检测血液中半乳凝集素-1的方法及所用试剂技术

技术编号:12704247 阅读:118 留言:0更新日期:2016-01-14 00:30
本发明专利技术提供了一种检测待测样品特别是血液中半乳凝集素-1的方法及所用试剂,本发明专利技术的方法包括:以乳糖修饰的金纳米棒为探针,使其与待测样品接触混合,维持体系温度20~37℃静置10分钟到2小时,通过检测混合体系的颜色来检测半乳凝集素-1。本发明专利技术以乳糖修饰的金纳米棒(Lac-GNRs)为探针,以紫外-可见光-近红外分光光度计为检测手段,在分子水平和细胞水平对gelactin-1进行高效且特异的检测,并对人体血液中的galectin-1进行准确的检出,使之成为癌症转移早期监测的一种手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是关于检测血液中半乳凝集素-1 (galectin-l)的方法及所用试剂。
技术介绍
癌症是一种严重威胁全球人类生命和健康的疾病,据统计每年全球约 有 700 多万人死于癌症(六111116(1;\,1^&6(^&3.31丨2&&61:11?.,]^〇,¥.?.,乂11,工 Q. ,Taylor,M. ,Michael,J.T.CancerStatistics,CA:CancerJ.Clin. 2008, 58, 71-96) 〇 我国癌症发病率呈直线上升趋势,并且大量患者就诊时已处于中晚期,基本丧失了治愈的 可能。中晚期癌症患者难治愈的一个重要原因是癌症易发生转移。原发肿瘤可进行手术 切除或放射治疗,但已散播的癌症却往往难以用上述手段治疗而不损伤正常组织。肿瘤 的转移伴随着不良的预后效果和低的生存率,若能研发有效的检测手段对其进行早期监 测,则有助于转移事件的及时发现和尽早干预,有利于延长患者寿命和提高生活质量(廖 子君,雷光焰,张冠军,刘文超,李洪胜,余国政,肿瘤转移学,陕西科学技术出版 社,2007,p322-p331)。 肿瘤转移是一个复杂的级联过程,在这个复杂的过程中,肿瘤细胞往往需要大量 表达某些特异性蛋白(如整合素、钙粘素、免疫球蛋白、基质金属蛋白酶、纤溶酶激活因子、 血管生长因子等)来实现降解细胞外基质、侵袭邻近细胞层、诱导癌细胞运动、逃避免疫 系统攻击、促进新血管生成以及转移瘤细胞增殖等功能(曾益新,吕有勇,朱明华,陈 国强,龚建平,郭朱明,肿瘤学(第三版),人民卫生出版社,2012,p241-p252)。某些 分泌蛋白可能进入循环系统,在血液中被检测到,成为肿瘤转移的有效生物标志物,对这 些生物标志物进行检测可以帮助实现肿瘤转移的及早诊断,成为肿瘤转移预测的重要手 段(Xue,H.,Li,B.J.,Zhang,J.,Wu,M.,Huang,Q.,Wu,Q.,Sheng,H.,Wu,D.,Hu,J.,Lai,M. ,IdentificationofSerumBiomarkersforColorectalCancerMetastasisUsinga DifferentialSecretomeApproach.J.Proteome.Res.,2010, 9, 545-555)〇 半乳凝集素-1 (galectin-l)是一种重要的血清标记物,在肿瘤细胞的增殖、侵袭、 转移、血管生成和免疫逃逸等方面发挥重要作用(Liu, F. T.,Rabinovich, G. A. Galectins as Modulators of Tumor Progression. Nature Reviews Cancer. 2005, 5, 29-41)〇大 量研究表明,galectin-l在多种肿瘤(肺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌、乳腺癌、神经胶质瘤、 黑色素瘤等)中均有过表达,其表达水平和正常人相比明显的升高(Kuo,P.L.,Hung,J. Y. , Huang, S. K. , Chou, S. H. , Cheng, D. E. , Jong, Y. J. , Hung, C. H. , Yang, C. J. , Tsai, Y. M. , Hsu,Y.L., Huang, M. S. , Lung Cancer-Derived Galectin-lMediates Dendritic Cell Anergy through Inhibitor of DNA Binding 3/IL-lOSignaling Pathway. J. Immunol. 2011, 186, 1521-1530;Chen, J. , Tang, d. , Wang, S. , Li, Q. G. , Zhang, J. R. , Li ,P. , Lu, Q. , Niu, G. , Gao, J. , Ye, N. Y. , Wang, D. R. , High Expressions of Galectin-land VEGF are Associated with Poor Prognosis in Gastric Cancer Patients, Tumor Biol. 2014, 35, 2513-2519)。同时,作为一种过度表达的物质,galectin-l会分泌到肿瘤基 质和人体血液中发挥其作用,因此galectin-1可以作为肿瘤转移的一个血清标记物。对血 液中的galectin-Ι进行检测,有可能成为肿瘤转移早期监测的一种新型手段。然而,尽管 癌症患者的血液galectin-Ι浓度比正常人要高,但其绝对含量仍然非常低(ng/ml级别), 目前尚缺乏有效且方便地检测方法,对癌症转移的早期检测及干预治疗帮助不大。
技术实现思路
本专利技术的一个目的在于针对现有技术中缺乏有效地检测血液中半乳凝集 素-1 (galectin-Ι)的现状,提供一种有效且方便地检测血液中galectin-Ι的方法,提高检 测灵敏度和特异性,以为癌症转移的早期检测及干预治疗提供帮助。 本专利技术的另一目的在于提供一种为实现有效且方便地检测血液中galectin-Ι而 专门设计的检测试剂,其应用于检测血液中galectin-Ι,具有较高的灵敏度和特异性。 为达上述目的,一方面,本专利技术提供了一种检测待测样品中半乳凝集 素-1 (galectin-Ι)的方法,该方法主要是包括以乳糖修饰的金纳米棒(Lac-GNRs)为探针, 以紫外-可见光-近红外分光光度计为检测手段,从而对gelactin-Ι进行高效且特异的检 测。 具体而言,本专利技术提供了一种检测待测样品中半乳凝集素-1的方法,该方法包 括: 以乳糖修饰的金纳米棒为探针,使其与待测样品接触混合,维持体系温度20~ 37°C静置10分钟到2小时,通过检测混合体系的颜色来检测半乳凝集素-1。 本专利技术的方法可在分子水平或是细胞水平或是直接对人体血液中的galectin-1 进行准确的检出,由于galectin-1与肿瘤的转移密切相关,因此本专利技术的方法有可能成为 癌症转移早期监测的一种新型手段。 根据本专利技术的具体实施方案,本专利技术的检测待测样品中半乳凝集 素-1 (galectin-Ι)的方法中,所述的待测样品可以是galectin-Ι的水溶液、癌细胞培养液 或是待测个体的血液或血清等,本专利技术的方法具有较高的检测灵敏度和特异性。 根据本专利技术的具体实施方案,本专利技术的检测待测样品中半乳凝集 素-1 (galectin-Ι)的方法在具体实施时,可先将待测样品(例如galectin-Ι的水溶 液、癌细胞培养基或人体血清等)加入到所乳糖修饰的金纳米棒(Lac-GNRs)水溶液 中,摇匀后静置10分钟到2小时,使用紫外-可见光-近红外分光光度计(UV-Vis-NIS spectrophotometer)对体系进行光学检测,通过吸收曲线的变化判断待检物中是否含有 galectin-Ι,或者也可以肉眼观察体系颜色变化以检测待检样品中的半乳凝集素-1。 根据本专利技术的具体实施方案,本专利技术的检测待测样品中半乳凝集素-1的方法中, 所述乳糖修饰的金纳米棒水溶液中,乳本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种检测待测样品中半乳凝集素‑1的方法,该方法包括:以乳糖修饰的金纳米棒为探针,使其与待测样品接触混合,维持体系温度20~37℃静置10分钟到2小时,通过检测混合体系的颜色来检测半乳凝集素‑1。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:赵岳涛喻学锋潘浩波王怀雨
申请(专利权)人:中国科学院深圳先进技术研究院
类型:发明
国别省市:广东;44

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