一种提取银杏叶黄酮的方法技术

本发明专利技术为一种提取银杏叶黄酮的方法，该方法包括如下步骤：（1）将银杏叶粉碎后进行索式提取，得到粗提物浸膏；（2）将步骤（1）所得的银杏叶粗提物浸膏放于离子液体与盐溶液形成的双水相溶液A中，然后微波进行处理得到吸附完成的双水相溶液；（3）取步骤（2）上层清液，通过B-R缓冲液控制在pH3-6，用大孔吸附树脂常温静态进行吸附24h，（4）用蒸馏水冲洗大孔树脂，然后收集冲洗液，回收离子液体利用；并用乙醇溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，最后得银杏黄酮产物。大大减少了银杏黄酮的损失，也节约了溶剂使用的成本，整个流程中并不使用有毒有害有严重气味的有机溶剂以及其它会造成严重污染的原料，绿色环保。

【技术实现步骤摘要】
一种提取银杏叶黄酮的方法
本专利技术涉及一种提取银杏叶黄酮的新工艺方法，利用新型绿色环保的离子液体以及双水相技术。
技术介绍
银杏为现存古代孑遗植物之一，被称为“活化石”，是我国的特产植物，占世界的70％以上，它的叶和果都具有较高的药用价值，因而受到国内外的重视。银杏叶为银杏科银杏属植物银杏的叶子，在植物学和化学上占有重要地位。银杏叶中的化学成分种类繁多，非常复杂，许多成分具有生物活性，其中人们比较关注的有很多种，含量较高的黄酮类化合物是不容忽视的一种。目前提取银杏叶黄酮的方法主要有以下几种：①有机溶剂提取法：这是国内外使用最广泛的方法。常用的有机溶剂主要有乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮、石油醚等。张永红利用70％乙醇对银杏叶黄酮类物质进行提取(张永红，李艳.银杏叶黄酮类化合物提取方法探讨[J].实用中医药杂志，2007，23(6):396-397)。但是此方法溶剂使用量大，成本较高，杂志含量也较高，并且提取过程中气味大，有毒溶剂残留。②酶提取法：张小清等将酶法与溶剂提取相结合提取银杏叶黄酮类化合物(张小清，程宁，秦蓓等.酶解-溶剂提取银杏叶活性成分工艺条件[J].应用化学，2005，34(10):635-637)。虽然比单纯的溶剂提取方法在一定程度上提高了萃取率，但是萃取过程中仍要用到一些有毒副作用的有机溶剂，并且酶的加入主要是为了通过破坏植物细胞壁来提高效率，并没有起到选择性提取的作用，杂质含量也较高。③超声波提取法：刘晶芝等研究了银杏叶黄酮类化合物的超声波法提取工艺，RieeEvansC对超声波在其中作用做了研究(RieeEvansC，MillerNJ.Therelativeanthioxidantactivetiesofplantderivedployphenloicflavonoids[J].FreeradicalRes.1995，22:375-383)。但是超声波萃取多数还是作为一种辅助提取的手段。④微波提取法：刘峙嵘等提出在利用微波提取黄酮类化合物时要尽量采用鲜原料(刘峙嵘，俞自由，方裕勋等.微波萃取银杏叶黄酮类化合物[J].东华理工学院学报，2005，28(2):151-154)。但是微波萃取在理论和实践方面还存在一些问题，如有机溶剂的残留以及微波穿透物质内部时的衰减问题等，其研究还处于初期阶段。⑤超临界流体萃取法：是最近几十年来才发展起来的一种新型技术，它利用超临界流体作为萃取剂从液体和固体中提取某种高沸点的成分，以达到分离或提纯的目的(JianchunXie，LiliZhu，HongpengLuo.Directextractionofspecificpharmacophoricflavonoidsfromgingkoleavesusingamolecularlyimprintedpolymerforquercetin[J].JournalofChromatographyA，2001，934:1-11)。但是超临界流体需要在较高的压力下进行操作，因此设备费用比较昂贵，而且需高压技术，在设备和过程设计上还缺乏基础数据和系统的方法，在我国的应用还未普及。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种新的提取银杏叶黄酮的工艺方法，这种工艺方法通过利用离子液体双水相对银杏叶中总黄酮进行选择性的提取，并通过适合的大孔树脂进一步提取并将其分开，而又不吸附离子液体，这样就可以将离子液体与黄酮分开，这样，对银杏黄酮既进行了2次提纯，又可将离子液体循环使用，离子液体中前次未被提取的黄酮可继续循环到下一次的提取中，大孔树脂也是可以多次利用的，这样整个流程既没有太多的有害溶剂渗入，也大大减少了银杏黄酮的损失，节约了溶剂使用的成本，并且绿色环保。本专利技术的技术方案为：一种提取银杏叶黄酮的方法，该方法包括如下步骤：(1)将银杏叶在60～80℃烘干至恒重，粉碎过60目筛，并将其装入索式提取器中进行索式提取，得到银杏叶粗提物浸膏；(2)将步骤(1)所得的银杏叶粗提物浸膏放于离子液体与盐溶液形成的双水相溶液A中，其中，双水相溶液A中离子液体浓度控制在0.25～0.45g·mL-1，盐溶液浓度控制在0.06～0.10g·mL-1，粗提物在双水相溶液A中的浓度为0.3～1.0g·mL-1，用微波进行辅助处理15～30分钟，得到吸附完成的双水相溶液；(3)取步骤(2)吸附完成的的双水相溶液中上层清液(即双水相中上层的离子液体)，通过B-R缓冲液控制在pH＝3-6，用大孔吸附树脂常温静态进行吸附24h，其中，前两小时每隔15min震摇5分钟；吸附中的固液体积比为1:5-10；(4)用蒸馏水冲洗大孔树脂至流出液无色，然后收集冲洗液真空干燥，得到离子液体回收利用；并用乙醇溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，最后得银杏黄酮产物。所述的大孔吸附树脂具体为D101，D140，HPD100，或LX-38。所述的的离子液体为[Bmin]BF4、[BPy]BF4或[C4mim]Cl。所述的盐溶液相为NaH2PO4、(NH4)2SO4、K2HPO4·3H2O、K2CO3、Na2CO3或K3PO4。所述步骤(1)中索氏提取步骤中，提取剂为70-95％乙醇，提取剂的量为固液质量比1:5～10，提取温度50-100℃，提取时间为2～4小时，总共提取3-5次，最后并将全部所得提取液混合进行减压蒸馏。所述步骤(4)中大孔树脂洗脱所用乙醇溶液的体积浓度为70％。本专利技术的有益效果为：银杏黄酮苷极性大，一般可溶于水、醇、丙酮、乙酸乙酯等。而银杏叶中含有的内酯类化合物易溶于低级醇类，在水中溶解度很低，多糖一般不溶于水。本专利技术通过先对银杏叶粉末进行粗提，制成银杏粗提物，最大限度的将黄酮类物质从银杏叶粉末中提出，当然银杏叶粗提物中还含有内酯类等其他化合物，此时引入离子液体与盐溶液形成的双水相A，在微波辅助下可有选择性的对银杏黄酮类物质进行吸附，一些多糖类等物质就会被筛除。最后通过大孔树脂可将离子液体与银杏黄酮类物质分开，离子液体双水相与大孔树脂共同联用，好处是对银杏黄酮既进行了2次提纯，又可将离子液体加一定量的乙醇减压蒸馏后回收循环使用(由于键能关系醇的加入有助于亲水性离子液体中水的蒸离)，离子液体中前次未被提取的黄酮可继续循环到下一次的提取中，这样大大减少了银杏黄酮的损失，也节约了溶剂使用的成本，整个流程中并不使用有毒有害有严重气味的有机溶剂以及其它会造成严重污染的原料，绿色环保。经此工序纯化后黄酮平均重量含量可达29.2％(大于国家要求标准24％)，平均收率3.51％，查阅相关文献，并按文献方法利用大孔树脂进行提取，本专利技术比其纯度提高约3.5％，收率提高约0.4％(本专利技术中所用银杏叶制成的粗提物中含有黄酮类物质约为3.8％)。具体实施方式下面通过具体实例对本专利技术作进一步详细描述，以助于理解本专利技术的内容。提取工艺如下：⑴将干燥的银杏叶粉碎成粗粉过60目筛，用10倍量70～95％乙醇进行索氏提取2～4小时，共提取3-5次，收集所有提取液；⑵将提取液在60℃条件下减压蒸馏60min浓缩制成银杏粗提物浸膏；⑶取粗提物浸膏放于一定浓度配比的离子液体与盐溶液形成的双水相溶液A中，其中离子液体浓度控制在0.25～0.45g·mL-1，盐溶液浓度控制在0.06～0.10g·mL-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提取银杏叶黄酮的方法，其特征为该方法包括如下步骤：（1）将银杏叶在60~80℃烘干至恒重，粉碎过60目筛，并将其装入索式提取器中进行索式提取，得到银杏叶粗提物浸膏；（2）将步骤（1）所得的银杏叶粗提物浸膏放于离子液体与盐溶液形成的双水相溶液A中，其中，双水相溶液A中离子液体浓度控制在0.25~0.45g·mL‑1，盐溶液浓度控制在0.06~0.10 g·mL‑1，粗提物在双水相溶液A中的浓度为0.3~1.0g·mL‑1，用微波进行辅助处理15~30分钟，得到吸附完成的双水相溶液；（3）取步骤（2）吸附完成的的双水相溶液中上层清液（即双水相中上层的离子液体），通过B‑R缓冲液控制在pH＝3‑6，用大孔吸附树脂常温静态进行吸附24h，其中，前两小时每隔15min震摇5分钟；吸附中的固液体积比为1:5‑10；（4）用蒸馏水冲洗大孔树脂至流出液无色，然后收集冲洗液真空干燥，得到离子液体回收利用；并用乙醇溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，最后得银杏黄酮产物；所述的的离子液体为[Bmin]BF4、[BPy]BF4或[C4mim]Cl；所述的盐溶液相为NaH2PO4、（NH4）2SO4、K2HPO4•3H2O、K2CO3、Na2CO3或K3PO4。...

【技术特征摘要】
1.一种提取银杏叶黄酮的方法，其特征为该方法包括如下步骤：(1)将银杏叶在60～80℃烘干至恒重，粉碎过60目筛，并将其装入索式提取器中进行索式提取，得到银杏叶粗提物浸膏；(2)将步骤(1)所得的银杏叶粗提物浸膏放于离子液体与盐溶液形成的双水相溶液A中，其中，双水相溶液A中离子液体浓度控制在0.25～0.45g·mL-1，盐溶液浓度控制在0.06～0.10g·mL-1，粗提物在双水相溶液A中的浓度为0.3～1.0g·mL-1，用微波进行辅助处理15～30分钟，得到吸附完成的双水相溶液；(3)取步骤(2)吸附完成的的双水相溶液中上层清液(即双水相中上层的离子液体)，通过B-R缓冲液控制在pH＝3-6，用大孔吸附树脂常温静态进行吸附24h，其中，前两小时每隔15min震摇5分钟；吸附中...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文林，李俊飞，钱浩智，岳颖，李春利，王福宽，李柏春，王晓文，
申请(专利权)人：河北工业大学，
类型：发明
国别省市：天津;12