一种凝胶及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及组织工程皮肤保存领域，尤其涉及一种凝胶及其制备方法和应用。在采用该凝胶对组织工程皮肤进行保存时，能够保持组织工程皮肤的细胞活力，延长组织工程皮肤的保存时间。本发明专利技术实施例提供一种凝胶，包括：液体培养基以及凝固剂；其中，所述液体培养基包括质量浓度为18.4-20.6g/L的基础培养基、质量浓度为0.2-1.0mg/L的谷胱甘肽、质量浓度为0.4-1.0g/L的色氨酸和质量浓度为0.1-0.3g/L的α-酮戊二酸；所述凝固剂为质量浓度为1.0-1.5％的琼脂溶液。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及组织工程皮肤保存领域，尤其涉及一种凝胶及其制备方法和应用。
技术介绍
近年来，随着组织工程皮肤的研究和开发，组织工程皮肤的保存方法层出不穷，目前组织工程皮肤的保存主要包括冷藏保存与冷冻保存两种，由于冷冻保存过程中容易产生冰晶，对组织工程皮肤的细胞和组织容易造成损伤，因此，组织工程皮肤最优选的保存方法为冷藏保存。目前用于保存组织工程皮肤的培养基也具有多种形式，例如，用于保存组织工程皮肤的培养基可以为液态培养基，也可以为固态培养基，其中，在采用液态培养基对所述组织工程皮肤进行冷藏保存时，所述组织工程皮肤受到所述液态培养基的冲刷容易使细胞、组织发生损伤，当所述组织工程皮肤具有表皮层与真皮层时，容易使所述组织工程皮肤的表皮层和真皮层发生脱落分离，从而影响组织工程皮肤的细胞活力。因此，固态培养基更合适于组织工程皮肤的冷藏保存。在现有技术中，已有的固态培养基在用于组织工程皮肤保存时，尚没有任何突破性进展，组织工程皮肤的保存时间仍然为组织工程皮肤应用的主要限制因素。
技术实现思路
本专利技术的主要目的在于，提供一种凝胶及其制备方法和应用。在采用该凝胶对组织工程皮肤进行保存时，能够保持组织工程皮肤的细胞活力，延长组织工程皮肤的保存时间。为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一方面，本专利技术实施例提供一种凝胶，包括：液体培养基以及凝固剂；其中，所述液体培养基包括质量浓度为5-10g/L的基础培养基、质量浓度为0.2-1.0mg/L的谷胱甘肽、质量浓度为0.4-1.0g/L的色氨酸和质量浓度为0.1-0.3g/L的α-酮戊二酸；所述凝固剂为质量浓度为1.0-1.5％的琼脂溶液。可选的，所述液体培养基还包括：质量浓度为0.5-1.0g/L的L-谷氨酰胺、体积浓度为5％-15％的胎牛血清和摩尔浓度为30-50mM的4-羟乙基哌嗪乙磺酸。优选的，所述液体培养基还包括：质量浓度为5.0-7.0g/L碳酸氢钠、质量浓度为0.6-6.0ng/L的碱性成纤维生长因子bFGF和质量浓度为4-16μg/L的胰岛素。可选的，所述液体培养基还包括：质量浓度为10-30mg/L的维生素C、质量浓度为0.1-0.3mg/L的氢化的可松、质量浓度为6-20mg/L的转铁蛋白、质量浓度为20-40mg/L的腺嘌呤和质量浓度为0.1-1.0ng/L的表皮生长因子EGF。优选的，所述基础培养基包括质量浓度为14.4-15.0g/L的DMEM和质量浓度为4.0-5.6g/L的F12。另一方面，本专利技术实施例提供一种如上述所述的凝胶的制备方法，包括：步骤1)分别配制液体培养基以及凝固剂；其中，所述凝固剂为质量浓度为1.0-1.5％的琼脂溶液；步骤2)将所述液体培养基与所述凝固剂混合、静置，使所述液体培养基与所述凝固剂的混合液凝固，获得凝胶。优选的，在将所述液体培养基与所述凝固剂混合时，所述液体培养基的温度为4-8℃，所述凝固剂的温度为60-68℃。再一方面，本专利技术实施例提供一种上述所述的凝胶在保存组织工程皮肤中的应用。优选的，所述组织工程皮肤包括真皮层与表皮层，所述应用包括：S1)将组织工程皮肤的表皮层朝上置于培养皿中；S2)将所述液体培养基以及凝固剂的混合液注入所述培养皿中，静置，使所述液体培养基与所述凝固剂的混合液凝固成凝胶，所述组织工程皮肤的真皮层包裹在所述凝胶中，表皮层裸露在外。优选的，在S2)之前还包括将所述液体培养基与所述凝固剂混合，其中，所述液体培养基的温度为4-8℃，所述凝固剂的温度为60-68℃。可选的，S1)具体为：将组织工程皮肤放置于底部具有通孔的容器中，并将所述容器放置于所述培养皿中，其中，所述容器的边缘与所述培养皿的侧壁之间具有空隙。本专利技术实施例提供一种凝胶及其制备方法和应用。在通过所述凝胶对组织工程皮肤进行保存时，能够防止液体培养基冲刷所述组织工程皮肤，使组织工程皮肤的细胞与组织造成损伤，从而能够保持所述组织工程皮肤的细胞活力，且所述凝胶的各个组分能够为组织工程皮肤提供营养，并保护组织工程皮肤免受低温缺氧损伤，进一步保持所述组织工程皮肤的细胞活力，使得组织工程皮肤的保存时间大大延长。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。图1为本专利技术实施例提供的一种凝胶的制备方法流程图；图2为本专利技术实施例提供的一种凝胶的应用的方法流程图。具体实施方式现将详细地提供本专利技术实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本专利技术。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本专利技术进行多种修改和变化而不背离本专利技术的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。因此，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术实施例所涉及的材料均可以通过商业途径或通过申请人获取。一方面，本专利技术实施例提供一种凝胶，包括：液体培养基以及凝固剂；其中，所述液体培养基包括质量浓度为18.4-20.6g/L的基础培养基、质量浓度为0.2-1.0mg/L的谷胱甘肽、质量浓度为0.4-1.0g/L的色氨酸和质量浓度为0.1-0.3g/L的α-酮戊二酸；所述凝固剂为质量浓度为1.0-1.5％的琼脂溶液。其中，凝胶是指具有弹性的处于半固体状态且失去流动性的稠厚物质，该凝胶中的凝固剂为琼脂溶液，琼脂溶液在用于制备固体培养基时，能够提高固体培养基的凝固型与稳定性，该凝胶中的谷胱甘肽具有保护组织工程皮肤免受低温损伤的作用，所述色氨酸能够为组织工程皮肤提供营养物质且避免组织工程皮肤低温缺氧而造成损伤，所述α-酮戊二酸能够保护组织工程皮肤免受低温损伤。本专利技术实施例提供一种凝胶。在通过所述凝胶对组织工程皮肤进行保存时，能够防止液体培养基冲刷所述组织工程皮肤，使组织工程皮肤的细胞与组织造成损伤，从而能够保持所述组织工程皮肤的细胞活力，且所述凝胶的各个组分能够为组织工程皮肤提供营养，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种凝胶，其特征在于，包括：液体培养基以及凝固剂；其中，所述液体培养基包括质量浓度为5‑10g/L的基础培养基、质量浓度为0.2‑1.0mg/L的谷胱甘肽、质量浓度为0.4‑1.0g/L的色氨酸和质量浓度为0.1‑0.3g/L的α‑酮戊二酸；所述凝固剂为质量浓度为1.0‑1.5％的琼脂溶液。

【技术特征摘要】
1.一种凝胶，其特征在于，包括：液体培养基以及凝固剂；其中，
所述液体培养基包括质量浓度为5-10g/L的基础培养基、质量浓度
为0.2-1.0mg/L的谷胱甘肽、质量浓度为0.4-1.0g/L的色氨酸和质量浓
度为0.1-0.3g/L的α-酮戊二酸；
所述凝固剂为质量浓度为1.0-1.5％的琼脂溶液。
2.根据权利要求1所述的凝胶，其特征在于，所述液体培养基还
包括：质量浓度为0.5-1.0g/L的L-谷氨酰胺、体积浓度为5％-15％的胎
牛血清和摩尔浓度为30-50mM的4-羟乙基哌嗪乙磺酸。
3.根据权利要求1所述的凝胶，其特征在于，所述液体培养基还
包括：质量浓度为5.0-7.0g/L碳酸氢钠、质量浓度为0.6-6.0ng/L的碱
性成纤维生长因子bFGF和质量浓度为4-16μg/L的胰岛素。
4.根据权利要求1所述的凝胶，其特征在于，所述液体培养基还
包括：质量浓度为10-30mg/L的维生素C、质量浓度为0.1-0.3mg/L的
氢化的可松、质量浓度为6-20mg/L的转铁蛋白、质量浓度为20-40mg/L
的腺嘌呤和质量浓度为0.1-1.0ng/L的表皮生长因子EGF。
5.一种如权利要求1-4任一项所述的凝胶的制备方法，其特征在
于，包括：
步骤1)分别配制液...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘维，凡孝菊，张春燕，张爱兵，
申请(专利权)人：陕西艾尔肤组织工程有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61