一种高成活率的棉花嫁接方法技术

本发明专利技术公开了一种棉花幼苗下胚轴中间砧木嫁接方法。它采用具有一片真叶的棉花幼苗作为砧木，把另一株苗龄小于砧木的棉苗作为中间砧木嫁接在砧木苗上，在成活后再取一株苗龄小于中间砧木的棉苗作为接穗嫁接在中间砧木上，使嫁接后的棉苗具有三个完整下胚轴。本发明专利技术的下胚轴中间砧木嫁接方法操作简单，采用二次嫁接成活率高，保持了下胚轴作为中间砧木的完整性。可用于棉花等作物开展下胚轴功能方面的研究，具有重要的研究和应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，具体为通过棉苗的二次嫁接，并优化 其中的操作细节，实现具有较高成活率的中间砧木嫁接方法。
技术介绍
目前，转基因棉花再生株嫁接方法采用的是传统的扦插法，选择转基因棉花棉苗 作为接穗株，非转基因棉花棉苗作为砧木株；包括如下步骤：（1)棉苗的准备：切去接穗株 根部，下胚轴底部削成切口为倒"V"字型；未木质化的砧木株切去主茎顶部，余下的茎部顶 端削成切口为"V"字型；（2)嫁接：接穗株与砧木株的切口密切结合，用塑料细绳或其它细 绳包扎固定结合处，采用容器或塑膜（保湿材料）包裹嫁接苗，完成嫁接；(3)嫁接后的培 养：将嫁接苗移入网室或温室阴凉处，7天后，逐步放风去湿，去掉容器或塑膜。嫁接苗成活 后去除细绳即可。嫁接苗移到见光处逐步培养生长、成蕾、开花、结铃、吐絮。 但这种常用的方法存在较大的问题，主要集中在：由于砧木株为未木质化的砧木 株，砧木株成长时间较短，砧木株下胚轴部分较嫩，用保湿材料将嫁接苗包裹几天，砧木株 下胚轴与土壤接触部分的韧皮部较易腐烂，嫁接苗死亡，导致嫁接苗的成活率低。这一缺陷 在高温高湿的夏季尤其突出，严重影响了这种方法在实际中的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是对下胚轴作为中间砧木嫁接方法进行优化，提供一种适合包括棉 花在内的植物的简便、成活率高的嫁接方法。该方法使嫁接植株具有三个下胚轴，成活成功 率在95%以上，适合大田种植，尤其适合实际农业生产。 本专利技术所述的高成活率的棉花嫁接方法，其特征是，采用具有棉花幼苗作为砧木， 所述砧木长出第一片真叶后去掉真叶保留子叶，选取苗龄比所述砧木小的棉花幼苗作为中 间砧木进行第一次嫁接；待嫁接完全成活后，所述中间砧木长出第一片真叶，选取比所述中 间砧木苗龄小的棉花幼苗作为接穗，进行第二次嫁接；嫁接后的棉苗具有三个完整的下胚 轴。 所述棉花幼苗的制作方法包括：将棉花种子播种于湿润的沙床中，置于室温中发 芽出苗，棉苗子叶展开后，选根系完整、长势一致的健壮棉苗移到培养液中形成砧木；移苗 当天播种棉花种子于湿润沙床中，置于室温中发芽出苗，保持沙床湿润，形成中间砧木；待 所述砧木和中间砧木棉苗嫁接完全成活后，播种棉花种子于湿润沙床中，置于室温中发芽 出苗，保持沙床湿润，形成接穗。 所述第一次嫁接的方法包括：去掉所述砧木的第一片真叶，沿茎中部自上而下切 长约1. 5~2. Ocm的切口，再用双面刀片将所述中间砧木子叶节下1. 5~2. Ocm处切成楔 形，垂直插入所述砧木茎中部的切口中，然后用石蜡封口膜包裹固定，嫁接结束后将嫁接苗 置于带小孔的保鲜袋内，放在光强为70~IOOymol cm2s \昼夜温度3042°C /22±2°C，相 对湿度为70 %~80%，的条件下缓苗，5天后揭掉所述保鲜袋，7天后移至600 μ mol cm 2S 1 光强下培养，待所述中间砧木第一片真叶长出时，进行所述第二次嫁接； 所述第二次嫁接方法与所述第一次嫁接的方法相同。 所述嫁接方法，优选的，在进行二次嫁接时，待一次嫁接完全成活后，第一片真叶 长出，开始进行二次嫁接，保证较高的成活率。 所述嫁接方法的成活率较单独取一段下胚轴进行嫁接的方法相比，成活率提高了 2. 3 倍。 本专利技术的中间砧木嫁接方法与其他方法相比具有以下优点： (1)嫁接植株具有三个完整的下胚轴，接穗、中间砧木和砧木三部分苗龄相近，使 棉株具有完整性，便于后期不同条件处理和研究。 (2)操作简单，成活率高，成活成功率在95%以上，适用于对棉苗下胚轴应用基础 研究，也适合大田种植，尤其适合实际农业生产。【附图说明】 图1是利用本专利技术的嫁接方法得到的嫁接棉苗结构示意图。 图2是对比试验中间砧木劈接方法的实验示意图。 图3是对比试验中间砧木劈接倒接方法的实验示意图。 其中，1为站木，2为中间站木，3为接穗【具体实施方式】 实施例1 播种前选饱满的棉花种子，用9%的双氧水消毒15~20分钟，流水清洗数遍后用 去离子水浸泡12小时，露白后播种于沙床，3天后剥掉种壳。幼苗继续在沙床上生长到子叶 展开，选根系完整、长势一致的健壮棉苗转移至培养液中培养作为砧木1，用气栗为培养液 进行24小时通气。在砧木1移苗前一天浸泡作为中间砧木2的棉花种子，浸种方法与所述 砧木1相同，于砧木1移苗当天播种于沙床，3天后剥掉种壳。幼苗继续生长在沙床中直到 砧木1长出第一片真叶，开始第一次嫁接。嫁接前更新培养液。 优选地，所述砧木1选用的棉花种子为品种是中棉所41号。优选地，所述中间砧 木2选用的棉花种子为品种是鲁棉研22号。 去掉砧木1的第一片真叶，沿茎中部自上而下切长约1.5~2. Ocm的切口，再用双 面刀片将沙床里中间砧木2子叶节下1. 5~2. Ocm处切成楔形，垂直插入砧木1茎中部的 切口中，然后用石蜡封口膜包裹固定。嫁接结束后将嫁接苗置于带小孔的保鲜袋内，放在光 强为70~100 μ mol cm2s \昼夜温度30 ±2°C /22 ±2°C，相对湿度为70 %~80 %的条件 下缓苗，5天后揭掉保鲜袋，7天后移至600 μ mol cm 2S 1光强下培养。 第一次嫁接成活后，即嫁接后7天，浸泡作为接穗3的棉花种子，所述棉花种子优 选为品种是中棉所41的棉花种子，浸种、播种方法和幼苗培养条件同中间砧木2。 待中间砧木2长出第一片真叶时，开始第二次嫁接，嫁接方法和缓苗条件与第一 次嫁接相同。 第二次嫁接成活后，将嫁接棉苗放入装有培养液或育苗基质的育苗钵中，正常光 照培养。嫁接后的培养：将嫁接苗移入网室阴凉处，7天后，逐步放风去湿，去掉塑料膜。嫁 接完成的转基因棉当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高成活率的棉花嫁接方法，其特征是，采用具有棉花幼苗作为砧木，所述砧木长出第一片真叶后去掉真叶保留子叶，选取苗龄比所述砧木小的棉花幼苗作为中间砧木进行第一次嫁接；待嫁接完全成活后，所述中间砧木长出第一片真叶，选取比所述中间砧木苗龄小的棉花幼苗作为接穗，进行第二次嫁接；嫁接后的棉苗具有三个完整的下胚轴。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王晔，田晓莉，侯玉茹，潘金豹，
申请(专利权)人：北京农学院，
类型：发明
国别省市：北京;11