一种巨大口蘑菌株及其试管菌种与制备方法技术

本发明专利技术公开了一种巨大口蘑菌株及其试管菌种与制备方法，所述的巨大口蘑菌株为巨大口蘑M-001#菌株，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2015年8月21日，保藏编号：CGMCC No.11205；所述的巨大口蘑M-001#的试管菌种是以所述巨大口蘑菌株M-001#经斜面培养后制成的试管菌种。所述的巨大口蘑M-001#的试管菌种的制备方法是将巨大口蘑菌株M-001#的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，在温度为20~28℃下培养7~14d，得试管菌种。本发明专利技术的有益效果是：将巨大口蘑的菌种进行人工驯化培养，并筛选出生长迅速，污染率低的优良菌种。为巨大口蘑人工栽培提供了菌种保障，人工栽培的成功也将促进野生资源保护。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物
，具体涉及一种巨大口蘑菌株及其试管菌种与制备方法。
技术介绍
巨大口蘑[Macrocybelobayensis(R.Heim)Pegler&Lodge]主要分布在云南的玉溪和普洱的热带地区，通常发生于6、7月份，是体型巨大，肉质肥厚，可食用的大型真菌，有着很好的经济效益。但是野外产量不极为稳定，发现的时候通常是一大丛簇生在一起，有时受自然条件因素影响，不会发生，严重影响该菌的商业化。因此研究该菌的人工驯化生产栽培技术，提高产量速进生产发展是关键。
技术实现思路
本专利技术第一目的在于提供一种巨大口蘑菌株，第二目的在于提供一种巨大口蘑M-001#的试管菌种，第三目的在于提供所述巨大口蘑M-001#的试管菌种的制备方法。本专利技术第一目的是这样实现的，所述的巨大口蘑菌株为巨大口蘑M-001#菌株，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2015年8月21日，保藏编号：CGMCCNo.11205；所述巨大口蘑M-001#菌株属于真菌界、担子菌门、伞菌纲、伞菌目、口蘑科、巨大口蘑属。巨大口蘑M-001#菌株的获得与鉴定1、将采集的巨大口蘑子实体菌柄和菌盖交接处组织块接种到试管琼脂培养基斜面上，于20~28℃下培养7~14d，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好且菌核生成能力强的菌株，获得巨大口蘑分离试管种，所述的试管琼脂培养基的配方：土豆16.12%，葡萄糖1.61%，琼脂1.61%，KH2PO40.04%，MgSO40.02%，所述的百分数是质量分数。2、将巨大口蘑分离试管种菌丝体接种到平板培养皿上进行菌种纯化，培养条件为20~26℃下避光，所述的琼脂培养基的配方：土豆16.12%，葡萄糖1.61%，琼脂1.61%，KH2PO40.04%，MgSO40.02%；所述的百分数是质量分数；2d后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，所述的培养基配方：土豆16.12%，葡萄糖1.61%，琼脂1.61%，KH2PO40.04%，MgSO40.02%；所述的百分数是质量分数；于20~26℃下培养7~14d，获得巨大口蘑纯化试管种。3、采用供试子实体与对应菌丝分离物，分别按CTAB方法提取巨大口蘑基因组DNA，进行PCR扩增及ITS序列测定，将所测得试验样品的ITS序列提交NCBI数据库进行BLAST序列比对分析，与NCBI中的巨大口蘑(M.lobayensis)序列Identities=580/583(99%)，Gaps=1/583(0%)，分析确定分离得到的纯培养物为本专利技术所述的巨大口蘑（M.lobayensis）菌丝体。本专利技术的有益效果是：将巨大口蘑的菌种进行人工驯化培养，并筛选出生长迅速，污染率低的优良菌种。为巨大口蘑人工栽培提供了菌种保障，人工栽培的成功也将促进野生资源保护。本专利技术所提供的巨大口蘑M-001#菌株保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2015年08月21日；保藏登记入册的编号CGMCCNO.11205。本专利技术第二目的是这样实现的，是以所述巨大口蘑菌株M-001#经斜面培养后制成的试管菌种。本专利技术的第三目的是这样实现的，是将巨大口蘑菌株M-001#的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，在温度为20~28℃下培养7~14d，得试管菌种。本专利技术的有益效果是：将巨大口蘑的菌种进行人工驯化培养，并筛选出生长迅速，污染率低的优良菌种。为巨大口蘑人工栽培提供了菌种保障，人工栽培的成功也将促进野生资源保护。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或改进，均落入本专利技术的保护范围。本专利技术所述的巨大口蘑菌株为巨大口蘑M-001#菌株，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2015年8月21日，保藏编号：CGMCCNo.11205；所述巨大口蘑M-001#菌株属于真菌界、担子菌门、伞菌纲、伞菌目、口蘑科、巨大口蘑属。本专利技术所述的巨大口蘑M-001#的试管菌种，是以所述巨大口蘑菌株M-001#经斜面培养后制成的试管菌种。本专利技术所述的巨大口蘑M-001#的试管菌种的制备方法，是将巨大口蘑菌株M-001#的菌丝体接种到试管琼脂培养基斜面上，在温度为20~28℃下培养7~14d，得试管菌种。所述的试管琼脂培养基为改良PDA培养基，其成分为：土豆15~17g，葡萄糖1.5~1.7g，KH2PO40.02~0.06g，琼脂1.5~1.7g，MgSO40.01~0.03g，其余为水，pH值为7.0。下面通过实施例加以说明：下述实施例中使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。以下实施例野生巨大口蘑在云南省玉溪市易门县樟木箐采集；采集方法为徒手采集，采集时候注意保持子实体完整、无霉变、无病虫害。实施例11.1巨大口蘑M-001#的获得⑴将采集的野生巨大口蘑子实体切成块即组织块，将组织块接种到菌种分离纯化培养基斜面上，于20℃下培养12d，对分离培养的试管每天观察记录，及时剔除已污染的试管，挑选出无污染、长势良好的菌株，获得巨大口蘑分离试管种；所述的菌种分离纯化培养基的配方为：⑵将巨大口蘑分离试管种菌丝块接种到琼脂培养基的平板培养皿上进行菌种纯化，培养条件为20-26℃避光，所述的琼脂培养基的配方：土豆16.12g，葡萄糖1.61g，琼脂1.61g，KH2PO40.04g，MgSO40.02g，蒸馏水100ml，pH值7.0；2d后取尖端菌丝块接种在培养基斜面上，于20℃下培养7d，获得巨大口蘑纯化试管种即为获得的新的巨大口蘑菌株，所述的培养基配方法：土豆16.12g，葡萄糖1.61g，琼脂1.61g，KH2PO40.04g，MgSO40.02g，蒸馏水100ml，pH7.0。通过菌丝体产量、抗污染力等性状比对，挑选出菌丝体产量高、抗污染的巨大口蘑液体菌种专用菌株M-001#。1.2鉴定及其特征、命名、保藏⑴子实体特征M-001#分离用子实体特征为：高25~45cm。菌盖直径30~40cm，灰褐色；菌褶白色，较宽；菌柄长22~41cm，直径3~5.5cm，白色，基部稍膨大成杵状。担孢子4个，椭圆形，(6~7)μm×(7~9)μm。⑵巨大口蘑M-001#菌株纯化试管种特征接种后，在培养温度为22℃的条件下，18h就开始萌发，生长初期菌丝紧贴培养基，无色，有光泽，一般为较粗的不分支或分支较少的菌丝；第一天长速最快为0.3cm，最慢为0.1cm，而后随菌落的增大，有叉状或树枝状分支，一般较细，第三天生长最快，平均长速为0.8cm/d，第七天到第十四天长满整个培养皿。⑶ITS序列分析采用供试野生巨大口蘑子实体与实本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种巨大口蘑菌株，其特征在于所述的巨大口蘑菌株为巨大口蘑M‑001#菌株，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2015年8月21日，保藏编号：CGMCC No.11205；所述巨大口蘑M‑001#菌株属于真菌界、担子菌门、伞菌纲、伞菌目、口蘑科、巨大口蘑属。

【技术特征摘要】
1.一种巨大口蘑菌株，其特征在于所述的巨大口蘑菌株为巨大口蘑M-001#菌株，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2015年8月21日，保藏编号：CGMCCNo.11205；所述巨大口蘑M-001#菌株属于真菌界、担子菌门、伞菌纲、伞菌目、口蘑科、巨大口蘑属。
2.一种权利要求1所述的巨大口蘑M-001#的试管菌种，其特征在于是以所述巨大口蘑菌株M-001#经斜面培养后制成的试管菌种。
3.一种权利要求2所述的巨...

【专利技术属性】
技术研发人员：桂明英，桑兰，高观世，吴素蕊，郭相，杨珍福，
申请(专利权)人：中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所，
类型：发明
国别省市：云南;53