不饱和内酯类成分与化疗药物组合物及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种不饱和内酯类成分与抗肿瘤化疗药物组合物及其医药用途。本发明专利技术提供数种从天然植物中提取的不饱和内酯类成分，这些成分在没有明显细胞毒的剂量下与铂类化疗药物联用有协同抗肿瘤作用以及逆转肿瘤对铂类药物的耐药作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，具体涉及不饱和内酯类成分与铂类化疗药物组合物及 其医药用途。
技术介绍
恶性肿瘤是威胁人类健康的头号杀手，在2008年造成760万人死亡（约占所有死 亡人数的13% )，大约70%的癌症死亡发生在低收入和中等收入国家。预计全世界癌症死 亡人数将继续上升，到2030年将超过1310万。 化疗是目前临床上治疗恶性肿瘤的最重要手段之一，然而由于肿瘤细胞对化疗药 物产生耐药而导致患者化疗失败。铂类化疗药（顺铂、卡铂、奥沙利铂）广泛用于各种癌症 的治疗，其抗癌作用机制尚未完全研究清楚。目前，一般认为铂类药物是通过与癌细胞中的 DNA结合，形成链内、链间连结，影响DNA的功能，干扰DNA复制、转录等，从而达到抑制、消灭 肿瘤。 肿瘤对铂类产生耐药的机制十分复杂，目前发现的耐药机制主要有以下几方面： 顺铂在细胞内蓄积的降低；巯基分子例如GSH的过度流入及其钝化作用都导致了细胞对顺 铂的耐药性；DNA修复途径中顺铂加合物的过度清除也能导致对顺铂的耐药性；控制细胞 凋亡途径有关的信号传导通路调节蛋白的错误表达也能影响对顺铂的敏感度。因此，肿瘤 对顺铂耐药机制的复杂性，至今仍是研究和开发肿瘤耐药逆转剂的"瓶颈"问题。 目前，尽管一些化合物显示了对肿瘤耐药的逆转作用，但这些化合物的毒副作用 限制了其临床的应用。天然药物由于毒副作用低，作为肿瘤耐药逆转剂具有高效低毒的优 势。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种不饱和内酯类成分与铂类化疗药物组合 物及其在制备治疗癌症药物中的应用。 不饱和内酯类成分存在多种植物药中如菊科植物土木香、川木香、灰毛川木香等。 专利技术人最近从土木香（Inula helenium L.)的根中分离出一系列不饱和内酯类化合物，一 些化合物在对细胞没有明显毒性的剂量下，与顺铂合用增加了顺铂对耐药细胞的敏感性， 这个发现对克服肿瘤对铂类化疗药物耐药具有重大的意义。 专利技术人从土木香中分离出的不饱和内酯内化合物与以下结构类似，具有增加顺铂 对耐药细胞敏感性的作用。 &、1?2及1?3选自氢原子、羟基、酰氧基、烷氧基、卤素、氨基、酰氨基；(： 2、(：3、(：4、(：5、(：6、 C7、Cs、C9、C1Q、Q之间的链接形式为单键或双键或环氧键；C 4、c15之间及c 1Q、c14之间的链接 形式为单键或双键或环氧键。之间为单键或断裂形式；(^与匕之间为断裂形式或单 键链接。 本专利技术提供的组合物，包括通式（1)所示的不饱和内酯类成分与铂类化疗药物， 其中不饱和内酯类成分与铂类化疗药物摩尔浓度比例为10:1~1:50。 所述的铂类化疗药物为顺铂、卡铂或奥沙利铂。 本专利技术所述的药物组合物，还包括任选的药学上可用的稀释剂、载体、赋形剂、辅 料或媒介物混合。 本专利技术的药物组合物，优选地，当通式（I )中R1、R2及R3为氢原子，（：5与(：6之 间为双键时，通式（I )所代表的化合物为土木香内酯； 当通式（I )中&、私及R3为氢原子，(：4与C 15之间为双键时，通式（I )所代表 的化合物为异土木香内酯。 本专利技术还提供所述药物组合物在制备抑制肿瘤生长的药物中的用途。优选地，所 述肿瘤为卵巢癌、肝癌、胃癌、子宫癌、肺癌、结肠直肠癌、胰腺癌、肾癌、食道癌、皮肤癌、前 列腺癌或血癌。【附图说明】 图1. 土木香内酯及异土木香内酯与顺铂合用对卵巢癌细胞生长的抑制作用。 图2. Hoechst染色检测土木香内酯及异土木香内酯与顺铂合用诱导卵巢癌细胞 凋亡的作用。 图3. 土木香内酯及异土木香内酯与顺铂合用对肝癌细胞生长的抑制作用。【具体实施方式】 以下将通过具体的实施例说明本专利技术，但是这些具体的实施例不应当理解为对本 专利技术的限制，土木香内酯及异土木香内酯为专利技术人获得的几个实例，与这些化合物具有类 似结构的通式化合物（I)与顺铂联用也具有协同作用。 实施例1 : 土木香药材粉碎后，用95%乙醇提取3次，回收乙醇，所得浸膏加适量水混悬后， 用石油醚萃取5次，回收石油醚，获得石油醚萃取物。 柱色谱分离：石油醚萃取物经硅胶柱色谱分离，用石油醚-醋酸乙酯洗脱纯化，获 得土木香内酯及异土木香内酯。 实施例2 : 化合物土木香内酯及异土木香内酯与顺铂合用对卵巢癌细胞生长的抑制作用。 取对数生长期的0VCAR-3细胞，加入96孔板，每孔9X 103个细胞，培养24小 时后，将土木香内酯及异土木香内酯与不同浓度顺铂联用，作用24h后，每孔加入20 μ L MTT (5mg/mL)溶液，继续培养4h，去上清，每孔加入100 μ L DMS0,用酶标仪在570nm测定0D 值。土木香内酯及异土木香内酯与顺铂（30 μΜ)联用的协同效果见图1。 实施例3 : 土木香内酯及异土木香内酯与顺铂合用诱导卵巢癌细胞凋亡的作用。 取对数生长期的0VCAR-3细胞，加入6孔板，待细胞生长密度为70 %，加入药物处 理24h，移去培养基，用PBS小心润洗孔中的贴壁细胞2次，将残余培养基洗净，并尽量不损 失贴壁细胞。润洗完成后，置于超净工作台中自然晾干。加入新鲜配制的细胞固定液（甲 醇：冰乙酸=3 :l(v/v))，每孔加500 yL，常温放置lOmin后，移去固定液，自然晾干。加入 新鲜配制的Hoechst染色液（5 μ g/mL)进行染色，每孔加300 μ L，避光染色45min后，移去 Hoechst染色液，用PBS洗去残余的染色液，避光，自然瞭干。置于焚光倒置显微镜下，以 340nm紫外光激发，观察细胞核形态变化，并拍照记录。细胞核染色质聚集或形成凋亡小体。 结果见图2。从图3中可以看出，土木香内酯及异土木香内酯与顺铂合用后，凋亡细胞明显 增多。 实施例4 : 土木香内酯及异土木香内酯与顺铂合用对肝癌细胞形态的影响。 取对数生长期的人肝癌细胞SK-HEP-1加入96孔板，每孔5X 103个细胞，培养 24小时后，以0. 5% DMS0处理细胞为对照，以土木香内酯、异土木香内酯、不同浓度顺铂以 及联合作用细胞24h，每孔加入20 μ L MTT (5mg/mL)溶液，继续培养4h，去上清，每孔加入 100yL DMS0,用酶标仪在570nm测定0D值。化合物与顺铂（20μΜ)合用的协同效果见图 3〇【主权项】1. 一种药物组合物，包括下式所示的不饱和内酯类化合物与铂类化疗药物，其中不饱 和内酯类化合物与铂类化疗药物摩尔浓度比例为10:1~1:50，札、私及R3分别选自氢原子、羟基、酰氧基、烷氧基、卤素、氨基、酰氨基；C2、C3、C4、C5、C6、C7、Cs、C9、C1Q、Q之间的链接形式为单键或双键或环氧键；C4、C15之间及C1Q、C14之间的链接 形式为单键或双键或环氧键。之间为单键或断裂形式；(^与匕之间为断裂形式或单 键链接。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的铂类化疗药物为顺铂、卡铂 或奥沙利铂。3. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，还包括任选的药学上可用的稀释 剂、载体、赋形剂、辅料或媒介物。4. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述不饱和内酯类化合物为土木 香内酯。5. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述不饱和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，包括下式所示的不饱和内酯类化合物与铂类化疗药物，其中不饱和内酯类化合物与铂类化疗药物摩尔浓度比例为10:1～1:50，R1、R2及R3分别选自氢原子、羟基、酰氧基、烷氧基、卤素、氨基、酰氨基；C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C1之间的链接形式为单键或双键或环氧键；C4、C15之间及C10、C14之间的链接形式为单键或双键或环氧键；C5与C10之间为单键或断裂形式；C1与C5之间为断裂形式或单键链接。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：余建清，雷嘉川，李洁，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42