一种用于治疗卵巢癌的三萜化合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗卵巢癌的三萜化合物及其制备方法。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的三萜类化合物，可以从茅莓的干燥根中提取、分离纯化得到。体外试验证明该化合物可抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖活力，影响细胞周期的分布，将肿瘤细胞阻滞在G0/G1期，同时可通过与EGFR/HER2受体的酪氨酸激酶磷酸化ATP结合位点结合，抑制其磷酸化，进而下调HER2、P-HER2蛋白的表达来诱导细胞凋亡，可以进一步用来开发成治疗卵巢癌的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物
，具体设及从茅替的干燥根中分离得到的一种具有治疗 卵巢癌作用的=祗类化合物及其制备方法。
技术介绍
茅替，是广东地区民间常用药，别名蛇泡霸、红梅消、S月泡、藤秩薦、天青地白草 等，为菩薇科悬钩子属植物茅替Rubusparvi化IiusL的干燥根。本品为落叶小灌木，生于 山坡、路旁、荒地灌丛和草丛中，适应性强，资源丰富，分布广泛。作为广东地产药材，主要W 南海、阳山、郁南等市县出产较多。茅替具有清热解毒、活血化疲、接骨生肌的功效，广泛运 用于中医临床如跌打损伤、感冒发热、骨瘤、鼻咽癌、肾孟肾炎、急性咽喉炎等疾病的治疗。 近年来，国内外研究学者对菩薇科悬钩子属植物研究已取得一定进展，分离得到 的化合物主要有祗类、黄酬类、酱醇类化及挥发油、脂肪酸、芳香酸、酪酸、较质等，其中立祗 类药理活性较强，普遍存在于在悬钩子属植物中。 文献记载的茅替最引人注目的是其在屯、血管系统方面的药理活性，特别是在抗脑 缺血方面的治疗作用。《本草拾遗》记载茅替具有止血活血、散疲止痛的功效，可内服外敷。 现代研究表明，茅替具有止血和活血化疲的作用，并且与在屯、血管疾病方面具有显著治疗 作用的活血化疲药丹参的药理作用相同。茅替对脑缺血再灌注损伤的保护作用，主要体现 在抗自由基，减轻细胞内巧超载及兴奋性氨基酸的神经毒性、抑制细胞调亡及影响相关蛋 白的表达等。郑振巧等研究发现茅替总皂巧对体内外黑色素瘤有良好的抗肿瘤作用，呈一 定的量效依赖关系，并能促进黑色素瘤细胞的调亡。茅替在临床上可用于痛经的治疗，提示 其在镇痛方面也有一定的作用。此外茅替还可防治铅中毒，其提取物能显著升高铅中毒大 鼠血清中的SOD活性，并且降低MDA的含量。 阳0化]茅替资源丰富，分布广泛，具有多方面的药理活性。现代药理研究表明，茅替在屯、 血管系统与抗肿瘤方面具有显著的作用，有望开发成屯、血管系统及抗肿瘤方面的新药。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从茅替的干燥根中分离得到的一种具有治疗卵巢癌作 用的=祗类化合物及其制备方法。 本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的： 具有下述结构式的化合物（I)， 所述的化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：(a)将茅替的干燥根粉碎， 用70~80%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水饱 和的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化）步骤（a) 中乙酸乙醋萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用80%乙醇洗脱10 个柱体积，收集80 %乙醇洗脱液，减压浓缩得80 %乙醇洗脱物浸膏；（C)步骤化）中80% 乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1、45:1、25:1、15:1和1:1的二氯甲 烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体 积比为20:1、15:1和8:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2 用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收 集10~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。 进一步地，所述大孔树脂为DlOl大孔吸附树脂。进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为75%。一种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的 载体。 所述的化合物（I)在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。所述的药物组合物在制备治疗卵巢癌的药物中的应用。本专利技术化合物用作药物时，可W直接使用，或者W药物组合物的形式使用。该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料W及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物W单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。【附图说明】 图I为化合物（I)结构式； 图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。【具体实施方式】 下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不W此限定本专利技术保护范 围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。 阳02引实施例1:化合物（I)分离制备及结构确证 试剂来源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。 制备方法：（a)将茅替的干燥根（IOkg)粉碎，用75%乙醇热回流提取（2化X3 次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水 饱和的正下醇0LX3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（431g)和正下醇 萃取物；化）步骤（a)中乙酸乙醋萃取物用DlOl大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体 积，再用80 %乙醇洗脱10个柱体积，收集80 %乙醇洗脱液，减压浓缩得80 %乙醇洗脱物浸 膏（161g) ;(c)步骤化）中80%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为75:1(8个 柱体积）、45:1(8个柱体积）、25:1 (8个柱体积）、15:1 (10个柱体积）和1:1巧个柱体积） 的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分4 (52g)用正相硅胶进一步 分离，依次用体积比为20:1(8个柱体积）、15:1 (10个柱体积）和8:1(8个柱体积）的二氯 甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2(26g)用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为70%的甲醇水溶液等度洗脱，收集10-12个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I) (37mg)。 阳0巧]结构确证：HR-ESIMS显示+为m/z507. 3512,结合核磁特征可得分子式 为C31H4A，不饱和度为8。核磁共振氨谱数据5H(ppm，DMS0-de，600MHz) :H-2(6. 06,山J =9.8)，H-3 (6. 84,d，J= 9.8)，H-6(2. 74,dd，J= 14. 4, 7. 7)，H-6(2. 47,t，J= 14. 4)， H-7(1.72,m)，H-7(1.31，m)，H-8(2. 15,dd，J= 12. 1，2. 7)，02,d，J=6. 3)， H-12(1.89,dd，J= 15. 0,6. 4)，H-12(1.81，d，J= 15. 0)，H-15(1.23,m)，H-15(1.33， m)，H-16 (1.71，m)，H-16 (1.26,m)，H-17 (1.41，m)，H-18 (0.91，s)，H-19 (2.95,d，J= 14. 3)，H-19 (2. 48,d，J= 14. 3)，H-20 (I. 55,m)，H-21 本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高忠青，
申请(专利权)人：淄博夸克医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37