秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法技术

本发明专利技术提供一种秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，包括外植体选择与消毒、获得无菌试管苗、胚状体诱导培养、胚状体壮苗培养和炼苗与移栽等步骤。本发明专利技术有效解决了秋枫工厂化育苗的问题，具有培养时间短，繁殖系数高，成活率高，植株健壮等优点，可满足市场对秋枫种苗的需求。

【技术实现步骤摘要】
秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法
本专利技术属于植物繁殖
，具体涉及一种秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法。
技术介绍
秋枫，别名重阳木，系高大乔木，其古朴端庄、树冠庞大、枝叶浓密，是良好的行道和庭园绿化树种。此外，秋枫根系发达，抗风力强，可营造为防护林。秋枫全身是宝，木材纹理直，较坚硬，耐久用，可作建筑家具桥梁等用；果肉可酿酒；种子含油量高，可榨油供工业用；根及树皮可用于风湿骨痛；叶可用于食道癌、胃癌、传染性肝炎、小儿疳积、肺炎、咽喉炎、疮疡等。目前，秋枫都是采用种子进行繁殖，但种子一年只有一次，且要随采随播才能提高发芽率，种子繁殖已不能满足市场的需求。组织培养是一种植株快速繁殖技术，但采用组织培养技术快速繁殖秋枫种苗还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的是提供秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，通过对秋枫进行胚性愈伤诱导，在短时间内培育出大量适合移栽的秋枫种苗，显著提高了秋枫种苗的增殖系数和种苗质量，可实现规模化生产，满足市场上对秋枫种苗的需求。为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，提供了一种秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，包括以下步骤：A、将秋枫种子用2％的洗洁精水溶液浸泡5min后，线状自来水冲洗15-20min，再用添加了2-3滴100mg/L吐温20的0.1％的升汞溶液浸泡消毒8-10min，无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸去除所述秋枫种子表面水分，得消毒外植体；B、将步骤A中得到的所述消毒外植体接种到第一培养基中，于22-26℃、光照条件下培养35天，得无菌试管苗，其中，所述第一培养基包括MS培养基，0.1-0.5mg/L赤霉素，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂，所述光照条件为，光照强度1500lux，光照时间8-10h/天；C、将步骤B中得到的所述无菌试管苗的子叶置于第二培养基中，于22-26℃、所述光照条件下培养30天，得胚状体，其中，所述第二培养基包括MS培养基，0.5-2.0mg/LNAA，0.1-0.5mg/LKT，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；D、将步骤C中得到的所述胚状体置于第三培养基中，于22-26℃，所述光照条件培养30天，得完整带根健壮植株，其中，所述第三培养基包括MS培养基，0.5-1.5mg/L6-BA，0.1-0.5mg/LNAA，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；E、在所述步骤D中获得所述完整带根健壮植株后，向所述第三培养基中加入少量自来水，敞口放置2-4天后，将所述完整带根植株取出，洗净其根部培养基得幼苗，将所述幼苗移栽到基质中培养30天，再将其移栽到大田培养。优选的是，所述的秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，所述基质，其包括：第一基质层，其由15-20重量份稻壳、10-12重量份锯末、5-8重量份草木灰和5-8重量份珍珠岩经高温灭菌制得，其厚度为4-8cm；第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由20-25重量份黄壤土、15-20重量份废蜜液、10-15重量份豆渣、10-15重量份秸秆、5-10重量份厩肥和0.3-0.5份酵素菌经发酵制得，其厚度为5-10cm；第三基质层，其位于所述第二基质层上方，其为厚度为1-2cm的细沙层。优选的是，所述的秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，所述基质中培养的条件为温度25-28℃、湿度为70-80％、自然光照下培养。优选的是，所述的秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，所述第一培养基中的赤霉素浓度为0.3mg/L。优选的是，所述的秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，所述第二培养基中的NAA浓度为1mg/L，KT浓度为0.2mg/L。优选的是，所述的秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，所述第三培养基中6-BA浓度为1mg/L，NAA浓度为0.3mg/L。本专利技术至少包括以下有益效果：第一、对秋枫进行胚性愈伤诱导，通过诱导其子叶，在短时间内培育出大量适合移栽的秋枫种苗，显著提高了秋枫种苗的增殖系数和种苗质量，可实现规模化生产，满足市场上对秋枫种苗的需求；第二、在第一培养基中添加赤霉素可打破秋枫种子休眠，促使秋枫种子发芽、成苗；在第二培养基中添加NAA和KT可降低组织培养中的消耗及成本；在第三培养基中添加6-BA和NAA可有效促进叶和根的生长，获得带根完整植株，无需再单独进行生根培养，直接生根；第三、根据幼苗的生长特点和营养需要配制专用的培养基质，幼苗在其上长势好，植株健壮，无病虫害；第四、基质中的第一基质层由稻壳、锯末、草木灰和珍珠岩经杀菌制得，其疏松通气，吸水保水且不含病原菌；第二基质层由黄壤土、废蜜液、豆渣、秸秆、厩肥和酵素菌经发酵制得，其可为幼苗生长提供丰富的易于吸收的营养，发酵还可使第二基质层中产生大量的有益细菌，可增强幼苗的抗病虫害能力；第三基质层为细沙层，可减缓基质中养分和水分的散失；第五、采用本专利技术方案所得到的秋枫组培苗的繁殖系数高达50倍，组培苗的生根率和移栽苗成活率均在95％以上，有效解决了秋枫工厂化育苗的问题。本专利技术的其他优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本专利技术的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。需要说明的是，下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。实施例1：一种秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，包括以下步骤：A、将秋枫种子用2％的洗洁精水溶液浸泡5min后，线状自来水冲洗15min，再用添加了2滴100mg/L吐温20的0.1％的升汞溶液浸泡消毒8min，无菌水冲洗3次，最后用消毒滤纸去除所述秋枫种子表面水分，得消毒外植体；B、将步骤A中得到的所述消毒外植体接种到第一培养基中，于22℃、光照条件下培养35天，得无菌试管苗，其中，所述第一培养基包括MS培养基，0.1mg/L赤霉素，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂，所述光照条件为，光照强度1500lux，光照时间8h/天；C、将步骤B中得到的所述无菌试管苗的子叶置于第二培养基中，于22℃、所述光照条件下培养30天，得胚状体，其中，所述第二培养基包括MS培养基，0.5mg/LNAA，0.1mg/LKT，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；D、将步骤C中得到的所述胚状体置于第三培养基中，于22℃，所述光照条件培养30天，得完整带根健壮植株，其中，所述第三培养基包括MS培养基，0.5mg/L6-BA，0.1mg/LNAA，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；E、在所述步骤D中获得所述完整带根健壮植株后，向所述第三培养基中加入少量自来水，敞口放置2天，待表面角质形成后，将所述完整带根植株取出，洗净其根部培养基得幼苗，将所述幼苗移栽到基质中培养30天，再将其移栽到大田培养。所述的秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，所述基质，其包括：第一基质层，其由15重量份稻壳、10重量份锯末、5重量份草木灰和5重量份珍珠岩经高温灭菌制得，其厚度为4cm；第二基质层，其位于所述第一基质层上方，其由20重量份黄壤土、15重量份废蜜液、10重量份豆渣、10重量份秸秆、5重量份厩肥和0.3份酵素菌经发酵制得，其厚度为5cm；第三基质层，其本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将秋枫种子用2％的洗洁精水溶液浸泡5min后，线状自来水冲洗15‑20min，再用添加了2‑3滴100mg/L吐温20的0.1％的升汞溶液浸泡消毒8‑10min，无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸去除所述秋枫种子表面水分，得消毒外植体；B、将步骤A中得到的所述消毒外植体接种到第一培养基中，于22‑26℃、光照条件下培养35天，得无菌试管苗，其中，所述第一培养基包括MS培养基，0.1‑0.5mg/L赤霉素，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂，所述光照条件为，光照强度1500lux，光照时间8‑10h/天；C、将步骤B中得到的所述无菌试管苗的子叶置于第二培养基中，于22‑26℃、所述光照条件下培养30天，得胚状体，其中，所述第二培养基包括MS培养基，0.5‑2.0mg/L NAA，0.1‑0.5mg/L KT，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；D、将步骤C中得到的所述胚状体置于第三培养基中，于22‑26℃，所述光照条件培养30天，得完整带根健壮植株，其中，所述第三培养基包括MS培养基，0.5‑1.5mg/L 6‑BA，0.1‑0.5mg/L NAA，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；E、在所述步骤D中获得所述完整带根健壮植株后，向所述第三培养基中加入少量自来水，敞口放置2‑4天后，将所述完整带根植株取出，洗净其根部培养基得幼苗，将所述幼苗移栽到基质中培养30天，再将其移栽到大田培养。...

【技术特征摘要】
1.一种秋枫胚性愈伤成苗的快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将秋枫种子用2％的洗洁精水溶液浸泡5min后，线状自来水冲洗15-20min，再用添加了2-3滴100mg/L吐温20的0.1％的升汞溶液浸泡消毒8-10min，无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸去除所述秋枫种子表面水分，得消毒外植体；B、将步骤A中得到的所述消毒外植体接种到第一培养基中，于22-26℃、光照条件下培养35天，得无菌试管苗，其中，所述第一培养基包括MS培养基，0.1-0.5mg/L赤霉素，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂，所述光照条件为，光照强度1500lux，光照时间8-10h/天；C、将步骤B中得到的所述无菌试管苗的子叶置于第二培养基中，于22-26℃、所述光照条件下培养30天，得胚状体，其中，所述第二培养基包括MS培养基，0.5-2.0mg/LNAA，0.1-0.5mg/LKT，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；D、将步骤C中得到的所述胚状体置于第三培养基中，于22-26℃，所述光照条件培养30天，得完整带根健壮植株，其中，所述第三培养基包括MS培养基，0.5-1.5mg/L6-BA，0.1-0.5mg/LNAA，30mg/L蔗糖和5mg/L琼脂；E、在所述步骤D中获得所述完整带根健壮植株后，向所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓峰，李刚，韦坤华，梁莹，缪剑华，
申请(专利权)人：广西壮族自治区药用植物园，
类型：发明
国别省市：广西;45