一种含有染料EvaGreen和双热启动酶的定量PCR方法技术

技术编号:12570687 阅读:105 留言:0更新日期:2015-12-23 12:43
本发明专利技术涉及一种含有染料EvaGreen和双热启动酶的定量PCR方法,其特征在于包括如下步骤:(1)构建PCR反应体系,包括:待测样品;与所述待测样品中待测模板互补的正向引物和反向引物;荧光染料EvaGreen;及双热启动酶,包括HotStar Taq DNA聚合酶和Anti Taq DNA聚合酶;(2)在所述PCR反应体系中,对所述待测模板进行PCR扩增,以形成双链DNA-EvaGreen荧光染料复合物;(3)PCR扩增过程之中或之后,检测所述PCR反应体系的荧光值,以确定扩增产物的数量,从而确定待测模板的数量。本发明专利技术的定量PCR方法具有高精确度、高效率、高灵敏度、高特异性且价格低廉的特点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种含有染料EvaGreen和双热启动酶的定量PCR方法,其特征在于包括如下步骤:(1)构建PCR反应体系,包括:待测样品;与所述待测样品中待测模板互补的正向引物和反向引物;荧光染料EvaGreen;及双热启动酶,包括:HotStar Taq DNA聚合酶和Anti Taq DNA聚合酶;(2)在所述PCR反应体系中,对所述待测模板进行PCR扩增,以形成双链DNA‑EvaGreen荧光染料复合物;(3)PCR扩增过程之中或之后,检测所述PCR反应体系的荧光值,以确定扩增产物的数量,从而确定所述待测样品中所述待测模板的数量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:韩武梅吴国祥刘振柴勋张大挺梁乐
申请(专利权)人:上海科医联创生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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