用于治疗成骨不全的方法技术

本发明专利技术提供用于在受试者中治疗和改善成骨不全(OI)的症状的方法，所述方法通过给所述受试者施用治疗有效量的结合转化生长因子β(TGFβ)的结合剂进行。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】 相关申请 本申请设及2013年3月20日提交的美国临时专利申请No. 61/803, 647, 2013年 9月9日提交的美国临时专利申请No.61/875,399,和2013年10月26日提交的美国临时 专利申请No. 61/883, 151，其各自内容整体通过引用并入本文。[000引 政府资金 本专利技术得到国立卫生研究院颁发的POl皿070394、P01皿22657&R01DE01771的政 府资助。美国政府拥有本专利技术的某些权益。 专利
本专利技术设及用于治疗成骨不全（OI)的方法。更具体地，本专利技术设及使用特异性结 合人转化生长因子0 (TGFP)或其同种型（isoform)的结合蛋白（如抗体或其抗原结合片 段）治疗OI的方法。[000引背景 成骨不全（01)，也已知为"脆骨病"或"洛布斯坦综合征"，是使人虚弱的和罕见的 先天性骨病，其大约每15000人中影响一人。尽管OI类型之间的表型不同，共同的症状包 括骨和牙的不完全骨化、减少的骨量、脆骨和病理性骨折。OI的运些共同的症状被认为是由 于基因突变引起，所述基因突变导致I型胶原或参与骨基质沉积或稳态平衡的其它蛋白的 缺乏。由于运些症状W及致死骨折和并发症的倾向，OI患者的预期寿命与一般人群相比是 降低的。因此，本领域中显然存在开发对OI的有效治疗的迫切需要。 附图简述 图IA(蛋白印迹）和1B-1F(图表）阐明与野生型对照相比，在来自化tap/小鼠 的骨中的TGFP信号传导升高。 图2A(巧光图）和2B-C(图表）显示和TGFP报道子（r巧orter)小鼠杂交的 化tap/小鼠与野生型对照相比展现更高的TGFP活性。 图3是来自用小鼠泛特异性（pan-specific)抗-TGF0抗体IDll处理的 化tap/小鼠的椎骨的yCT图像。[001引图4是含有来自用小鼠泛特异性抗-TGF0抗体IDl1处理的化tap/小鼠的椎骨 的定量测量的图表。[001引图5是来自用小鼠泛特异性抗-TGFP抗体IDll处理的化tap/小鼠的椎骨的组 织形态测定分析。图6A和她是阐明来自用小鼠泛特异性抗-TGF0抗体IDl1处理的化tap/小鼠 的股骨的生物力学特性的图表（图6A-最大负荷，和图6B-刚度），其由S点弯曲测试确定。 [001引 图7A和7B(显微图像）和7C(图表）阐明用小鼠泛特异性抗-TGF0抗体IDl1 处理的化tap/小鼠的肺表型。 图8是用抗-核屯、蛋白多糖（decorin)抗体染色的化tap/和WT肺的显微图像。 图9是描述核屯、蛋白多糖结合测定的图表。[001引图10是显示化tap/小鼠中增加的TGFP信号传导的一组图表、照片和图像。图IOA是显示TGFP祀基因p21、PAI-l、和Collal的定量RT-PCR结果的一系列S个图表。所 述图表表明P3WT和化tap/小鼠的烦盖骨中增加的TGFP信号传导。结果显示为WT组平 均值+SD的倍数变化海组n= 5,Vo. 05。图IOB是P3烦盖蛋白提取物的蛋白印迹分析 的照片，其显示化tap/相比于WT小鼠，其中活化的Smad2相对于总Smad2蛋白的增加的 量，提示增加的TGFP-信号传导；每组n= 3。图IOC是显示图IOB所示蛋白印迹的定量的 图表。结果显示为WT组平均值+SD的倍数变化，^<0. 05。图IOD是显示与和TGFP-报 道子小鼠（SBE-Luc小鼠）杂交的WT小鼠相比，化tap/中与骨骼结构重叠的区域中增加的 生物巧光。显示了在PlO的3窝的代表性图像。在3窝中，化tap/小鼠显示与WT小鼠相 比在头/烦盖处平均2. 86倍（SD+ 0. 34)的生物巧光信号（比例尺条=Icm)。图IOE的图 表显示使用TGF0报道子细胞系，在条件培养基中评估来自在成骨条件下培养3天的WT和 化tap/骨髓基质细胞的TGF0活性，阐明与来自WT细胞的培养基相比更高的TGF0活性。 结果显示为WT组平均值+SD的倍数变化；每组n= 5/p<0. 05。图IOF是显示肺（PlO)对 pSmad2的免疫染色的两幅图片，其显示在WT和化tap/小鼠中增加的细胞内染色（40X放 大率）。显示每组n= 3小鼠的代表性图像（比例尺条=20ym)。 图11是显示化tap/小鼠在用TGFP中和抗体IDll处理后的表型校正的一组 照片和图表。图IlA是16周龄野生型（WT)、对照抗体-处理的化tap/和IDll-处理的 化tap/小鼠在处理8周后的L4椎体的一系列=张微型CT图像。图IlB是显示L4椎体 的微型CT结果的一组S张图表，其阐明WT、对照化tap/和IDll处理的化tap/小鼠中增 加的骨体积/总体积度V/TV)、小梁数目（Tb.N)和厚度（Tb.化）。结果显示为平均±SD， n= 8 每组，对Crtap/IDllvs.Crtap/ 对照为 *p<0. 05,对Crtap/vs.WT为 +p<0. 05。图 IlC是显示L4椎骨的组织形态测定分析结果的一组=张图表，其显示化tap/小鼠中与 WT相比增加的每骨表面积破骨细胞（N.Oc/B巧和成骨细胞（N.化/B巧数目。在用IDll处 理后减少的成骨细胞和破骨细胞数目表明在Crtap/小鼠中对加速的骨重建的有效抑制。 化tap/小鼠中增加的每骨表面积的骨细胞数目（N.Ot/B.Ar)在IDll处理后被减少至WT 水平。结果显示为平均±SD，每组n= 6,对化tap/IDllVS.化tap/对照为*p<0. 05,对 Crtap/VS.WT为+p<0. 05。图IlD是显示16周龄野生型（WT)、对照Crtap/和IDll-处理 的化tap/小鼠在处理8周后膨胀的肺的苏木精/伊红染色的一系列S张图像。与WT小鼠 相比，化tap/对照小鼠显示远端气道空间的增加。在用IDll处理后，与对照化tap/小鼠 相比，远端气道直径存在减少。显示每组n= 8小鼠的代表性图像（比例尺条=100ym)。 图IlE是显示通过平均线性截距法（MLI)定量的肺泡结构（alveolarstructure)之间距 离的图表，其阐明与对照抗体处理的化tap/和WT小鼠相比，IDl1-处理的化tap/小鼠中 远端气道空间的显著减少。结果显示为平均±SD，每组n= 8只小鼠，每只小鼠分析10张 图像，对Crtap/IDllVS.Crtap/ 对照为 *p<0. 05,对Crtap/VS.WT为 +p<0. 05。 图12是显示与I型胶原结合的核屯、蛋白多糖和P9863Hyp位点重叠并且在 化tap/小鼠的I型胶原中减少的一系列图表。图12A是显示P3小鼠烦盖骨的定量RT-PCR 结果的一组S张图表，其显示与WT相比，化tap/小鼠烦盖骨中富含亮氨酸的小蛋白多糖 类核屯、蛋白多糖值cn)、双糖链蛋白多糖化iglycan;Bgn)和aspo;rin(Aspn)的RNA表达没 有不同。结果给出为WT组平均值+SD的倍数变化，每组n= 5。图12B是显示表面等离子 体共振分析结果的图表，其表明重组核屯、蛋白多糖核屯、蛋白与化tap/小鼠的I型胶原的 结合与野生型I型胶原相比少大约45%。使用3、5和12yM的核屯本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于在有需要的受试者中治疗成骨不全(OI)的方法，包括给所述受试者施用治疗有效量的特异性结合转化生长因子β(TGFβ)的抗体或其抗原结合片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：B·李，K·T·桑帕思，
申请(专利权)人：建新公司，贝勒医学院，
类型：发明
国别省市：美国;US