本发明专利技术涉及一种低聚龙胆糖酶法生产工艺。葡萄糖液的配制；过滤；转化工艺：糖液降温至55－65℃，搅拌加入β-葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100℃，保温灭酶5-10min；浓缩、结晶，回收葡萄糖：酶解液60-65℃浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5℃结晶，过滤；葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺；脱色；色谱分离；浓缩、喷雾干燥。优点是以葡萄糖为原料，利用高活性重组β-葡萄糖苷酶转糖苷和缩合得到低聚龙胆糖浆，低聚龙胆糖浓度为40-60g/L；利用色谱技术进行分离纯化产品纯度为70-75%，回收率为40-45%；低聚龙胆糖的转化率及纯度均达到国际领先水平。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及低聚糖生产领域，具体涉及一种低聚龙胆糖酶法生产工艺。
技术介绍
低聚龙胆糖是一类由葡萄糖以β_1，6糖苷键连接形成的新型功能性低聚糖，有优良的双歧杆菌增殖效果，可有效促进肠内益生菌的增殖，不被人体酶解，低热量；适合肥胖症、高血脂、高血压、糖尿病等人群食用；保湿性、吸湿性高，有利于食品中水分的保持，可防止淀粉类食品的老化，延长货架期；ρΗ和热稳定性高，适用于高温和特殊pH条件下保存的食品。在巧克力、冰淇凌、咖啡、调味品、烘烤食品和饮料中有广泛应用。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提出了一种低聚龙胆糖酶法生产工艺，工艺完善，采用经过分子改造的高产率和热稳定性β-葡萄糖苷酶对葡萄糖进行转化生产低聚龙胆糖；利用底物流加策略解决高浓度底物对酶反应的抑制，强化低聚龙胆糖的产率；结合结晶技术和色谱分离技术对低聚龙胆糖的分离纯化进行研究，以获得高纯度的低聚龙胆糖产品。为了达到上述专利技术目的，本专利技术提出了以下技术方案: 低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征在于以下步骤， 1)葡萄糖液的配制:在化糖罐中加入软水，升温至60-80°C，加入葡萄糖至50-70%w/v,搅拌，溶解后用10%盐酸调节PH4.5 ;过滤，打入酶解罐； 2)转化工艺:糖液降温至55— 65°C，搅拌加入β -葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100°C，保温灭酶5-10min ; 3)浓缩、结晶，回收葡萄糖:酶解液60-65°C浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5°C结晶，过滤；葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺； 4)脱色:滤液升温至65-75°C，加入1-5%活性炭，脱色30_60min;过滤； 5)色谱分离:滤液过阳离子树脂，分离温度50-60°C，以去离子水洗脱； 6)浓缩、喷雾干燥:洗脱液30-40°C浓缩至低聚龙胆糖浓度30-35%，喷雾干燥，得到粉末型低聚龙胆糖。所述的β -葡萄糖苷酶是高活性重组β -葡萄糖苷酶，酶活2500 U/mL。所述的葡萄糖符合GB/T20880-2007要求。本专利技术的优点是工艺完善，以葡萄糖为原料，利用高活性重组葡萄糖苷酶转糖苷和缩合得到低聚龙胆糖浆，低聚龙胆糖浓度为40_60g/L ;利用色谱技术进行分离纯化产品纯度为70-75%，回收率为40-45% ;低聚龙胆糖的转化率及纯度均达到国际领先水平。【附图说明】图1是本专利技术的工艺流程图。【具体实施方式】一、主要原辅材料: 1、重组β -葡萄糖苷酶:酶活2500 U/mLo2、葡萄糖:符合 GB/T20880-2007 要求。二、工艺要点: 1、葡萄糖液的配制: 在化糖罐中加入软水，升温至60-80°C，加入葡萄糖至50-70% (w/v),搅拌，溶解后用10%盐酸调节PH4.5。过滤，打入酶解罐。2、转化工艺: 糖液降温至55 — 65°C，搅拌加入β -葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100°C，保温灭酶5-10min。3、浓缩、结晶，回收葡萄糖: 酶解液60-65°C浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5°C结晶，过滤。葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺。4、脱色: 滤液升温至65-75°C，加入1-5%活性炭，脱色30-60min ;过滤。5、色谱分离: 滤液过阳离子树脂，分离温度50-60°C，以去离子水洗脱。6、浓缩、喷雾干燥: 洗脱液30-40°C浓缩至低聚龙胆糖浓度30-35%，喷雾干燥，得到粉末型低聚龙胆糖。【主权项】1.低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征在于以下步骤， 1)葡萄糖液的配制: 在化糖罐中加入软水，升温至60-80°C，加入葡萄糖至50-70% w/v,搅拌，溶解后用10%盐酸调节PH4.5 ;过滤，打入酶解罐； 2)转化工艺: 糖液降温至55 — 65°C，搅拌加入β -葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100°C，保温灭酶5-10min ; 3)浓缩、结晶，回收葡萄糖: 酶解液60-65°C浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5°C结晶，过滤；葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺； 4)脱色: 滤液升温至65-75°C，加入1-5%活性炭，脱色30-60min ;过滤； 5)色谱分离: 滤液过阳离子树脂，分离温度50-60°C，以去离子水洗脱； 6)浓缩、喷雾干燥: 洗脱液30-40°C浓缩至低聚龙胆糖浓度30-35%，喷雾干燥，得到粉末型低聚龙胆糖。2.根据权利要求1所述的低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征是所述的β-葡萄糖苷酶是高活性重组β -葡萄糖苷酶，酶活2500 U/mL。3.根据权利要求1所述的低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征是所述的葡萄糖符合GB/T20880-2007 要求。【专利摘要】本专利技术涉及一种低聚龙胆糖酶法生产工艺。葡萄糖液的配制；过滤；转化工艺：糖液降温至55－65℃，搅拌加入β-葡萄糖苷酶，酶用量为30-60U/g葡萄糖，保温酶解36-48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100℃，保温灭酶5-10min；浓缩、结晶，回收葡萄糖：酶解液60-65℃浓缩至葡萄糖浓度50-70%，0-5℃结晶，过滤；葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺；脱色；色谱分离；浓缩、喷雾干燥。优点是以葡萄糖为原料，利用高活性重组β-葡萄糖苷酶转糖苷和缩合得到低聚龙胆糖浆，低聚龙胆糖浓度为40-60g/L；利用色谱技术进行分离纯化产品纯度为70-75%，回收率为40-45%；低聚龙胆糖的转化率及纯度均达到国际领先水平。【IPC分类】C12P19/00, C12P19/14【公开号】CN105238827【申请号】CN201510773258【专利技术人】夏泽华, 吴敬, 陈晟, 江龙法 【申请人】南通康威尔生物化工有限公司【公开日】2016年1月13日【申请日】2015年11月13日本文档来自技高网...
【技术保护点】
低聚龙胆糖酶法生产工艺，其特征在于以下步骤，1）葡萄糖液的配制：在化糖罐中加入软水，升温至60‑80℃，加入葡萄糖至50‑70% w/v,搅拌，溶解后用10%盐酸调节PH4.5；过滤，打入酶解罐；2）转化工艺：糖液降温至55－65℃，搅拌加入β‑葡萄糖苷酶，酶用量为30‑60U/g葡萄糖，保温酶解36‑48h，中间流加葡萄糖；酶解结束，升温至100℃，保温灭酶5‑10min；3）浓缩、结晶，回收葡萄糖： 酶解液60‑65℃浓缩至葡萄糖浓度50‑70%，0‑5℃结晶，过滤；葡萄糖回用，滤液进入下一道工艺；4）脱色： 滤液升温至65‑75℃，加入1‑5%活性炭，脱色30‑60min；过滤；5）色谱分离： 滤液过阳离子树脂，分离温度50‑60℃，以去离子水洗脱；6）浓缩、喷雾干燥： 洗脱液30‑40℃浓缩至低聚龙胆糖浓度30‑35%，喷雾干燥，得到粉末型低聚龙胆糖。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：夏泽华，吴敬，陈晟，江龙法，
申请(专利权)人：南通康威尔生物化工有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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