用作抗癌药物化合物的亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶抗体制造技术

一种抗癌药物化合物，包括亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶抗体。亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体。一种治疗癌症的方法，包括亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶抗体的使用。亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】用作抗癌药物化合物的亚精胺/精胺N1-乙酿基转移酶抗 体
技术介绍

本专利技术涉及亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶（SSAT)抗体作为抗癌药物化合物及 在抗癌治疗中的用途。 相关抟术说明 美国专利号6, 811，967,于2004年11月4日授予Sitar等人，其全部公开内容通 过引用合并于此。该专利公开了一种使用SSAT底物，通过检测乙酰化形式的SSAT底物来 测定酶SSAT活性的方法。本专利技术还公开了 SSAT活性和病理状况的相关性。 SSAT是一种在多胺代谢中重要的酶。多胺，包括亚精胺和精胺，是细胞存活必 需的，并且，SSAT是分解代射途径中的限速酶，SSAT将亚精胺和精胺转化成乙酰多胺以 维持细胞内多胺稳态。有报道称，在某些癌细胞系中检测到SSAT mRNA的高表达。比 如，参见Chen等人.第二亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶的基因组鉴定和生物化学特 性描述（Genomic identification and biochemical characterization of a second spermidine/spermine N^acetyltransferase).生物化学杂志（Biochemical Journal). (2003)，373卷，661-667,其全部公开内容通过引用合并于此。 还有报道称，SSAT的表达和酶活性可能在化疗或使用亚精胺类似物治疗后升高。 体外细胞系研究进一步将SSAT表达及酶活性与候选新药的细胞毒性水平正相关。一些抗 增殖试剂和多胺类似物已相应地被开发，通过SSAT诱导来阻止癌细胞增殖。比如，参见 Wallace, H.M.等人·多胺代谢前景（A perspective of polyamine metabolism).生物化 学杂志（Biochemical Journal). (2003)，376卷，1-14,其全部公开内容通过引用合并于此。
技术实现思路
本专利技术的一个目标是提供改进的抗癌试剂和抗癌治疗。 某些癌细胞具有细胞内亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶SSAT以乙酰化多胺，从而 平衡细胞内pH并分泌到细胞外。然而，某些水平的细胞内多胺可能是细胞毒性的。癌细胞 有更高水平的细胞内多胺。这些细胞内多胺的保留可能导致癌细胞死亡。相应地，提供一 种抗癌药物化合物，该抗癌药物化合物包括亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶抗体。还提供 了一种抗癌治疗的方法，该方法利用SSAT抗体来抑制SSAT对多胺的乙酰化，从而导致癌细 胞死亡。该抗体可以是单克隆或多克隆抗体。 【附图说明】 通过以下给出的【具体实施方式】的描述，仅以实施例的方式，并参照附图，本专利技术将 更容易理解，其中： 图1显示了在U2-0S、HeLa、Malme-3M、PC-3和HEK293人肿瘤细胞系中，通过 RT-qPCR测定的相对SSAT表达水平，以及通过N-乙酰亚精胺的形成测定的代谢活性； 图2也显示了在U2-0S、HeLa、Malme-3M、PC-3和HEK293人肿瘤细胞系中，通过 RT-qPCR测定的相对SSAT表达水平，以及通过N-乙酰亚精胺的形成测定的代谢活性； 图3显示了人肿瘤细胞系，1]2-05、他1^、]\&111116-31、？(：-3和冊1(293 在与22 4]\1到 550 μ Μ亚精胺孵育期间的融合相对百分率； 图4显示了针对肺上皮细胞癌细胞系Α549, SSAT多克隆抗体的细胞毒性，并以亚 精胺作为多胺阳性对照； 图5显示了针对前列腺腺癌细胞系LNCaP，SSAT多克隆抗体的细胞毒性，并以亚精 胺作为多胺阳性对照； 图6显示了针对乳腺上皮细胞癌细胞系T-47D，SSAT多克隆抗体的细胞毒性，并以 亚精胺作为多胺阳性对照； 图7显示了针对骨肉瘤细胞系U2-0S，SSAT多克隆抗体的细胞毒性，并以亚精胺作 为多胺阳性对照； 图8显示了针对肺上皮细胞癌细胞系A549, SSAT单克隆抗体和多胺阳性对照亚精 胺的细胞毒性； 图9显示了针对前列腺腺癌细胞系LNCaP，SSAT单克隆抗体和多胺阳性对照亚精 胺的细胞毒性； 图10显示了针对乳腺上皮细胞癌细胞系T-47D，SSAT单克隆抗体和多胺阳性对照 亚精胺的细胞毒性； 图11显示了针对骨肉瘤细胞系U2-0S，SSAT单克隆抗体和多胺阳性对照亚精胺的 细胞毒性； 图12显示了人细胞系中SSAT多克隆抗体的细胞毒性和SSAT表达水平的总结； 图13显示了人细胞系中SSAT单克隆抗体的细胞毒性和SSAT表达水平的总结； 图14显示了单克隆和多克隆SSAT抗体对不同肿瘤细胞系的毒性结果； 图15显示了在A549、LNCaP和T-47D细胞系中，SSAT表达相对于SSAT抗体的抗 肿瘤效力（IC5。）的相关性。 图16显示了使用GAPDH或hPRTl管家基因作为内标，人癌细胞系相对于A549的 SSAT表达水平；及 图17也显示了使用GAPDH或hPRTl管家基因作为内标，人癌细胞系相对于A549 的SSAT表达水平。 【具体实施方式】 本专利技术公开了一种使用亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶（SSAT)抗体作为抗癌药 物化合物的方法。 通过反转录定量聚合酶链反应实验（RT-qPCR实验），对人肿瘤细胞系，HEK-293、 Malme-3M、HeLa、PC-3和U2-0S细胞系中的相对SSAT表达水平进行检测，并且，如图1和2 所示，观察到Malme-3M具有最高的相对SSAT表达，当用GAPDH归一化时，比对照HEK-293 细胞系的相对SSAT表达高11倍，并且，当用HPRTl归一化时，高58倍。PC-3具有第二高的 表达水平，相对于HEK-293,当分别用GAPHD和HPRTl归一化时，有大约3倍和7倍的SSAT 表达差异。HeLa和U2-0S都具有比HEK-293更低的SSAT表达水平。还将SSAT表达水平与 N-乙酰化金刚烷胺代谢物形成进行对比，且其结果表明SSAT表达和N-乙酰化代谢活性间 有因果关系。 现参考图3,当人肿瘤细胞系在22 μ Μ到550 μ Μ亚精胺存在下孵育时，在SSAT非 表达细胞系（U2-0S和HeLa)中观察到最高的相对细胞活性，表达为融合百分率，及最低的 SSAT N-乙酰化活性。与此相反，在SSAT过表达细胞系（Malme-M3和PC-3)中观察到最低 的细胞活性。这个数据表明，人肿瘤细胞系中显著高的亚精胺的细胞毒性是通过SSAT过表 达肿瘤细胞中的SSAT的基于代谢的机制介导的。 材料 抗体 评估以下抗体针对人肿瘤细胞系的细胞毒性。 名称； SSAT抗体 克隆类型/抗原表位 兔多克隆的，C-端残基，N-端残基 纯度： 肽亲和纯化 供应商： _Ncmis: .Biological s., .IX.C 名称: SSAT抗体 克隆类型/抗原表位 鼠单克隆的 批次/批号： A003 到期日： 2013年9月14日 纯度： 肽亲和纯化 供应商： OriGene Technologies Inc. 阳丨生对照 在本研究中，使用SSAT的多胺底物亚精胺作为阳性对照测试药物。 名称 亚精胺 BRI 参H RFS-1085 纯度： 99.8% 批次/批号： 1441607当前第1页1&本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗癌药物化合物，包括亚精胺/精胺N1‑乙酰基转移酶抗体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：布莱恩·郑，纳斯德·卜克思，德瑞克·郑，
申请(专利权)人：百奥马克科技有限公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA