一种二聚色酮生物碱类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种二聚色酮生物碱类化合物及其制备方法和应用，所述二聚色酮生物碱类化合物是从豆科决明属药用植物腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮中分离得到，其分子式为C26H21NO6，命名为腊肠素A，英文名为Fistulain A，具有下述结构式：制备方法是以豆科决明属药用植物腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮为原料，经过浸膏提取、有机溶剂萃取、MCI脱色、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而得到。本发明专利技术化合物是从药用植物中发现的第一个通过C-14–N连接的新颖骨架类型的二聚体色酮生物碱，且具较好的生物活性，可作为抗癌药物和抗烟草花叶病毒的先导化合物，具有较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种二聚色酮生物碱类化合物及其制备方法和应用
本专利技术属于民族特色药用植物中的有效成分提取分离、结构鉴定以及活性筛选的
，具体涉及一种二聚色酮生物碱类化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
豆科植物腊肠树（Cassiafistula），是泰国的国花，原产于南亚南部，分布在缅甸、斯里兰卡、印度以及中国大陆的南部、西南部等地，生长于海拔1,000米的地区。在中国，腊肠树是傣族常用的一种中草药，傣族民间广泛用于皮肤感染、肥胖症、周期性发热以及肿瘤病等的治疗。而腊肠树在傣语中又叫“锅拢良”，其果实、种子、树根和树皮均可入药，其中含有醌类化合物，具有泻下作用；果实含有鞣酸类化合物，树皮可做用于制造皮革和红色染料等。傣族民间以果实、根、枝、叶和树皮均被作为药用植物而广泛应用。其中，腊肠树的叶苦、涩，性凉，具有消肿止痛、降火排毒、利水消石、散风止痛的功效；腊肠树的种子用于治疗肝胆疾病，还可以增加食欲；腊肠树的根主要用来治疗各种皮肤病、麻风病、肺结核以及梅毒等；其果实对炎症、肝病、咽喉痛、支气管哮喘、风湿和类风湿关节炎都有一定的疗效。据报道，该植物的不同部位具有抗糖尿病、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗菌、抗氧化的活性。前期对该植物进行的化学成分研究中，主要得到的是一些常规的黄酮，三萜，萘醌，糖类和木脂素类化合物。与前期不同的是，本专利技术从腊肠树中分离得到一个新颖的通过C-14–N连接的二聚体色酮生物碱类化合物，且该化合物具有显著的细胞毒活性和抗病毒活性。
技术实现思路
本专利技术的第一目的是提供一种二聚色酮生物碱类化合物；第二目的在于提供所述二聚色酮生物碱类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述二聚色酮生物碱类化合物在制备抗癌和抗烟草花叶病毒药物中的应用。本专利技术的第一目的是这样实现的，所述的二聚色酮生物碱类化合物是从干燥的豆科决明属药用植物腊肠树（Cassiafistula）的树皮中分离得到，其分子式为C26H21NO6，具有下述结构：该化合物为黄色胶状物，命名腊肠素A，英文名为FistulainA。本专利技术的第二目的是这样实现的，所述二聚色酮生物碱类化合物的制备方法，是以豆科植物腊肠树（Cassiafistula）的干燥树皮为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、MCI脱色、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤，具体为：A、浸膏提取：将豆科植物腊肠树（Cassiafistula）的树皮粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，或者冷浸提取2~5次，每次3天，合并提取液、过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；B、有机溶剂萃取：在浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；C、MCI脱色：浸膏b加入重量比3~5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-95%甲醇水洗脱，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏c;D、硅胶柱层析：浸膏c上硅胶柱层析，装柱硅胶为160~200目，用量为浸膏c重量6~10倍量；以体积配比为1:0~0:1的氯仿和丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；E、高效液相色谱分离：将以体积含量50~90%的石油醚-丙酮溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，即得所述的二聚色酮生物碱类化合物。以上述方法制备的二聚色酮类化合物的结构是通过以下方法鉴定出来的：本专利技术化合物为黄色胶状物；（1）紫外光谱（溶剂为甲醇），λmax(logε）：220(4.46),248(3.68),276(3.84),322(3.48),376(2.92)nm；（2）红外光谱（溴化钾压片）νmax：3446,3158,2938,1730,1647,1605,1574,1442,1385,1338,1276,1164,1076,862,751cm–1；（3）HRESIMS显示本专利技术化合物准分子离子峰m/z466.1261[M+Na]+（计算值为466.1261），结合13C和1HNMR谱（图1和图2，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C26H21NO6，其不饱和度为17。1HNMR（CDCl3，500MHz）和13CNMR（CDCl3，125MHz）数据，见表1。1HNMR谱（图2）显示了3个甲基信号（δH2.26,s,H3-13;2.38,s,H3-9';2.51,s,H3-12'），2个亚甲基信号（δH3.45,s,H2-14;4.24,s,H2-11），5个单峰芳香质子信号（δH6.21,s,H-3;6.53,s,H-6';6.78,s,H-8';6.85,s,H-3';6.93,s,H-10'）以及一个1,2,3,5-四取代苯环信号（δH6.59,d,J=1.8Hz,H-6;6.66,d,J=1.8Hz,H-8）。在碳谱和DEPT谱（图1）中观测到了26个碳原子信号，其中3个甲基（包括两个芳香甲基），2个亚甲基，7个芳香次甲基和14个季碳信号（包括了3个羰基和5个含氧季碳信号）。其中，3羰基和18个双键碳占用了12个不饱和度，所以该分子是一个高度芳香化的五环生物碱。以上的波谱数据结合之前从决明属中分离得到的化合物，初步推测，腊肠素A是一个由两个不同的C13骨架组成的异二聚体类生物碱。它由A和B片段构成。根据A片段（O-1toC-14）的特征信号（δC166.4,113.1,180.1,138.5,121.1,163.8,103.6,161.4,115.9;δH6.21,6.59,6.66），推测其为一个C13骨架的色酮类化合物（A和B环）。这个推测通过HMBC相关得到证实，即H-3与C-2/C-4/C-10相关，H-6与C-8/C-10相关，H-8与C-6/C-10相关（图3）。其次，还有1个丙酮基和1个羟基基团分别连接在C-5和C-7上，这也通过HMBC谱中的H2-11与C-6/C-10相关，以及7-OH与C-6/C-7/C-8相关得到确证。这些数据说明了化合物的A片段为一个5-丙酮基-7-羟基-2-色酮衍生物，其主要区别是C-14位由原来的甲基变成了亚甲基，推测A片段通过C-14与B片段连接起来。余下的13个碳原子，包括了2个甲基，4个次甲基，7个季碳信号，隶属于B片段。HMBC相关给出了B片段的大致结构。在HMBC谱中，观测到了H-6'与C-5'/C-7'/C-8'，H-8'与C-6'/C-7'/C-8a'，H3-9'与C-2'/C-3'/C-8a'，H-3'与C-2'/C-4a'/C-9'以及H-6'与C-4a'/C-5'/C-7'/C-8'/C-10'的相关，从而证实了B片段中色酮基本片段（Ｃ和Ｄ环）。同时，HMBC谱中还观测到了H-10'与C-4a'/C-5'/C-6'/C-11'/C-12'以及H-12'与C-14/C-4'/C-10'/C-11'的相关，这说明了C-4'，C-4a'，C-5'，C-10'，C-11'，C-12'以及N原子一起形成了一个2-甲基吡啶衍生物片段（环E），它通过C-4'，C-4a'，和C-5'与Ｃ和Ｄ环骈合在一起。最终，通过H2-14与C-4'/C-11'以及H3-12'的C-14的HMBC相关，确定了A和B片段的连接顺序，至此，该二聚色酮生物碱类化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种二聚色酮生物碱类化合物，其特征在于所述二聚色酮类化合物是从豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮中分离得到，命名为腊肠素A，英文名为Fistulain A，其分子式为C26H21NO6，具有下述结构：。

【技术特征摘要】
1.一种二聚色酮生物碱类化合物，其特征在于所述二聚色酮类化合物具有下述结构：。2.一种权利要求1所述二聚色酮生物碱类化合物的制备方法，其特征在于以豆科植物腊肠树（Cassiafistula）的干燥树皮为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、MCI脱色、硅胶柱层析、高效液相色谱制备分离步骤，具体为：A、浸膏提取：将豆科植物腊肠树（Cassiafistula）的树皮粉碎到20~40目，用70%丙酮或80%甲醇超声提取2~5次，每次30~60分钟，或者冷浸提取2~5次，每次3天，合并提取液、过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；B、有机溶剂萃取：在浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用与水等体积的乙酸乙酯或氯仿萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；C、MCI脱色：浸膏b加入重量比3~5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-95%甲醇水洗脱，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏c;D、硅胶柱层析：浸膏c上硅胶柱层析，装柱硅胶为160~200目，用量为浸膏c重量6~10倍量；用体积比分别为20:1,9:1,8:2,7:3,6:4和1:1的氯仿-丙酮混合有机溶剂梯...

【专利技术属性】
技术研发人员：周敏，耿慧春，高雪梅，胡秋芬，江志勇，杨光宇，叶艳青，
申请(专利权)人：云南民族大学，
类型：发明
国别省市：云南;53