本实用新型专利技术提供了一种快速提取全血基因组DNA的装置,包括有一体化成型的毛细采集管、全血细胞裂解区、流体控制管,还包括有与所述流体控制管相配合的抽吸装置,所述全血细胞裂解区由聚丙烯丝束填充;本实用新型专利技术结合毛细玻璃管和聚丙烯丝束,巧妙地构造出能够快速提取全血基因组DNA的装置,实现了末梢血基因组DNA提取,本实用新型专利技术的装置操作简单、效率高,无需特殊仪器,实现了基于微流控芯片的全血基因组DNA“样品进-结果出”的目的,所提取的基因组DNA适合于分子诊断的测序、杂交、等温扩增等一系列实验。
【技术实现步骤摘要】
本技术涉及分子生物学领域,尤其涉及一种快速提取全血基因组DNA的装置。
技术介绍
核酸是以核苷酸为基本单位的重要生物分子,广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物及生物体内。不同的核酸,其化学组成、核苷酸排列顺序等不同。根据化学组成不同,核酸可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。核酸是一切生物细胞的基本成分,也对生物体的生长、发育、繁殖、遗传及变异等重大生命现象起主宰作用。核酸在实践应用方面有极重要的作用,现已发现许多遗传性疾病、肿瘤的发生、病毒的感染、射线对机体的作用等都与核酸有关。因此,对核酸结构、功能与调控的认识是人类在分子水平研究遗传、进化和疾病诊断的基础。目前,核酸研究已成为生命科学中的与多学科广泛交叉、渗透的研究热点及发展前沿。核酸抽提是许多临床、法医学应用及遗传学分析的前提,通过DNA或RNA的提取及纯化过程,消除或减小其他杂质(蛋白质、多糖及脂肪等)对核酸扩增反应的影响。传统的DNA提取方法是自1950年后相继发展起来的固相萃取法(Solid-Phase Extract1n,SPE)和液-液萃取法(酚氯仿法)。这些方法操作步骤繁琐,所使用的提取试剂具有毒害性,限制了其在临床上的推广应用。目前普遍使用的硅胶膜离心柱法,虽简化了操作步骤,但大片段DNA强力结合于膜上,难洗脱,导致离心过柱时DNA易断裂,影响下游实验包括测序、克隆、PCR、转化、微注射、转染和微阵列分析。静脉血为目前普遍用于全血基因组DNA提取的样本,静脉采血可能发生皮下出血或局部红肿、局部皮肤过敏反应、误穿刺入动脉及采血失败等并发症。此外,婴幼儿静脉采血难度比较大,因此,亟需开发一种快速、高效、适合于临床床旁检测的微量全血基因组的提取装置和方法。微流控芯片技术是指操作微小网络通道中流体的科学技术。与常规的实验技术相比,此技术极大降低了试剂的消耗量、降低成本同时产生极少的废液,而且在微流体通道中,传热、传质速度比常规体系快,反应时间或分析时间都大大缩短。目前,许多研究利用微流控技术实现了微量全血基因组DNA的提取,但都需特殊辅助设备,仍采用静脉血作为检测样本,不能实现末梢全血基因组DNA提取的POCTo
技术实现思路
本技术为解决现有技术中的上述问题提出的一种集末梢血采集,全血基因组核酸提取及纯化的装置和相应方法,实现微量全血基因组DNA的快速、高效提取。为实现上述目的,本技术采用以下技术方案:—种快速提取全血基因组DNA的装置,包括有一体化成型的毛细采集管、全血细胞裂解区、流体控制管,还包括有与所述流体控制管相配合的抽吸装置,所述全血细胞裂解区由聚丙烯丝束填充。为了进一步完善和优化上述的装置,本技术采取的技术措施还包括:优选地,上述毛细采集管、全血细胞裂解区以及流体控制管均为玻璃材料制作。优选地,上述抽吸装置为橡胶滴头,即胶头滴管的滴头。优选地,还包括能够密封毛细采集管的采集管封管器,以及能够密封流体控制管的控制管封管器。优选地,上述毛细采集管长2-6cm,管壁厚度为0.1-0.4mm,内径为0.5-0.7mm ;更优选地,上述毛细采集管长度为4cm,内径为0.5mm,外径为0.7mm,管壁厚度为0.1mm。优选地,上述流体控制管长l_3cm,管壁厚度为0.1-0.4mm,内径为1_1.2mm ;更优选地,上述流体控制管长2cm,内径为1mm,外径为1.2_,管壁厚度为0.1_。优选地,上述全血细胞裂解区管壁厚度为0.1-0.4_,容积为100-130 μ 1 ;更优选地,全血细胞裂解区为直径6mm的圆球形(以外壁计算),管壁厚度为0.2mm。聚丙烯丝束具有无毒、无味,耐热、化学性能好,不吸水,常见的酸、碱等有机溶剂对它几乎不起作用等特点。聚丙烯丝束具有多孔隙结构可作为滤材,广泛作为香烟中滤嘴,对烟气中焦油、烟碱(俗称尼古丁)、一氧化碳等物质进行吸附过滤。本技术将其与毛细玻璃管巧妙结合,利用特殊的构造使得本技术的装置能够满足床旁检测中快速提取全血基因组DNA的需求。本技术采用上述技术方案,与现有技术相比,具有如下技术效果:本技术结合毛细玻璃管和聚丙烯丝束,巧妙地构造出能够快速提取全血基因组DNA的装置,实现了末梢血基因组DNA提取,本技术的装置操作简单、效率高,无需特殊仪器,实现了基于微流控芯片的全血基因组DNA “样品进-结果出”的目的,所提取的基因组DNA适合于分子诊断的测序、杂交、等温扩增等一系列实验。【附图说明】图1为本技术的结构示意图;图2为琼脂糖凝胶电泳分析提取的基因组DNA结果图。【具体实施方式】下面结合附图对本技术的技术方案做进一步的详细说明。图1为本技术的一种快速提取全血基因组DNA的装置的结构示意图,其中的附图标记为毛细采集管1、全血细胞裂解区2、流体控制管3、抽吸装置4、采集管封管器5、控制管封管器6。本技术提供了一种快速提取全血基因组DNA的装置,包括有一体化成型的毛细采集管1、全血细胞裂解区2、流体控制管3,还包括有与所述流体控制管3相配合的抽吸装置4,所述全血细胞裂解区2由聚丙烯丝束填充。本技术的装置毛细管采用玻璃材质,经毛细管拉针器制作而成。在全血细胞裂解区2填充的聚丙烯丝束具有无毒、无味,耐热、化学性能好,不吸水,常见的酸、碱等有机溶剂对它几乎不起作用。聚丙烯丝束具有多孔隙结构可作为滤材,广泛作为香烟中滤嘴,对烟气中焦油、烟碱(俗称尼古丁)、一氧化碳等物质进行吸附过滤。本技术采用聚丙烯丝束结合毛细管提取末梢血基因组DNA,聚丙烯丝束表面具有多孔隙结构,其极高的孔密度和孔隙率的特点,在一定的条件下可高效吸附DNA。下面通过具体实施例对本技术进行详细和具体的介绍,以使更好的理解本技术,但是下述实施例并不限制本技术范围。实施例一操作人员采血员利用毛细采集管1刺入受试者皮肤采集当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种快速提取全血基因组DNA的装置,其特征在于,包括有一体化成型的毛细采集管(1)、全血细胞裂解区(2)、流体控制管(3),还包括有与所述流体控制管(3)相配合的抽吸装置(4),所述全血细胞裂解区(2)由聚丙烯丝束填充。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:关明,汪骅,
申请(专利权)人:复旦大学附属华山医院,
类型:新型
国别省市:上海;31
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