一种纯化儿茶素、表儿茶素葡萄籽提取物的工艺，以葡萄籽为原料，有提取、纯化等生产步骤。工艺路线合理，原料容易解决，价格低廉，生产工艺简单，最突出的优点是它不同于常规的提取分离，得到的儿茶素、表儿茶素的生理活性更强，此工艺生产的葡萄籽提取物有很广的应用领域，对生物技术应用有新的突破。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种葡萄籽提取物的制备，特别是涉及一种纯化儿茶素、表儿茶素葡萄籽提取物。
技术介绍
葡萄籽提取物是从天然葡萄籽中提取的有效活性营养成份配以维生素E等主要原料精制而成的营养食品。葡萄籽提取物是从葡萄籽中提取的一种人体内不能合成的新型高效天然抗氧化剂物质。原花青素是一种有特殊结构的生物类黄酮，在结构上是由不同数量的儿茶素或表儿茶素结合而成，最简单的原花青素是儿茶素，或表儿茶素，或儿茶素和表儿茶素形成的二聚体，或三聚体，四聚体，直至十聚体等。口服二聚体原花青素很快吸收，并在体内甲基化，在血浆和肝脏中发挥激素样效应，是最佳的生物活性物质，是目前发现的最强的自由基清除剂，具有非常强的体内活性，opc的抗自由基氧化能力可达维生素E的50倍，维生素c的20倍，且吸收速度完全，吸收20分钟即可达到最高的血液浓度，代谢半衰期为7小时之久。OPC是由于B环上具有相邻二酚羟基广泛的电子非定域化，使得相应的氧化形式另外获得稳定状态。另外，在其高分子结构中，几个与O原子邻位的二羟酚基使得原花青素充分与金属离子Fe+++、Cu++、Al++及蛋白结合，络合作用的贡献在于阻止催化自由基反应的金属离子的活性。黄烷间的连接类型(C4与C6结合，C4与CS结合)对原花青素捕获自由基抗氧化有很大影响。在水溶液中的构象不同，影响它们的亲水性，而影响它们与水相和脂质相中过氧化氢的相互作用。在二聚体中因两个单体的构象或键结合位置不同，可派生多种异构体。已分离鉴定的8种结构形成，分别命名为BI?B8。其中BI?B4是由C4?C8键合，B5?B8由C4 — C6键合。实验通过鉴测耗氧量和测量共轭双烯的形成，评价原花青素单体，直至五聚体的抗氧化能力。认为二聚体的作用最强，均能增加氧化作用的诱导时间来保护细胞膜对过氧化氢自由基的损害。但随结构复杂性增加，空间位阻现象存在，抗氧化作用降低。葡萄籽提取物可应用于多个领域，如医药、保健品、食品等，生产葡萄籽提取物的传统方法是提取、柱层析，没有将最具有活性成分的儿茶素、表儿茶素纯化，使得生物活性不明显。本专利技术是针对这一点制备高纯度的儿茶素、表儿茶素及低聚体。
技术实现思路
本专利技术所采取的技术方案概述如下: 一种纯化儿茶素、表儿茶素葡萄籽提取物的工艺。其特征包括如下步骤: (1)前处理:将原料洗净； (2)提取:将洗净后的原料置于原料重量2?5倍，20?50%乙醇中提取2次，温度为65 ?87。。； (3)浓缩、过滤:将提取液浓缩、过滤； (4)柱层析:将浓缩液用树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液为茶色，然后用30^70%乙醇溶液进行洗脱分离，将所需组分减压浓缩； (5)萃取:将(4)中的浓缩液调至糖度10~40°，加入1~5倍(体积比)的乙酸乙酯萃取一次; (6)液液分离，乙酸乙酯层浓缩，喷雾干燥，儿茶素重量含量为25%以上，表儿茶素重量含量为15%以上。本专利技术所述柱层析树脂选自型号为AB-8、HP-20、D101、HZ816、XAD-2、XAD-4、 XAD-16、DM-130等型号树脂。本专利技术的有益效果是: 原花青素中最具活性的成分是儿茶素、表儿茶素及聚合而成的二聚体，它有很强的抗肿瘤、抗动脉硬化、保护心脏及心脑血管、抗炎、调脂及抗氧化功能。可以持续化生产，节约成本，因此此专利技术具有很高的经济效益和社会效益。正是由于此方法生产的葡萄籽提取物有着用传统方法所生产的葡萄籽提取物所不具备的这些优点，从而拓宽了葡萄籽提取物的应用领域，对生物技术应用具有新的突破。【附图说明】图1为传统工艺制备的葡萄籽提取物HPLC图谱。图2为该方法制备的葡萄籽提取物HPLC图谱。图3为传统工艺制备的葡萄籽提取物水溶。图4为该方法制备的葡萄籽提取物水溶。【具体实施方式】实施例1: (1)前处理:将原料洗净； (2)提取:将洗净后的原料置于原料重量2倍，50%乙醇中提取2次，温度为85°C; (3)浓缩、过滤:将提取液浓缩、过滤； (4)柱层析:将浓缩液用AB-8树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液为茶色，然后用30%乙醇溶液进行洗脱分离，将所需组分减压浓缩； (5)萃取:将(4)中的浓缩液调至糖度15°，加入3倍(体积比)的乙酸乙酯萃取一次； (6)液液分离，乙酸乙酯层浓缩，喷雾干燥，儿茶素重量含量为25.56%，表儿茶素重量含量为 18.17%ο实施例2: (1)前处理:将原料洗净； (2)提取:将洗净后的原料置于原料重量4倍，30%乙醇中提取2次，温度为78V; (3)浓缩、过滤:将提取液浓缩、过滤； (4)柱层析:将浓缩液用XAD-2树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液为茶色，然后用50%乙醇溶液进行洗脱分离，将所需组分减压浓缩； (5)萃取:将(4)中的浓缩液调至糖度20°，加入5倍(体积比)的乙酸乙酯萃取一次； (6)液液分离，乙酸乙酯层浓缩，喷雾干燥，儿茶素重量含量为26.78%， 表儿茶素重量含量为20.13%ο实施例3: (1)前处理:将原料洗净；(2)提取:将洗净后的原料置于原料重量5倍，45%乙醇中提取2次，温度为65°C; (3)浓缩、过滤:将提取液浓缩、过滤； (4)柱层析:将浓缩液用DlOl树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液为茶色，然后用60%乙醇溶液进行洗脱分离，将所需组分减压浓缩；(5)萃取:将(4)中的浓缩液调至糖度35°，加入2.5倍(体积比)的乙酸乙酯萃取一次； (6)液液分离，乙酸乙酯层浓缩，喷雾干燥，儿茶素重量含量为21.32%，表儿茶素重量含量为 16.97%。实施例4: (1)前处理:将原料洗净；(2)提取:将洗净后的原料置于原料重量3倍，15%乙醇中提取2次，温度为75°C; (3)浓缩、过滤:将提取液浓缩、过滤； (4)柱层析:将浓缩液用DM-130树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液为茶色，然后用55%乙醇溶液进行洗脱分离，将所需组分减压浓缩； (5)萃取:将(4)中的浓缩液调至糖度40°，加入2倍(体积比)的乙酸乙酯萃取一次； (6)液液分离，乙酸乙酯层浓缩，喷雾干燥，儿茶素重量含量为26.33%，表儿茶素重量含量为 17.08%ο实施例5: (1)前处理:将原料洗净；(2)提取:将洗净后的原料置于原料重量I倍，35%乙醇中提取2次，温度为80°C; (3)浓缩、过滤:将提取液浓缩、过滤； (4)柱层析:将浓缩液用HP-20树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液为茶色，然后用70%乙醇溶液进行洗脱分离，将所需组分减压浓缩； (5)萃取:将(4)中的浓缩液调至糖度25°，加入3倍(体积比)的乙酸乙酯萃取一次； (6)液液分离，乙酸乙酯层浓缩，喷雾干燥，儿茶素重量含量为26.03%，表儿茶素重量含量为 15.99%ο【主权项】1.一种纯化儿茶素、表儿茶素葡萄籽提取物的工艺，其特征包括如下步骤: (1)前处理:将原料洗净； (2)提取:将洗净后的原料置于原料重量2?5倍，20?50%乙醇中提取2次，温度为.65 ?87。。； (3)浓缩、过滤:将提取液浓缩、过滤； (4)柱层析:将浓缩液用树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液为茶色，然后用.30^7本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种纯化儿茶素、表儿茶素葡萄籽提取物的工艺，其特征包括如下步骤：（1）前处理：将原料洗净；（2）提取：将洗净后的原料置于原料重量2～5倍，20～50%乙醇中提取2次，温度为65～87℃；（3）浓缩、过滤：将提取液浓缩、过滤；（4）柱层析：将浓缩液用树脂进行吸附，用去离子水清洗树脂至流出液为茶色，然后用30%~70%乙醇溶液进行洗脱分离，将所需组分减压浓缩；（5）萃取：将（4）中的浓缩液调至糖度10~40°，加入1~5倍（体积比）的乙酸乙酯萃取一次；（6）液液分离，乙酸乙酯层浓缩，喷雾干燥，儿茶素重量含量为25%以上，表儿茶素重量含量为15%以上。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：田婷，
申请(专利权)人：天津市尖峰天然产物研究开发有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12
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