从柿子中提取高分子量单宁的方法技术

本发明专利技术公开了一种从柿子中提取高分子量单宁的方法，包括以下步骤：1)将柿子去皮，破碎，加入乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用；2)将滤液浓缩，加入95V％乙醇，放置过夜，离心，取上清液；3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，过滤，取滤液通过截留分子量为4000～5000的中空纤维膜，收集截留液备用；5)将上述截留液通过截留分子量为10000～12000的中空纤维膜，收集透过液，干燥，即为高分子量单宁粉末。本发明专利技术提取的高分子量单宁具有很好的抑制变形链球菌的作用，可用于防龋齿。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物提取
，具体设及一种从柿子中提取高分子量单宁的方 法。
技术介绍
柿子（PersimmonDiosp巧roskakiL)果肉中含量丰富的单宁类物质。研究表明， 柿子总酪具有很强的抗氧化性W及和蛋白质结合能力，具有抑制人淋己细胞白血病、降血 压、清除体内自由基W及明显抑制峻蛇、眼镜蛇、五步蛇毒液中多种酶类W及毒素的活性。 目前有报道称柿子提取物（有效成分为黄酬、=祗类和可水解单宁）对枯草芽抱杆菌表现 出了一定的耐药性，但耐药性并不稳定。但枯草芽抱杆菌完全不同于变形链球菌，且并未见 到柿子单宁可用于抑制变形链球菌的报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种，提取的 高分子量单宁可有效抑制变形链球菌，具有很好的防離齿效果。 本专利技术提供的技术方案是，包括W下步骤： 阳0化]1)将柿子去皮，破碎，加入乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用； 。将滤液浓缩，加入95V%乙醇，放置过夜，离心取上清液； 3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗 脱液； 4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，过滤，取滤液通过截留分子 量为4000~5000的中空纤维膜，收集截留液备用； 5)将上述截留液通过截留分子量为10000~12000的中空纤维膜，收集透过液，干 燥，即为高分子量单宁粉末。 步骤1)中，乙醇的体积浓度为70~80%，其加入量为柿子重量的10~20倍，在 60~80°C下提取1~3次，每次1~化。 W11] 步骤。中，乙醇的加入量为浓缩液的2~4倍。 阳01引步骤如中，水的加入量为浸膏重量的3~5倍。 本专利技术提取得到的柿子高分子量单宁具有很好的抑制变形链球菌的效果，可用于 防離齿。【具体实施方式】 W下具体实施例对本专利技术作进一步阐述，但不作为对本专利技术的限定。 阳〇1引实施例1 1)将柿子去皮，破碎，加入柿子重量的10倍的70v%乙醇，在60°C下提取比，合并 提取液，过滤，取滤液备用； 阳017]。将滤液浓缩，加入95v%乙醇，乙醇的加入量为浓缩液的2倍，放置过夜，离心 取上清液； 3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗 脱液； 4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，水的加入量为浸膏重量的3 倍，过滤，取滤液通过截留分子量为4000~5000的中空纤维膜，收集截留液备用； 5)将上述截留液通过截留分子量为10000~12000的中空纤维膜，收集透过液，真 空冷冻干燥，即为高分子量单宁粉末。 阳OW 实施例2 1)将柿子去皮，破碎，加入柿子重量的20倍的80v%乙醇，在80°C下提取3次，每 次化，合并提取液，过滤，取滤液备用；[002引。将滤液浓缩，加入95v%乙醇，乙醇的加入量为浓缩液的4倍，放置过夜，离心 取上清液；扣将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗 脱液；[00对 4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，水的加入量为浸膏重量的5 倍，过滤，取滤液通过截留分子量为4000~5000的中空纤维膜，收集截留液备用； 5)将上述截留液通过截留分子量为10000~12000的中空纤维膜，收集透过液，真 空冷冻干燥，即为高分子量单宁粉末。 实施例3 1)将柿子去皮，破碎，加入柿子重量的15倍的75v%乙醇，在70°C下提取2次，每 次化，合并提取液，过滤，取滤液备用； 。将滤液浓缩，加入95v%乙醇，乙醇的加入量为浓缩液的3倍，放置过夜，离心 取上清液； 扣将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗 脱液； 4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，水的加入量为浸膏重量的4 倍，过滤，取滤液通过截留分子量为4000~5000的中空纤维膜，收集截留液备用； 5)将上述截留液通过截留分子量为10000~12000的中空纤维膜，收集透过液，真 空冷冻干燥，即为高分子量单宁粉末。 阳〇3引对照实施例1 1)将柿子去皮，破碎，加入柿子重量的15倍的75v%乙醇，在70°C下提取2次，每 次化，合并提取液，过滤，取滤液备用；[00对。将滤液浓缩，加入95v%乙醇，乙醇的加入量为浓缩液的3倍，放置过夜，离心 取上清液； 3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗 脱液； 4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，真空冷冻干燥，即为高分子量单宁粉末。 实验例（体外抑菌试验） I、实验方法： 1)分别取实施例1~3 W及对照实施例1的高分子量单宁粉末Ig粉碎后加IOml 无菌水配成混合溶液。 2)抑菌片的制备：取无菌并干燥的滤纸片4片，每片分别滴加实施例1~3W及 对照实施例1制成的混合溶液20y1，然后将滤纸片平放于清洁的无菌平面皿内，开盖置溫 箱（37°C)中烤干，或置室溫下自然干燥后备用。阴性对照组抑菌片的制备：取无菌干燥滤 纸片，每片滴加无菌蒸馈水20y1，干燥后备用。 2、实验结果【主权项】1. ，其特征在于：包括以下步骤： 1) 将柿子去皮，破碎，加入乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用； 2) 将滤液浓缩，加入95v%的乙醇，放置过夜，离心，取上清液； 3) 将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液； 4) 将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，过滤，取滤液通过截留分子量为 4000~5000的中空纤维膜，收集截留液备用； 5) 将上述截留液通过截留分子量为10000~12000的中空纤维膜，收集透过液，干燥， 即为高分子量单宁粉末。2. 根据权利要求1所述的，其特征在于：步骤1) 中，乙醇的体积浓度为70~80%，其加入量为柿子重量的10~20倍，在60~80°C下提取 1~3次，每次1~3h。3. 根据权利要求1所述的，其特征在于：步骤2) 中，乙醇的加入量为浓缩液的2~4倍。4. 根据权利要求1所述的，其特征在于：步骤3) 中，水的加入量为浸膏重量的3~5倍。【专利摘要】本专利技术公开了一种，包括以下步骤：1)将柿子去皮，破碎，加入乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用；2)将滤液浓缩，加入95V％乙醇，放置过夜，离心，取上清液；3)将上清液过AB-8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，过滤，取滤液通过截留分子量为4000～5000的中空纤维膜，收集截留液备用；5)将上述截留液通过截留分子量为10000～12000的中空纤维膜，收集透过液，干燥，即为高分子量单宁粉末。本专利技术提取的高分子量单宁具有很好的抑制变形链球菌的作用，可用于防龋齿。【IPC分类】A61P1/02, C08H99/00, A61P31/04【公开号】CN105218834【申请号】CN201510759645【专利技术人】文继承, 蒋元勇, 朱昂辉, 雍小军, 易华, 李丽金 【申请人】桂林茗兴生物科技有限公司【公开日】2016年1月6日【申请日】2015年11月10日本文档来自技高网...

【技术保护点】
从柿子中提取高分子量单宁的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将柿子去皮，破碎，加入乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用；2)将滤液浓缩，加入95v％的乙醇，放置过夜，离心，取上清液；3)将上清液过AB‑8大孔树脂，先用水洗柱至无色，然后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；4)将乙醇洗脱液浓缩回收溶剂，得到浸膏，加水溶解，过滤，取滤液通过截留分子量为4000～5000的中空纤维膜，收集截留液备用；5)将上述截留液通过截留分子量为10000～12000的中空纤维膜，收集透过液，干燥，即为高分子量单宁粉末。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：文继承，蒋元勇，朱昂辉，雍小军，易华，李丽金，
申请(专利权)人：桂林茗兴生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45