本发明专利技术公开了一株菲高效降解菌株Sphingobium sp.Phe-1及其应用。该菌株已于2015年8月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.11239，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。上述降解菌株Phe-1对菲等多环芳烃类化合物具有非常好的降解效果，在35℃、pH7.0条件下，48h内对100mg/L的菲的降解率达到100％，是一株菲的高效降解菌株，而且降解应用时的条件比较宽松，可在pH5～8、20～35℃条件下实现对200mg/L浓度以下的菲的降解，应用范围更广，适合用作污染场地修复菌株，对比其他降解菌具有很好的降解优势，应用前景好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于有机污染物降解菌
更具体地，涉及一株菲高效降解菌株Sphingobium sp.Phe_l 及其应用。
技术介绍
多环芳烃类化合物(PAHs)是环境中普遍存在的持久性有毒有机污染物。大量研究证实，多环芳烃具有慢性毒性和致癌、致畸、致突变的“三致”作用，引起各国环境科学工作者的广泛关注。菲(分子式C14H10)作为一种广泛分布于自然环境的三环芳烃，含有多环芳经中与“三致”关系密切的化学结构一K-reg1n和Bay-reg1n，因此成为多环芳经污染研究的模式化合物。对菲生物降解的研究，不仅有助于环境中菲污染的消除，还可帮助人们了解其它多环芳烃的降解机制及生物降解的可行性，为多环芳烃及石油污染环境的生物修复提供相应的理论依据和治理措施。微生物降解是一种环保稳定持续的治理方法，目前已发现的菲的降解菌有气单胞菌属 Aeroinones sp.，假单胞菌属 Pseuckmonss sp.，黄杆菌属 Flavobacterium sp.，鞘氨醇菌属印.等(Juhasz and Naidu, 2000)。如:一株鞘氨醇单胞菌Sphingosine sp.GY2B对10mg/L和60 mg/L初始浓度的菲，分别需要24和60 h降解完全(陶雪琴et al., 2007);另一株鞘氨醇单胞菌Sphingosine印.//在48 h内对50 mg/L菲的降解率为98% (雷欢，2008);还有其他菌属如戈登氏菌sp.)，分枝杆菌{Mycobacterium sp.)，固氮螺菌(如sp.)，在10d内对初始质量浓度为50 mg/L的菲的去除率为27.16 %?55.13 % (杨秀虹等，2009)。但是，这些微生物菌株对菲的降解效率，包括降解程度和降解时间还十分不足。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有菲等多环芳烃降解技术的缺陷和不足，目的是提供一株菲高效降解菌株sp.Phe-1及其应用。本专利技术上述目的通过以下技术方案实现: 一株菲高效降解菌株Sphingobium sp.Phe_l，于2015年8月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC N0.11239，保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。该菌株的单菌落呈黄色，菌落呈规则圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，在显微镜下细胞呈杆状，革兰氏染色呈阳性，易着色。—种菲高效降解剂，以上述菲高效降解菌株sp.Phe_l或其菌悬液为主要活性成分。上述菲高效降解菌株5/Λ Phe_l，或上述菲高效降解剂，在降解多环芳烃类化合物(PAHs )方面的应用也在本专利技术的保护范围之内。优选地，所述多环芳烃类化合物为菲。具体是指含有菲的溶液中的菲。更具体地，所述含有菲的溶液是指为菲污染液或菲污染土壤的水溶液。即本专利技术的降解菌株Phe-Ι可以实现任何被菲污染的介质的处理净化。更进一步优选地，所述菲在溶液中的浓度为200mg/L以下。即降解菌株Phe_l可很高效的实现对200mg/L浓度以下的菲的降解。具体优选地地，上述应用的条件为在pH 5?8、20?35°C条件下实现对菲的降解。更优选地，上述应用的条件为在pH 6?7、30?35°C条件下实现对菲的降解。最优选地，上述应用的条件为在pH 7、35°C条件下实现对菲的降解。作为一种优选的可实施方案，上述应用的具体方法为:按照1?5%的体积比，将降修.Sphingobium sp.Phe-1的菌悬液接种至含有菲的污染液体中。优选地，所述菌悬液中降解菌株sp.Phe-1的细胞个数为109/mL。优选地，菌悬液的接种体积比为1%。本专利技术从清远某炼油厂土壤中，通过富集培养和分离纯化的方式筛选出一株菲的高效降解菌，革兰氏染色呈阳性，经16S rRNA鉴定，该菌株隶属于鞘脂菌属(Sphingobium)，命名为Sphingobium sp.Phe_l，该菌株已于2015年8月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC N0.11239，保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。该菌株在温度为30°C的恒温培养箱中培养48h，能看到清晰的单菌落，开始时是淡黄色，慢慢变成黄色；菌落呈规则圆形，边缘整齐，表面光滑湿润。在显微镜下细胞呈杆状，革兰氏染色呈阳性，容易着色。本专利技术的降解菌株Phe-Ι在35°C、pH 7.0、菲浓度为100 mg/L的条件下，能获得较好的生长以及非常高的菲的降解率，在48 h能把100 mg/L的菲降解完全，说明降解菌株Phe-Ι是一株菲的高效降解菌株，适合用作污染场地修复菌株，对比其他降解菌具有很好的降解优势。本专利技术具有以下有益效果: 本专利技术首次筛选到了一株能够高校降解菲的菌株Sphingobium sp.Phe-1，该菌株对菲具有非常好的降解效果，在48 h能把100 mg/L的菲降解完全(降解率达100%)，是一株菲的高效降解菌株，适合用作污染场地修复菌株，对比其他降解菌具有很好的降解优势。同时，本专利技术的降解菌Phe-Ι在对菲的降解应用时，条件相对比较宽松，可在pH5?8、20?35°C条件下实现对200mg/L浓度以下的菲的降解，甚至可降解更高浓度的菲，应用范围更广。【附图说明】图1为降解菌株Sphingobium sp.Phe-1的菌落形态。图2为降解菌株Sphingobium sp.Phe-1的显微镜观察。图3 为降解菌株 Sphingobium sp.Phe-1 的 16S rRNA 电泳图谱。图4为降解菌株Sphingobium sp.Phe-1的系统发育树。图5为温度对降解菌株Phe-Ι生长量的影响。图6为pH对降解菌株Phe-Ι生长量的影响。图7为菲浓度对降解菌株Phe-Ι生长量的影响。图8为不同培养时间下菲浓度对降解菌株Phe-1生长量的影响。图9为降解菌株Phe-Ι的生长曲线。 图10为降解菌株Phe-Ι对菲的降解曲线。【具体实施方式】以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。以下实施例所用试剂如下: (1)无机盐液体培养基:将无机盐溶液中加入微量元素溶液1 mL/L，用高纯水定容至1000 mL，调节 pH 7.0，121°C 灭菌 30 min，备用。其中，无机盐溶液包括:(NH4)2S04 (分析纯)3 g/L，ΚΗ2Ρ04 (分析纯)0.5 g/L，Na2HP04(分析纯)0.5 g/L, MgS04 (分析纯)0.2609 g/L ； 微量元素溶液包括:FeCl3 (分析纯)0.3 g/L, FeS04 7H20 (分析纯)0.3 g/L, MnS04H20(分析纯)0.15 g/L, ZnS04 (分析纯)0.14 g/L, C0C12 (分析纯)0.2 g/L。(2)无机盐固体培养基:无机盐液体培养基中加入琼脂20 g/L，高压灭菌后取出倒置平板，凝结后备用。(3) LB液体培养基:蛋白胨(分析纯)10 g/L，酵母浸膏(分析纯)5 g/L, NaCl (分析纯)10 g/L。(4)LB固体培养基:LB本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株菲高效降解菌株Sphingobium sp.Phe‑1，其特征在于，于2015年8月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.11239，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王诗忠，蔡丹，杨秀虹，仇荣亮，晁元卿，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44
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