本实用新型专利技术公开一种在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪。包括一套高效液相色谱串联质谱仪，多个反应液以对应控制泵和紫外检测器。样品进入液相色谱仪经过分离后，经第一三通阀分流，一部分进入质谱进行结构鉴定等定性分析，一部分和泵控制输出的酶溶液和底物溶液在四通阀中预混，进入螺旋状的反应室，反应室流出的反应液和有泵控制输出的显色液在第二三通阀中混合后进入检测器。结构简单、组装方便、温度控制及时间控制性强、可直接在线检测化合物的活性，能够大大提高天然产物活性成分开发的效率。
【技术实现步骤摘要】
本技术涉及一种液相色谱-质谱联用仪，尤其是一种可以在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪。
技术介绍
天然产物资源具有巨大的经济价值和应用价值，许多天然产物中含有药用活性的化合物，天然化合物是药物发现的重要方向之一，目前许多仍在使用的药物和保健品都来源于天然产物的活性成份。天然产物研究对健康的重要性也得到越来越多的关注。但是，天然产物种类多样、成分复杂，对天然产物的分离纯化以及活性物质筛选一直是其研究的一个重要方向。液相色谱-质谱联用仪因其具有液相色谱很好的分离性能和质谱准确的定性功能，已成为现代分析常用且重要的分析仪器之一。也是目前天然产物分离纯化、结构鉴定的一个重要手段。但是对于天然产物等复杂成分中活性成分的筛选检测，一直是天然产物研究的重要方向，也是一个难题。传统的化合物活性评价，是经过繁琐的分离纯化和结构鉴定后，建立生物学活性测定模型进行活性评价。而天然产物等复杂成分含有几十个，甚至几百个化合物，需要耗费大量的人力、物力以及时间成本，才能完成对一种天然产物中多种化合物的活性评价工作。如果能够在天然产物等复杂成分分离的同时，实现在线的对其中化合物的活性检测和评价，就可以针对有活性的成分进行分离纯化和结构鉴定，可以大大降低传统天然产物活性成分开发的成本。
技术实现思路
本技术所要解决的技术问题是，提供一种在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪，可实现同时完成天然产物等复杂成分中活性化合物的分离、活性评价和结构鉴定。为了解决上述技术问题，本技术采用的技术方案是:一种在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪，包括一套由液相色谱栗、色谱柱和质谱仪组成的高效液相色谱串联质谱仪，在色谱柱和质谱仪之间的管路上增设第一三通阀，第一三通阀与一四通阀连接，四通阀的两个流路上分别连接有通过第一栗控制输出的反应液的第一储液罐和通过第二栗控制输出的第二储液罐，四通阀与一螺旋状的反应室相连，螺旋状的反应室的流出端连接在第二三通阀上，第二三通阀的一个流路上连接通过第三栗控制输出的第三储液罐，第二三通阀的另一个流路上连接紫外检测器。所述第一储液罐用于装酶溶液，第二储液罐用于装底物溶液，第三储液罐用于装显色、液。所述反应室的外侧设置有加热保温层。所述反应室是聚四氟乙烯材料或者不锈钢材料的螺旋通道。所述反应室的螺旋通道的长度为100-500cm，直径为0.05_lmm。本技术的有益效果是:结构简单、组装方便、温度控制及时间控制性强、重现性好、减少人工操作等优点，可直接在线检测化合物的活性，能够大大提高天然产物活性成分开发的效率。【附图说明】图1是本技术在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪的结构示意图。图2是实施例利用在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪对复杂成分检测得到的液相色谱图和活性图。【具体实施方式】下面结合附图和【具体实施方式】对本技术作进一步详细说明:如图1所示，本技术的在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪，包括一套由液相色谱栗1、色谱柱2和质谱仪4组成的高效液相色谱串联质谱仪，在色谱柱2和质谱仪4之间的管路上增设第一三通阀3，第一三通阀3与一四通阀9连接，四通阀9的两个流路上分别连接有通过第一栗6控制输出的反应液的第一储液罐5和通过第二栗8控制输出的第二储液罐7，四通阀9与一螺旋状的反应室10相连，螺旋状的反应室10的流出端连接在第二三通阀13上，第二三通阀13的一个流路上连接通过第三栗12控制输出的第三储液罐11，第二三通阀13的另一个流路上连接紫外检测器14。所述第一储液罐5用于装酶溶液，第二储液罐7用于装底物溶液，第三储液罐11用于装显色液。所述反应室10的外侧设置有加热保温层。所述反应室10是聚四氟乙烯材料或者不锈钢材料的螺旋通道。所述反应室10的螺旋通道的长度为100-500cm，直径为0.05_lmm。具体地说，样品进入液相色谱栗1、色谱柱2经过分离后，经第一三通阀3分流，一部分进入质谱仪4进行结构鉴定等定性分析，一部分和第一栗6控制输出的酶溶液及第二栗8控制输出的底物溶液在四通阀9中预混，进入螺旋状的反应室10，反应室流出的反应液和由第三栗12控制输出的显色液在第二三通阀13中混合后进入紫外检测器14。为了使液相色谱分离的流出液与酶溶液及底物溶液进行充分反应，能够保持温度恒定并且置于保温状态，所述的反应室10的外侧有加热保温层。所述反应室10是由聚四氟乙烯管或者不锈钢管组成的螺旋通道，以保证溶液的充分混合反应，可根据溶液在通道中的流速来控制衍生反应时间，通常，所述反应通室10的长度为100_500cm，直径为0.05_lmm。本技术所述栗1、6、8、12可控制样品溶液、酶溶液、底物溶液及显色液的吸取及流速；根据衍生反应时间的长短来设计反应通道(螺旋状的反应室9)的长度，材料可用聚四氟乙烯、不锈钢或其他材料。栗为液相色谱栗或恒流栗。例如，利用本技术在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪测定一复杂样品中各个化合物对α-淀粉酶的抑制活性。将液相色谱仪串联质谱仪开机，并将液相色谱仪流速设定为0.4mL/min，分别将控制α -淀粉酶溶液、底物0.1%淀粉溶液和显色液0.5%碘溶液的栗6、8、12流速设定为0.lmL/min、0.2mL/min、0.lmL/min ;将反应室温度设置为α -淀粉酶的最适反应温度37°C;使整套仪器处于平衡状态，平衡时间10-30min。待仪器平衡后，通过液相色谱仪对样品进行分离，不同组分化合物随时间长短在色谱柱2上洗脱下来，通过第一三通阀3分流分别进入质谱仪4和四通阀9，质谱仪4对进入质谱仪部分化合物进行结构鉴定，进入四通阀9部分与α-淀粉酶溶液、底物0.1%淀粉溶液混合，混合后进入由加热保温层和长度为200cm、内径0.1mm的聚四氟乙烯管组成的反应室10，通过对α -淀粉酶溶液、底物0.1%淀粉溶液在反应室中反应速度的影响，即剩余的淀粉溶液多少，来反映化合物对α -淀粉酶的抑制活性；反应后的反应液进入第二三通阀13和显色液0.5%碘溶液混合反应，通过设定为610nm的紫外检测器14来测定反应后剩余的淀粉的含量，紫外检测器信号越强，表明反应剩余的淀粉越多，即化合物对α-淀粉酶的抑制活性更强。从结果(图2)中可以看出:Α图为液相色谱分离后，质谱检测的总离子流图，可以看到该复杂样品中有五个化合物，Β图为液相色谱分流后，在线活性检测系统测定的活性图，从图中可以看出，化合物2、4处有较强的信号，表明化合物2、4对α -淀粉酶有较强的抑制活性，而化合物1、3、5对α -淀粉酶没有抑制活性，质谱对化合物2、4结构鉴定，确认化合物2、4分别为阿卡波糖和伏格列波糖。证明本在线活性检测的液相色谱质谱仪可以实现对复杂成分中化合物的活性的检测和结构鉴定。以上所述的实施例仅用于说明本技术的技术思想及特点，其目的在于使本领域内的技术人员能够理解本技术的内容并据以实施，不能仅以本实施例来限定本技术的专利范围，即凡本技术所揭示的精神所作的同等变化或修饰，仍落在本技术的专利范围内。【主权项】1.一种在线活性检测的液相色谱-质谱联用仪，包括一套由液相色谱栗(1)、色谱柱(2)和质谱仪(4)组成的高效液相色谱串联质谱仪，其特征在于，在色谱柱(2)和质谱仪(本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种在线活性检测的液相色谱‑质谱联用仪，包括一套由液相色谱泵(1)、色谱柱(2)和质谱仪(4)组成的高效液相色谱串联质谱仪，其特征在于，在色谱柱(2)和质谱仪(4)之间的管路上增设第一三通阀(3)，第一三通阀(3)与一四通阀(9)连接，四通阀(9)的两个流路上分别连接有通过第一泵(6)控制输出的反应液的第一储液罐(5)和通过第二泵(8)控制输出的第二储液罐(7)，四通阀(9)与一螺旋状的反应室(10)相连，螺旋状的反应室(10)的流出端连接在第二三通阀(13)上，第二三通阀(13)的一个流路上连接通过第三泵(12)控制输出的第三储液罐(11)，第二三通阀(13)的另一个流路上连接紫外检测器(14)。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王利强，娄婷婷，常春艳，葛含光，王永芳，
申请(专利权)人：天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心，
类型：新型
国别省市：天津;12
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