颅内动脉瘤诊治标志物制造技术

本发明专利技术公开了CXCL16基因可以作为颅内动脉瘤诊断的分子标志物，本发明专利技术的实验证明：与正常人相比，CXCL16基因在颅内动脉瘤患者中表达量高。本发明专利技术还公开了CXCL16基因可以用于制备治疗颅内动脉瘤的药物，细胞凋亡实验证明CXCL16基因过表达能促进血管平滑肌细胞凋亡。本发明专利技术的研究成果提供了一种新的颅内动脉瘤临床诊断方法，同时提供了一种治疗颅内动脉瘤的药物新靶标。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地涉及人CXCL16基因在颅内动脉瘤的诊断、治疗 中的用途。
技术介绍
颅内动脉瘤是指脑动脉内腔的局限性异常扩大造成动脉壁的一种瘤状突出。颅内 动脉瘤多因脑动脉管壁局部的先天性缺陷和腔内压力增高的基础上引起囊性膨出，是造成 蛛网膜下腔出血的首位病因。过去人们称之为先天性脑动脉瘤，事实上先天性脑动脉瘤占 脑动脉瘤的70 %~80%。 目前用于颅内动脉瘤的诊断方法包括以下几类：（1)头部CT是诊断SAH的首选方 法，头颅MRI(核磁共振成像）是有压迫症状或无症状患者首先检查的方法。CT血管造影 (CTA)和磁共振血管造影（MRA)，可初步筛选动脉瘤；（2)脑血管造影（DSA):是诊断动脉瘤 的金标准，可动态以及三维重建了解动脉瘤，是决策治疗方案的主要依据；（3)磁共振成像 MRA或磁共振血管造影DSA:是无创性的检查方法，可诊断未破裂的动脉瘤。 一般的诊断步骤为：首先进行CT检查判断脑部是否有出血的情况，确认脑部有出 血情形，应争取在许可范围内尽早进行CTA、MRA或DSA检查，其中DSA检查是必须的，因为 DSA检查目前是诊断动脉瘤的金标准，是最确切的诊断方法。但是上述诊断方法在颅内动脉 瘤发生早期并不适用，因此寻找一种在颅内动脉瘤早期即可判断出疾病存在与否的方法是 亟待解决的问题。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种可用于颅内动脉瘤早期诊 断的分子标志物。相比传统的颅内动脉瘤的诊断方法，使用基因标志物来诊断颅内动脉瘤 的具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者在疾病早期就能知晓疾病风险，针对风险高 低，采取相应的预防和治疗措施。 为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案： 本专利技术提供了检测CXCL16基因表达的产品在制备诊断颅内动脉瘤的工具中的应 用。 进一步，所述检测CXCL16基因表达的产品包括检测CXCL16基因mRNA水平的产 品、和/或检测CXCL16蛋白水平的产品。 进一步，所述检测CXCL16基因表达的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫 检测、原位杂交或芯片检测CXCL16基因表达以诊断颅内动脉瘤的产品。 进一步，所述用RT-PCR诊断颅内动脉瘤的产品至少包括一对特异扩增CXCL16基 因的引物；所述用实时定量PCR诊断颅内动脉瘤的产品至少包括一对特异扩增CXCL16基因 的引物；所述用免疫检测诊断颅内动脉瘤的产品包括：与CXCL16蛋白特异性结合的抗体； 所述用原位杂交诊断颅内动脉瘤的产品包括：与CXCL16基因的核酸序列杂交的探针；所述 用芯片诊断颅内动脉瘤的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与CXCL16 蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与CXCL16基因的核酸序列杂交的探针。 所述用实时定量PCR诊断颅内动脉瘤的产品至少包括的一对特异扩增CXCL16基 因的引物如SEQIDN0. 3和SEQIDN0. 4所示。 所述检测CXCL16基因表达的产品可以是检测CXCL16基因表达的试剂、也可以是 包含所述试剂的试剂盒、芯片、试纸等，也可以是使用所述试剂的高通量测序平台。 所述诊断颅内动脉瘤的工具包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平 台；高通量测序平台是一种特殊的诊断颅内动脉瘤的工具，随着高通量测序技术的发展，对 一个人的基因表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的基因 表达谱，容易分析出哪个基因的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知CXCL16基因 的异常与颅内动脉瘤相关也属于CXCL16基因的用途，同样在本专利技术的保护范围之内。 本专利技术还提供了一种诊断颅内动脉瘤的工具，所述工具包括检测CXCL16基因表 达的试剂；所述试剂包括检测CXCL16基因mRNA的引物和/或探针、和/或检测CXCL16蛋 白的抗体。 所述工具包括但不限于芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。 其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固 定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测CXCL16基因转录水平的 针对CXCL16基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体 的CXCL16蛋白的特异性抗体；所述基因芯片可用于检测包括CXCL16基因在内的多个基 因（例如，与颅内动脉瘤相关的多个基因）的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括 CXCL16蛋白在内的多个蛋白质（例如与颅内动脉瘤相关的多个蛋白质）的表达水平。通过 将多个与颅内动脉瘤的标志物同时检测，可大大提高颅内动脉瘤诊断的准确率。 其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试 剂盒包括用于检测CXCL16基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括CXCL16蛋 白的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或 芯片方法检测CXCL16基因表达水平过程中所需的试剂。优选度，所述试剂包括针对CXCL16 基因的引物和/或探针。根据CXCL16基因的核苷酸序列信息容易设计出可以用于检测 CXCL16基因表达水平的引物和探针。 所述试纸包括检测CXCL16基因表达的试剂。 所述高通量测序平台包括检测CXCL16基因表达的试剂。 与CXCL16基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或 其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结 合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述 探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针 长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最 长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探 针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。 进一步，所述CXCL16蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述 CXCL16蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰（例如，，嵌合抗 体、80?￥、？&13、？(313'）2、？￥等。只要所述片段能够保留与0乂〇^16蛋白的结合能力即可。用 于蛋白质水平的抗体的制备时本领域技术人员公知的，并且本专利技术可以使用任何方法来制 备所述抗体。 在本专利技术的具体实施方案中，所述检测CXCL16基因mRNA的引物包括SEQIDN0. 3 和SEQIDNO. 4所示的引物对。 本专利技术还提供了CXCL16基因和/或其表达产物的抑制剂在制备治疗颅内动脉瘤 的药物中的应用。所述抑制剂包括抑制CXCL16基因表达的试剂、和/或抑制CXCL16基因 表达产物的试剂。 进一步，所述抑制CXCL16基因表达的试剂包括抑制基因转录的试剂、抑制基因翻 译的试剂；所述抑制CXCL16基因表达产物的试剂包括抑制CXCL16基因mRNA的试剂、抑制 CXCL16蛋白的试剂。所述抑制CXCL16基因mRNA的试剂包括抑制mRNA稳定性的试剂、抑制 mRNA翻译活性的试剂。所述抑制CXCL16蛋白的试本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测CXCL16基因表达的产品在制备诊断颅内动脉瘤的工具中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，肖枫，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11