与毗邻肝肿瘤的正常肝组织上皮细胞相比肝肿瘤块内的细胞包含独特的一组蛋白/肿瘤抗原。肿瘤抗原的存在与针对这些肿瘤抗原的自身抗体的产生有关。本发明专利技术涉及一组蛋白的鉴定和说明，该组蛋白可以充当用于肝癌诊断和预后的一组新的标志物。具体地，其涉及能够对肝癌患者的血清中的自身抗体进行诊断性和预后性测量的试剂盒。本发明专利技术提供了一种无创的、特异性的、灵敏的和有成本效益的检测和定量方法，从而对常规诊断方法形成补充，该方法通过评价一组经验证的肝癌蛋白/肿瘤抗原实现,该组肝癌蛋白/肿瘤抗原包括Bmi-1、VCC1、SUMO-4、RhoA、TXN、ET-1、UBE2C、HDGF2、FGF21、LECT2、SOD1、STMN4、中期因子、IL-17A或IL26。
【技术实现步骤摘要】
【专利说明】 版权声明/许可 本专利文件的公开内容的一部分含有接受版权保护的内容。版权拥有者不反对任 何人影印复制专利文件或者专利公开，因为它出现在专利和商标局专利文档或记录中，但 在其它方面保留所有版权。下面的声明适用于如下所述的和在本文附带的附图中的过程、 实验和数据：版权:￡) 2014, Vision Global Holdings Limited,保留所有权利。
本专利技术描述了一种用于检测和定量一组特异性的和新的肝细胞癌（HCC)肿瘤生 物标志物的方法，所述方法通过测量肝癌患者血清中的对应自身抗体来完成。该组生物标 志物包括 Bmil、VCCl、SUMO-4、RhoA、TXN、ET-I、UBE2C、HDGF2、FGF21、LECT2、SODl、STMN4、 中期因子、IL-17A和IL26。更具体地，本专利技术进一步描述了一种容易获得的高通量和灵敏 的测试试剂盒的设计，以采取患者的外周血清样品来在早期以无创的方式检测肝癌，所述 检测通过测量针对选自所述生物标志物组的至少一种生物标志物的自身抗体进行。本发 明进一步允许鉴定用于分期的特征生物标志物谱，以及检测化疗治疗后的监测期期间的复 发。本专利技术将支持自动数据分析。
技术介绍
肝细胞癌（HCC)是中国第二普遍的癌症，占总人口的5. 7% 。大多数HCC患者 发生快速的肿瘤进展，导致高死亡率。为了提高总生存率，对该疾病的早期诊断变得至关重 要。目前，检测HCC的最普遍方式是血液检查，血液检查测量HCC肿瘤标志物诸如甲胎蛋白 (AFP)的水平。AFP是在胎儿的发育过程中由卵黄囊和肝产生的血浆蛋白，作为血清白蛋白 的一种形式。在正常条件下，AFP水平在出生后逐渐下降并且在成年人中保持低水平。肿 瘤标志物的水平增加指示可能有肝癌。然而，AFP检查的主要问题是过多的假阳性。这是 因为HCC不是导致AFP水平升高的唯一原因，酒精性肝炎、慢性肝炎或肝硬化也与AFP的升 尚相关。 尽管AFP检查普遍被推荐用于肝癌的诊断，但其结果并不是结论性的。疑似患者 将需要经历超声成像、CT扫描或对比MRI扫描以进一步确认。取肝活检以区分肿瘤是良性 还是恶性的。然而，对HCC的常规检测具有一些限制性：(a)约20%的肝癌不产生升高水平 的常用HCC肿瘤标志物。（b)病毒性肝硬化会对血液检查产生假阳性结果。（c)超 声不能检测到小的肿瘤。（d) CT扫描需要高的辐射剂量并且对小于Icm的肿瘤不灵敏 。（e)MRI扫描很昂贵，并且操作很耗时。由于这些限制，需要开发新的具有较高灵敏度 和特异性的生物标志物筛选，目的是早期诊断HCC和/或确定HCC的预后，从而对常规方法 进行补充。 与紧靠肿瘤的正常肝上皮细胞相比，HCC肿瘤细胞往往会产生独特的一组蛋白。评 价经验证的HCC肿瘤生物标志物具有有利于HCC诊断的巨大潜力。然而，不是所有生物标 志物本身可以在血清或尿中找到以进行方便的诊断。可选地，特异性针对生物标志物的自 身抗体提供了评价生物标志物的表达的机会。在许多癌症中已经证明肿瘤生物标志物的存 在与针对这些肿瘤抗原的自身抗体的产生有关。检测患者血清中的自身抗体将允许 我们更有效地检查生物标志物的存在。理想地，从外周血中检查自身抗体将是在早期以无 创的方式检测肝癌的证据。妨碍生物标志物的临床应用的一个常见障碍是它们在被发现后 并未被验证。但一旦经过验证，这些检查将具有成本效益并且是准确的。原型的设计也支 持高通量筛选。这可以减少常规肝癌诊断所需的成本。 下面列举的参考文献偶尔在说明书中引用。这些参考文献的每一篇公开内容都全 部地通过引用合并于本文中。 Chen JG,Zhang Sff. Liver cancer epidemic in China:past, present and future(中国的肝癌流行病学：过去、现在和未来）.Semin Cancer Biol. 2011; 21(1):59-69 Okuda K，Peters RL. Human alpha-lfetoprotein (人 α -1 胎蛋 白）· Hepatocellular Carcinoma. 1976:353-67 Lok AS,Lai CL. Alpha-fetoprotein monitoring in Chinese patients with chronic hepatitis E virus infection:role in the early detection of hepatocellular carcinoma (在患有慢性戊型肝炎病毒感染的中国患者中的甲胎蛋白监 测：在肝细胞癌早期检测中的作用）· ifepatolog. y 1989 ;9:110-115 Colombo M, de Franchis R, Del Ninno E, Sangiovanni A, De Fazio C, Tommasini M, Donato MF, Piva A, Di Carlo V, Dioguardi N. Hepatocellular carcinoma in Italian patients with cirrhosis(患有肝硬化的意大利患者中的肝细胞癌）· N Engl J Med. 1991 ;325:675-80 Sahani DV, Kalva SP. Imaging the Liver (对肝脏成像）· The Oncologist. 2004 ；9(4):385-397 Masutomi K, Kaneko S, Yasukawa M, Arai K, Murakami S, Kobayashi K.Identification of serum anti-human telomerase reverse transcriptase(hTERT) auto-antibodies during progression to hepatocellular carcinoma(对进展至月干细 胞癌期间血清抗人端粒酶反转录酶（hTERT)自身抗体的鉴定）.Oncogene. 2002Aug29 ; 21(38) :5946-50. Karanikas V, Khali I S, Kerenidi T, Gourgoul ianis ΚΙ, Germenis ΑΕ. Anti-survivin antibody responses in lung cancer (肺癌中的抗存活素反 应）.Cancer Lett. 2009S印 18 ;282(2) :159-66. ffang YQ1Zhang HH1Liu CL1Xia Q, Wu H, Yu XH1Kong ff. Correlation between auto-antibodies to survivin and MUClvariable number tandem repeats in colorectal cancer (在结直肠癌中针对存活素的自身抗体和MUCl可变数目串联重复序列 之间的相关性）· Asian Pac J Cancer Prev. 2012 ;13(11) :5557本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于检测和定量针对多种肿瘤生物标志物的自身抗体以用于对肝癌进行诊断和分期的方法，所述方法包括：将肿瘤细胞与正常细胞进行比较以评价作为所述癌症的多个特异性生物标志物的一组蛋白，该组蛋白在肿瘤细胞中是独特的，但在正常细胞中不是独特的；通过使用基于二维的技术或基于质谱的技术从患者的配对活检样品中鉴定该组蛋白；验证用于诊断肝癌的该组蛋白，其中该组蛋白从cDNA克隆表达、被纯化并偶联至具有不同发射波长的荧光微球珠以形成蛋白‑珠缀合物，以及其中存在于患者血清中的针对该组蛋白的自身抗体与所述蛋白‑珠缀合物免疫结合。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：文咏贤，卫凤文，黄炳镠，卫智贤，
申请(专利权)人：龙胜发展有限公司，
类型：发明
国别省市：中国香港;81
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。