数为1%的洗洁精水溶液浸泡4min，并用流水冲洗15min，再用氯化汞消毒lOmin，无菌水冲洗3次，除去表面水分，得到处理后的多花指甲果实，其中每100ml氯化汞加入2滴吐温-20。所述的，所述预处理中，除去表面水分，具体为采用消毒滤纸除去表面水分。所述的，所述活性炭为AC活性炭。所述的，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。所述的，所述预处理中，在除去表面水分后，还包括:将除去水分后的多花指甲果实用波长为200nm的紫外线照射处理lOmin。所述的，所述步骤(1)中，取出种子接种到第一 MS培养基中，具体为:步骤A、向组培瓶底部由下至上依次铺设厚度为1_的火山泥层、厚度为2_的海底泥层以及厚度为1_的火山泥层形成的层状结构，在所述海底泥层表面覆盖一层防水透气膜，再向组培瓶中投入第一 MS培本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)培育无菌试管苗将经过预处理的多花指甲果实切开，取出种子接种到第一MS培养基中，培养温度23‑27℃，光照强度1300‑1600lux，光照时间8‑10小时/天，培养时间55‑65天，得无菌试管苗，其中，第一MS培养基的初始pH值为5.5‑6.0，其包含：MS、0.4‑0.6mg/L的6‑苄基腺嘌呤、1.8‑2.2mg/L的萘乙酸、1.8‑2.2g/L的活性炭、25‑35g/L的蔗糖以及4‑6g/L的琼脂；(2)无菌试管苗快速繁殖培养将步骤(1)中得到的无菌试管苗置于第二MS培养基中，培养温度23‑27℃，光照强度1400‑1600lux，光照时间为8‑10小时/天，培养时间55‑65天，得试管苗丛生芽，其中第二MS培养基的初始pH值为5.8，其包含：MS、0.5‑2.0mg/L的噻苯隆、0.2‑1.5mg/L的24‑二氯苯氧乙酸、1.8‑2.2mg/L的聚乙烯吡咯烷酮、25‑35g/L的蔗糖和4‑6g/L的琼脂。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王晓峰，李刚，韦坤华，李翠，肖冬，王一诺，韦莹，缪剑华，
申请(专利权)人：广西壮族自治区药用植物园，
类型：发明
国别省市：广西;45
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