一种蒲公英提取物的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种蒲公英提取物的制备方法，包括以下步骤：水提取、减压浓缩、醇沉、调节pH值、大孔树脂纯化、浓缩和干燥等。本发明专利技术工艺简单易操作，所用大孔树脂可再生利用，制备成本低且环境污染小；使用乙醇溶液作为提取、洗脱溶剂，安全性高，廉价易得，生产成本低；所得的蒲公英提取物中总黄酮、咖啡酸含量高、成分全，不仅含黄酮类、酚酸类有效成分，也含香豆素和酯类等成分，其中总黄酮含量由药材中的2％提高到50％以上，咖啡酸含量由0.02％提高到0.8％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于中药领域。
技术介绍
蒲公英为菊科植物蒲公英Taraxacum mongo 1 icum Hand. -Mazz.、碱地蒲公英 Taraxacum borealisinenseKitm.或同属数种植物的干燥全草，全国各地均有分布。春至 秋季花初开时采挖，除去杂质，洗净，晒干，鲜用或生用。蒲公英是临床常用中药，《本草备 要》谓之"专治痈肿、疗毒，亦为通淋妙品"，古方记载蒲公英为"解热凉血之要药"、"至贱而 有大功"。蒲公英味苦、甘，性寒，归肝、胃经。有清热解毒，消肿散结，利尿通淋之功效，用于 乳痈、肺痈、肠痈、痄腮、瘰病，疔疮肿毒，目赤，咽痛，湿热黄疽，热淋涩痛，蛇虫咬伤等。蒲公 英的主要有效成分为黄酮类、酚酸类、香豆素类、酯类、维生素及矿物质等。现代药理学研 究表明，蒲公英对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌及卡他球菌具有较强的抑制作用，还有利 胆、保肝、抗内毒素及利尿等作用。 中药的作用特点之一就是多成分起作用，蒲公英中多种成分如黄酮、酚酸等皆有 明显的药效作用。目前，针对蒲公英药效成分的分离、纯化主要以单一成分做指标，例如中 国专利CN103070899A提供了一种蒲公英总黄酮的分离纯化方法，具体包括甲醇回流提取、 浓缩、调节pH、大孔树脂柱分离、硅胶层析柱分离等步骤，制备了含量在96%以上的总黄 酮；但该方法使用85% -100%甲醇提取，再用甲醇、丙酮及其混合溶液作为洗脱剂进行分 离、纯化，容易造成提取物中毒性溶剂残留，且该方法同时使用了大孔树脂柱和硅胶层析柱 进行分离、纯化，操作步骤繁多，不适合大生产。中国专利CN103494858A公开了一种蒲公英 总黄酮的大孔树脂富集方法，包括石油醚脱脂、乙醇回流提取、浓缩、调节pH、大孔树脂柱分 离纯化等步骤，获得了含量在60%以上的总黄酮，但该方法提取前用石油醚脱脂，易造成有 机溶剂的残留，不适于大生产。李喜凤等对蒲公英中有机酸类成分的提取工艺进行了研究， 结果表明，蒲公英中有机酸最佳提取条件为：80%的乙醇，料液比为1:40,水浴回流1. 5小 时，各有机酸的提取率均较高；但该方法并没有提供进一步分离纯化有机酸的方法，且该方 法仅以有机酸作为评价指标，并没有涉及蒲公英总类成分的提取、分离（李喜凤，郝哲，邱 天宝，等.蒲公英中有机酸类成分的提取工艺研究.中成药，2011，33(2) :262-265.)。 以上都是关于蒲公英中黄酮类和酚酸类成分的提取、分离，但有关蒲公英总有效 成分提取物的提取、纯化研究却甚少。虽然总黄酮和酚酸是蒲公英的药效成分之一，但仅以 总黄酮或总酚酸作为指标，并不能全面体现蒲公英提取物药效作用。 鉴于现有技术的不足，有必要专利技术一种新的制备蒲公英提取物的方法，使之既能 简化操作过程，在最大程度上少用或不用有害溶剂，适合工业化大生产，又能提高提取物中 多种药效成分的含量。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服现有提取、纯化工艺的不足，提供一种简单、有 效的制备蒲公英提取物的方法。 本专利技术的目的是通过以下方式实现的。 本专利技术蒲公英提取物的制备方法包括：水提醇沉、过滤浓缩、调节pH值、大孔树脂 纯化和浓缩、干燥等步骤。 进一步，本专利技术所涉及的包括以下步骤： 1)取蒲公英药材，水提取，滤过，合并滤液，减压浓缩，得浓缩液； 2)步骤1)浓缩液加乙醇至含醇量为40%-70%，静置、过滤、减压浓缩、回收乙醇， 得浓缩液； 3)步骤2)浓缩液加水稀释至相当于1-3倍药材重量，调节pH为2-6,加于预 处理好的大孔树脂柱上进行吸附，先以l_3BV/h的流速用1-3BV pH = 3-7的稀盐酸溶 液洗脱，再以2-3BV/h的流速用1-3BV纯水洗脱，弃去洗脱液，然后以l-4BV/h的流速用 1-38￥40%-60%乙醇洗脱，最后以2-48￥/11的流速用1-38￥60%-80%的乙醇洗脱； 4)合并步骤3)醇洗脱液，浓缩，干燥，得蒲公英提取物。 优选地，步骤1)所述水提取加水量为8-12倍药材重量，提取次数为3次，每次1 小时。 优选地，步骤2)所述浓缩液的乙醇含量为70 %。 优选地，步骤3)所述的大孔树脂为HPD-826、HPD-750、HPD-100、D-101和AB-8中 的一种，最优为HPD-750。 优选地，步骤3)所述浓缩液加水稀释至相当于3倍药材重量并调节pH为3-5,除 杂用稀盐酸溶液pH为3-5,洗脱用乙醇溶液的浓度分别为40%和70%。 与现有技术比较，本专利技术蒲公英提取物制备方法具有以下显著的进步： 1、操作简单，条件可控，具良好的可重复性，所用大孔树脂可重复利用，制备成本 低且不污染环境，适合工业化生产。 2、本专利技术使用水提取，药效成分提取率高，其中总黄酮提取率高于醇提法；所用提 取及洗脱溶剂为水或乙醇，廉价易得，所得提取物无有害溶剂残留，药物安全性高； 3、与现有蒲公英有效成分提取纯化方法相比较，用本专利技术方法制备的蒲公英提取 物药效成分更全，不仅含有黄酮类、酚酸类成分，也保留了香豆素类、酯类等成分，可最大程 度保证蒲公英药材的原有功效，且降低了服用量，利于制剂及提高了患者用药的顺应性。 4、与现有的蒲公英有效成分制备方法相比较，用本专利技术方法制备的蒲公英提取物 中总黄酮含量由药材中2%提高到50%以上，咖啡酸含量由药材中0.02%提高到0.8%以 上。【具体实施方式】 以下通过蒲公英有效成分提取物抗炎作用和抗病毒试验例及蒲公英提取物制备 的【具体实施方式】对本专利技术作进一步说明，但这并非是对本专利技术的限制，本领域技术人员根 据本专利技术的基本思想，可以做出各种修改或改进，但只要不脱离本专利技术的基本思想，均在本 专利技术的范围之内。 实施例1蒲公英提取物抗炎作用试验 1、试验目的 采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀试验模型研究蒲公英提取物抗炎作用 2、试验材料 2. 1、受试药品 蒲公英提取物，批号：20110615 (以本专利技术最佳实施例6所得的蒲公英提取物），棕 黑色粉末，气香味苦、质地干脆，难溶于水和乙醇。 2. 2、阳性对照药 999皮炎平（复方醋酸地塞米松乳膏），华润三九医药股份有限公司产品； 适应症：用于局限性瘙痒症、神经性皮炎、接触性皮炎、脂溢性皮炎以及慢性湿 疹； 批号：国药准字 H44024170,生产日期：2011. 11. 13,有效期：2013. 09. 01 ; 性状：白色乳膏，有樟脑的特异芳香； 规格：20g/15 毫克； 用法用量：外用，一日1~2次，取少量涂于患处，并轻揉片刻。 2. 3、剂量设计 2. 3、复方醋酸地塞米松乳膏（999皮炎平） 按照说明书提供的用法用量，本品临床外用，一日1~2次，取少量涂于患处，轻揉 片刻。本试验采用每日在小鼠右耳壳正反两面均匀涂抹（每鼠每日用量为0.1ml)。 2. 3. 3、蒲公英提取物 根据使用剂量预试验结果，采用55mg/kg体重、45mg/kg体重、35mg/kg体重三种剂 量给药，一半灌胃给药，一半涂抹耳部给药，灌胃给药部分三个剂量依次取55mg/kg体重、 45mg/kg体重、35mg/kg提取物溶于0. 5%羧甲基纤维素中配成20ml给药液；涂抹给药部分 三个剂量依次取27. 5mg、22. 5mg、17. 5mg提取物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蒲公英提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)取蒲公英药材，水提取，滤过，合并滤液，减压浓缩，得浓缩液；2)步骤1)浓缩液加乙醇至含醇量为40％‑70％，静置、过滤、减压浓缩、回收乙醇，得浓缩液；3)步骤2)浓缩液加水稀释至相当于1‑3倍药材重量，调节pH为2‑6，加于预处理好的大孔树脂柱上进行吸附，先以1‑3BV/h的流速用1‑3BV pH＝3‑7的稀盐酸溶液洗脱，再以2‑3BV/h的流速用1‑3BV纯水洗脱，弃去洗脱液，然后以1‑4BV/h的流速用1‑3BV40％‑60％乙醇洗脱，最后以2‑4BV/h的流速用1‑3BV60％‑80％的乙醇洗脱；4)合并步骤3)醇洗脱液，浓缩，干燥，得蒲公英提取物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵志全，惠建国，冯倩，李蔚群，
申请(专利权)人：鲁南制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37