细果角茴香提取物在制备抗菌药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种细果角茴香提取物在制备抗菌药物中的应用,其特征在于：该细果角茴香提取物是指从罂粟科角茴香属细果角茴香(Hypecoumleptocarpum Hook.f.et Thoms.)的干燥全草中采用醇提、大孔树脂柱纯化获得的总生物碱含量为30~95%、总黄酮含量为5~60%的提取物，其与化学药或中药或天然药物组成的抗菌药物的各种剂型中至少包含有该细果角茴香提取物。本发明专利技术通过体外和体内实验证明，细果角茴香提取物可以用于制备抗菌的药物。

【技术实现步骤摘要】
细果角茴香提取物在制备抗菌药物中的应用
本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及细果角茴香提取物在制备抗菌药物中的应用。
技术介绍
当全身防御功能降低时，外界侵入细菌或真菌迅速繁殖，极易引起感染性疾病。抗生素是细菌性感染疾病的首选，最初抗生素的应用使人类许多严重的细菌性感染得到了有效的控制，但抗生素的毒副作用相当大，严重者可造成耳聋等副作用；同时，长期使用抗生素易造成体内菌群失调，诱导多重耐药的致病菌、真菌的二重感染，增加治疗上的难度。由天然植物制成的具有抗菌作用的复方或单方制剂越来越多的得到研究与证实，因其不良反应相对较轻且不易产生耐药性等优点逐渐受到学者们的重视。大多数天然产物的抗菌机制是调动机体内在的抗菌积极因素以及降低细菌毒理和减轻细菌对组织细胞的破坏作用等途径起到抗菌作用，少数的抗菌机制是其有效成分直接作用于菌体，起到抑制和杀灭作用。近年来，随着耐药菌株的增加、抗生素的滥用，抗菌天然药已成为研究的热点。细果角茴香为罂粟科角茴香属细果角茴香(HypecoumleptocarpumHook.f.etThoms.)的干燥全草，生长于海拔4300米以下的草原、草甸、砂砾地上。《晶珠本草》记载其味苦性凉，清血热、温热和毒热；《西藏常用中草药》称其有解热镇痛、消炎解毒之功效，可治伤风感冒、头痛、四肢关节疼痛、胆囊炎，并解食物中毒；《陕甘宁青中草药选》中称：细果角茴香能治流感、咽喉肿痛、目赤等症。现有的文献表明，细果角茴香中主要含有生物碱类和黄酮类化合物；其乙醇提取物可减少内毒素炎症过程中肺组织炎症反应和炎性细胞的浸润，降低外周血白细胞数，抑制TNF-α、IL-6的释放；细果角茴香生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等细菌生长有一定的抑制作用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种细果角茴香提取物在制备抗菌药物中的应用。为解决上述问题，本专利技术所述的细果角茴香提取物在制备抗菌药物中的应用,其特征在于：该细果角茴香提取物是指从罂粟科角茴香属细果角茴香(HypecoumleptocarpumHook.f.etThoms.)的干燥全草中采用醇提、大孔树脂柱纯化获得的总生物碱含量为30~95%、总黄酮含量为5~60%的提取物，其与化学药或中药或天然药物组成的抗菌药物的各种剂型中至少包含有该细果角茴香提取物。所述细果角茴香提取物是由下述方法制得：⑴细果角茴香药材粉粹至20~60目后，加入其质量6~15倍的体积浓度为10~95%的乙醇，在室温下、浸提次数为2~4次、每次24~48小时的条件下进行浸提，得到提取液，该提取液在真空度为0~-0.09MPa的条件下经真空减压回收乙醇至流浸膏，即得细果角茴香提取物；⑵所述细果角茴香提取物经大孔树脂柱纯化后，依次用3~10倍柱体积的水和体积浓度为60~95%的乙醇洗脱至收集液无色，收集醇洗脱液，该醇洗脱液在真空度为0~-0.09MPa的条件下经真空减压回收乙醇至干，即得细果角茴香提取物。本专利技术与现有技术相比具有以下优点：1、本专利技术中细果角茴香提取物体外抗菌作用：试验菌株：⑴标准菌株：共计10株大肠埃希菌ATCC25922株金黄色葡萄球菌ATCC25925株绿脓假单胞菌ATCC27853株甲型溶血性链球菌32209株乙型溶血性链球菌32210株肺炎球菌32401株脑膜炎奈瑟氏菌29010株流感嗜血杆菌58535株肺炎克雷伯菌46104株白色假丝酵母菌85021株以上标准菌株冻干菌株购自冻干菌株购自中国科学院微生物研究所菌种提供中心。⑵临床分离株：共计430株金黄色葡萄球菌150株，编号：SPC001-SPC150甲型溶血性链球菌80株，编号：AST001-AST080乙型溶血性链球菌80株，编号：BST001-BAT080肺炎球菌35株，编号：PSS001-PSS035肺炎克雷伯菌60株，编号：KLB001-KLB060流感嗜血杆菌25株，编号：FLC001-FLC025以上临床分离株由西安交通大学医学院提供，均经TakeⅡ全自动数字细菌鉴定仪鉴定。实验菌液配制：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯菌接种于MH肉汤，置普通培养箱37℃、24小时培养；甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、流感嗜血杆菌接种于5%小牛血清肉汤，5%CO2培养箱37℃、48小时培养；白色假丝酵母菌接种于沙保弱氏肉汤，置普通培养箱37℃、48小时培养；比浊法进行细菌计数，转种于平板测定菌液中活菌数，即菌落形成单位（CFU/ml）。用稀释液调配成106CFU/ml菌液备用。试验仪器：CO2培养箱、普通培养箱、菌落计数仪等。培养基：5%葡萄糖肉汤、MH培养基、沙保弱氏培养基、5%小牛血清肉汤、血平板、巧克力平板培养基：按《现代微生物培养基和试剂手册》制备。①最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）的测定：a对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯菌的MIC、MBC测定：将细果角茴香提取物用含酚红指示剂的葡萄糖肉汤由20%（W/V）为起点进行连续二倍梯度稀释，依次加到96孔细胞培养板上，0.2ml/孔。再加入浓度为106CFU/ml的试验菌液0.01ml/孔。同时设立细菌以及培养基对照。置4℃作用12小时，于普通培养箱37℃、24小时培养，观察结果。无细菌生长孔中（培养液颜色保持红色）所含最小药物浓度为最小抑菌浓度（MIC）。再依次将未见细菌生长各孔的培养物吸取0.1ml点种于MH平板，置普通培养箱37℃、24小时培养，无菌落生长的点种区域所对应的药物最小浓度为最小杀菌浓度（MBC）。b对甲型、乙型溶血性链球菌，肺炎球菌、脑膜炎球菌、流感嗜血杆菌的MIC、MBC测定：将细果角茴香提取物用含酚红指示剂的5%小牛血清肉汤由20%（W/V）为起点进行连续二倍梯度稀释，依次加到96孔细胞培养板上，0.2ml/孔。再加入浓度为106CFU/ml的试验菌液0.01ml/孔。同时设立细菌以及培养基对照。置4℃作用12小时，置5%CO2培养箱37℃、48小时培养，观察结果。无细菌生长孔中（培养液颜色保持红色）所含最小药物浓度为最小抑菌浓度（MIC）。将无细菌生长孔中培养物0.1ml依次点种到营养平板（甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎球菌、脑膜炎球菌、流感嗜血杆菌接种于巧克力色平板），置5%CO2培养箱37℃、48小时培养，无菌落生长的点种区域所对应的药物最小浓度为MBC。c对白色假丝酵母菌的MIC、MBC测定：将细果角茴香提取物用含酚红指示剂的沙保弱氏（SabourraudSB）肉汤由20%（W/V）为起点在96孔细胞培养板上进行0.2ml/0.2ml连续二倍梯度稀释，依次加入106CFU/ml的菌液0.01ml，同时设立细菌及培养基对照，4℃作用12小时；置普通培养箱37℃、48小时培养，观察结果。无细菌生长的孔中所含的药物最小浓度为MIC。将无细菌生长孔中培养物0.1ml依次转种到沙保弱氏平板，置普通培养箱37℃、48小时培养，无菌落生长的点种区域所对应的药物最小浓度为MBC。②实验结果：ⅰ细果角茴香提取物对10株标准菌株的MIC、MBC见表1。表1细果角茴香提取物对标准菌株的MIC和MBC从表1可见，细果角茴香提取物对实验所选用的1本文档来自技高网...

【技术保护点】
细果角茴香提取物在制备抗菌药物中的应用,其特征在于：该细果角茴香提取物是指从罂粟科角茴香属细果角茴香的干燥全草中采用醇提、大孔树脂柱纯化获得的总生物碱含量为30~95%、总黄酮含量为5~60%的提取物，其与化学药或中药或天然药物组成的抗菌药物的各种剂型中至少包含有该细果角茴香提取物。

【技术特征摘要】
1.细果角茴香提取物在制备抗菌药物中的应用,其特征在于：该细果角茴香提取物是指从罂粟科角茴香属细果角茴香的干燥全草中采用醇提、大孔树脂柱纯化获得的总生物碱含量为30~95%、总黄酮含量为5~60%的提取物，其与化学药或中药或天然药物组成的抗菌药物的各种剂型中至少包含有该细果角茴香提取物；所述细果角茴香提取物是由下述方法制得：⑴细果角茴香药材粉粹至20~60目后，加入其质量6~15倍的体积...

【专利技术属性】
技术研发人员：文怀秀，邵赟，梅丽娟，陶燕铎，苑祥，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：青海;63