本发明专利技术提供了一种疫苗组合物，该疫苗组合物包括免疫量的猪伪狂犬病病毒株的减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、合成疫苗或基因工程疫苗。该疫苗组合物能有效诱发抗体产生，通过动物试验检测该疫苗免疫效果，证实能够预防猪伪狂犬强毒株的感染对猪产生有效的保护。
【技术实现步骤摘要】
【专利说明】-种猪伪狂犬病病毒、疫苗组合物及其制备方法和应用 本申请为专利申请2014102412792的分案申请，原申请的申请日为2014年5月28 日，专利技术创造名称为。
本专利技术设及一种疫苗组合物，属于动物病毒学领域。
技术介绍
伪狂犬病，又称Aujeszky氏病，是由瘤疹病毒科化erpesviridae)α亚科中的猪 瘤疹病毒I型（Suidhe巧esvirus1strain)所引起的猪、牛、羊等多种家畜、家禽和野生 动物的一种W发热、奇痒（除猪外）及脑脊髓炎为主症的急性传染病。猪的伪狂犬病在我国 广泛存在，危害严重，是制约规模化猪场生产的主要疫病之一。它能引起妊娠母猪流产、死 胎或木乃伊胎和仔猪出现神经症状、麻搏，死亡率高。PRV具有较强的泛嗜性、神经嗜性及潜 伏感染特性，在外周神经系统可W长期潜伏感染，当潜伏病毒被激活变成有感染力的病毒， 被潜伏感染的宿主就会发病。 研究表明亚单位疫苗能够给免疫动物提供相应的保护，亚单位疫苗是利用基因工 程方法将病原保护性抗原基因克隆到原核或真核表达系统中，使其高效表达而制成的疫 苗。目前发现伪狂犬病毒糖蛋白中的浊、gC、曲均能使机体产生中和抗体，运些抗体无论是 在体内、体外，还是在有无补体存在的情况下都有中和PRV的能力。"伪狂犬病亚单位疫苗 研究进展"（杨承槐，类高明，湛南辉《江西畜牧兽医杂志》2004年第3期）公开了在伪狂犬 病病毒目前已发现的11种糖蛋白中，浊、gC、曲均能诱导机体产生中和抗体。在没有补体 的参与下，浊、gC、曲的单克隆抗体能中和PRV。猪和小鼠注射抗浊、gC、曲的单克隆抗体 均能抵抗PRV强毒的攻击。因此，浊、gC、曲是研制PRV亚单位疫苗的首选蛋白。糖蛋白曲 是一种重要的中和抗原，也是保护性抗体的主要目标，能诱导较好的保护反应。US6858385 和US6521231公开了利用猪伪狂犬病病毒曲蛋白可W制备疫苗用于猪伪狂犬病的预防。 猪PRV只有一个血清型，通常认为毒株的交叉保护力很强，但目前仍存在仔猪注 射商品化疫苗后发生典型猪伪狂犬病，例如长时间体溫升高，精神沉郁，食欲减退，出现呼 吸道和/或神经症状。突出表现为任何年龄的猪都会感染，可在猪群水平传播，潜伏期短 (1~2天），发病率在10%~100%之间，发病猪死亡率在10%~100%之间（仔猪死亡率 可高达100% )，感染后可引起猪只高热（40~42°C，持续3日W上），呼吸困难，腹泻，喘， 咳嗽，打喷暧，后肢麻搏，犬坐，突然倒地，抽摇，侧邸不起，角弓反张，泳状划水，最后衰竭而 死，并可引起种公猪精液质量下降，怀孕母猪流产（高达35% )，早产，死胎，弱仔（弱仔14 日龄前全部死亡）等繁殖障碍症状。现有技术的疫苗免疫猪只后不能完全抵抗野毒攻击， 依然会出现高热，精神沉郁，食欲下降或废绝等症状，感染率超过80 %，发病率超过30 %， 死亡率在10%~20%之间。现有技术还没有疫苗能够解决针对猪伪狂犬变异株引起的伪 狂犬病。
技术实现思路
为解决现有技术的不足，本专利技术旨在提供一种猪伪狂犬病病毒株，该猪伪狂犬病 病毒株可用于制备疫苗，通过动物实验证明该疫苗对于猪伪狂犬病具有良好的免疫作用。 本专利技术提供了一种核巧酸序列，所述核巧酸序列实质上编码序列表SEQIDNO. 1 所示的蛋白。 本专利技术提供了一种核巧酸序列，所述核巧酸序列实质上编码序列表SEQIDNO. 2 所示的蛋白。 本专利技术提供了一种核巧酸序列，所述核巧酸序列实质上编码序列表SEQIDNO. 3 所示的蛋白。 "编码序列"在本申请中是指一种DNA序列，其能够被转录得到相应的RNA序列。 为解决现有技术的不足，本专利技术的主要目的是提供一种猪伪狂犬病病毒株，其中， 所述猪伪狂犬病病毒株具有序列表SEQIDNO. 4所示的核巧酸序列编码的曲糖蛋白。 本专利技术术语"曲糖蛋白"，是猪伪狂犬病病毒进行感染必需的结构蛋白，是成熟的 病毒粒子囊膜表面的主要糖蛋白之一，也称为甜50蛋白。 本专利技术术语"同源性"在本申请中是指两条氨基酸序列或两条核巧酸序列的相 似程度。氨基酸序列或核巧酸序列的同源性可W通过本领域公知的任何适当的方法计 算得到，例如，可W将目标氨基酸（或核巧酸）序列与参比氨基酸（或核巧酸）序列进行 序列比对，必要时可W引入空缺，使得两条比对的序列间相同的氨基酸（或核巧酸）数目 达到最优化，并在此基础上计算两条氨基酸（或核巧酸）序列之间相同氨基酸（或核巧 酸）的百分比。氨基酸（或核巧酸）序列的比对和同源性的计算可W通过本领域公知的 软件实现，例如，但不限于，BLAST软件（在美国国立生物技术信息中屯、（NCBI)的网址上 可获得：ht1:p://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi，或者见，例如，AltschulS.F.et al,J.Mol.Biol. , 215 :403-410 (1990)；StephenF.etal,NucleicAcidsRes. ,25： 3389-3402(1997))，ClustalW2软件（在欧洲生物信息研究所网址上可获得：http://丽w. eji.ac.uk/Toolsa/clustalw2/，另见，例女日，HigginsD.G.etal,MethodsinEnzymology, 266:383-402(1996);LarkinM.A.etal，Bioinformatics(Oxford,England) ,23(21): 2947-8(2007));和TCoffee软件等（在瑞典生物信息学研究所的网站上可W获得： http://tcoffee.vital-it.ch/cgi-bin/Tcoffee/tcoffee_cgi/index.cgi，另见，例女曰，Poirot0.etal,NucleicAcidsRes. ,31(13) :3503-6(2003)；NotredameC.etal,J.Mol. Boil.，302 (1) :205-17 (2000))。使用软件进行序列比对时，可W使用软件提供的默认参数， 或者也可W根据实际情况对软件提供的参数进行调整，运些都在本领域技术人员的知识范 围内。 优选地，所述猪伪狂犬病病毒株具有序列表SEQIDNO. 5所示的核巧酸序列编码 的浊糖蛋白。 优选地，所述的猪伪狂犬病病毒，它具有SEQIDNO. 2的氨基酸序列的浊糖蛋白。 优选地，根据本专利技术的所述猪伪狂犬病病毒，它具有SEQIDNO. 3的氨基酸序列的 gC糖蛋白。 优选地，所述猪伪狂犬病毒株为HN1201株（Pseudor油iesvirus,strainHN1201) 或其培养物，保藏号为CCTCCNO.V201311;保藏于中国典型培养物保藏中屯、；保藏地址为 中国武汉市?武汉大学，保藏日期为2013年5月20日。 所述术语"培养物"是病毒的不同代次传代培养物，本领域技术人员知晓不同代次 之间其基因序列仅可能会发生微小的变异，优选地，所述培养物是5-35代W内的培养物。 本专利技术的另一个目的是提供一种猪伪狂犬病病毒疫苗组合物，其中，所述疫苗组 合物包括免疫量的猪伪狂犬病病毒株的减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、合成疫苗或基 因工程疫苗。 优本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种核苷酸序列，所述核苷酸序列实质上编码序列表SEQ ID NO.1所示的蛋白。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：张许科，孙进忠，伍锐，谭菲菲，白朝勇，田克恭，
申请(专利权)人：普莱柯生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41
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