桥接双环核苷制造技术

本发明专利技术涉及2’-C-桥接双环核苷和核苷酸，以及包含至少一个2’-C-桥接双环核苷酸的寡核苷酸。本发明专利技术进一步提供包含所述核苷，核苷酸，以及寡核苷酸的药物组合物，以及它们相应的使用和合成方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】桥接双环核音 相关申请 本申请要求2013年3月15日提交的美国临时申请No.61/791，704的优先权和权 益，通过提及将其完整收入本文。 专利
本专利技术设及经修饰的核巧，核巧酸，W及寡核巧酸，当施用到患者时，具有合成，效 力，递送效率，目标特异性，稳定性，和/或毒性的优势。 专利技术背景 反义寡核巧酸抑制物的寡核巧酸化学模式或基序具有改善抑制物的递送，稳定 性，效力，特异性和/或毒性概况的潜能，并且运是需要的，用于在治疗背景中有效地祀向 RNA功能。[000引专利技术概述 本专利技术设及经修饰的核巧，核巧酸，和寡核巧酸，其包含至少一个2' -C-桥接双环 核巧酸（CBBN)，W及包含经修饰的寡核巧酸的药物组合物。本专利技术还提供运些寡核巧酸，W 及合成中间物的使用和合成的方法。在多个实施方案中，寡核巧酸为反义抑制剂，其提供效 力，递送效率，目标特异性，稳定性，和/或毒性的优势。 在一个方面，本专利技术提供具有式I结构的2' -C-桥接双环核巧或核巧酸（CBBN):其中X为N或S;Wi和W2独立地为H，醇保护基团，憐酸醋，硫代憐酸醋，二或S憐 酸醋（di-or tri-phosphate)，或亚憐酸胺；胖3独立地为不存在（null)，H，0,胺保护基团， 亚憐酸胺，氨基憐酸醋，二氨基憐酸醋（phosphordiamidate ester),甲基，烷基，环烷基，氨 甲酯（carboxamide),糖，脂肪酸，或本文的其它共辆分子，-Ci4(〇)R，或-C00R，其中R为 芳基，线性或环烷基或締基，糖，脂肪酸，或其它分子缀合物，如药物缀合物；B为核碱基。在 一些实施方案中，核碱基是喀晚碱基。在其它实施方案中，核碱基是嚷岭碱基。 在另一个方面，本专利技术提供寡核巧酸，其包含至少一个2'-C-桥接双环核巧酸。寡 核巧酸中2' -C-桥接双环核巧酸的数量可W不同。例如，2' -C-桥接双环核巧酸的数量可 W为至少约10%的核巧酸，至少约25 %的核巧酸，至少约50%的核巧酸，或至少约75%的 核巧酸。寡核巧酸的长度也可W不同。例如，本专利技术的寡核巧酸长度可W为从约5个至约 50个核巧酸，或长度为约10至约25个核巧酸。在其它实施方案中，寡核巧酸长度可能少于 约10个核巧酸（例如，从约5个至约10个核巧酸）或长度少于约8个核巧酸（例如，从约 5个至约8个核巧酸）。 寡核巧酸还可W包括至少一个具有2'修饰的核巧酸，2'修饰选自2'-脱氧， 2' -0-甲基，2' -氣代，和2'至4'桥接结构。在特定实施方案中，寡核巧酸还包含骨架修 饰，例如硫代憐酸醋连接和/或二氨基憐酸连接。在其它实施方案中，寡核巧酸包括至少一 个嚷岭和/或喀晚碱基修饰。例如，碱基修饰可W在喀晚碱基的C-5位置和/或嚷岭碱基 的C-8位置。在一些实施方案中，寡核巧酸包括一个或多个吗嘟代核巧酸。 在多个实施方案中，寡核巧酸包含与人微小RNA的核巧酸序列至少基本相同或互 补的核巧酸序列。例如，寡核巧酸可W包含与人miR-15a，miR-15b，miR-29,miR-92,miR-14 3,miR-145,miR-195,miR-206,miR-208a,miR-208b,miR-378,miR-451 和 / 或miR-499 序列 基本互补的核巧酸序列。在又进一步的实施方案中，寡核巧酸包含与人微小RNA的核巧酸 序列完全相同或互补的核巧酸序列。在多个实施方案中，寡核巧酸的序列可W经设计使得 模仿miRNA或通过反义抑制祀向miRNA。 在另一个方面，本专利技术提供药物组合物，其包含有效量的本文所述的寡核巧酸，或 其药学上可接受的盐，W及药学上可接受的载体或稀释剂。药学上可接受的载体可W包括 胶体分散系统，大分子复合物，纳米胶囊，微球体，珠，水包油乳剂，胶束，混合胶束，或脂质 体。在一个实施方案中，药物组合是水性制剂。 在又一个方面，本专利技术提供通过反义作用降低或抑制RNA的方法，包括在细胞中 降低或抑制mRNA目标或微小RNA目标。方法包含使细胞接触本文公开的寡核巧酸。在多 个实施方案中，细胞可W是哺乳动物细胞。在一个实施方案中，细胞可W是例如屯、脏细胞。 在另一个实施方案中，细胞可W在体内或离体接触寡核巧酸。 在进一步的方面，本专利技术提供在受试者中预防或治疗与微小RNA相关或由微小 RNA介导的状况的方法，包含向受试者施用如本文所述的包含祀向miRNA的寡核巧酸的药 物组合物。在多个实施方案中，通过肠胃外施用或直接注射到目标组织中来施用药物组合 物。在其它实施方案中，通过口服，经皮，持续释放，受控释放，延迟释放，栓剂，导管，或舌下 施用来施用药物组合物。 在再一个方面，本专利技术提供合成2'-C-桥接双环核巧，2'-C-桥接双环核巧酸或对 应的亚憐酸胺，或含有2' -C-桥接双环核巧酸的寡核巧酸的方法。方法包含使用例如核糖 作为起始材料，转化为甲基4, 4-双甲横酷基氧基甲基-2-径基甲基巧喃糖（methyl4, 4-bi 3111635^1〇巧11161：117；1-2-117化0巧11161：1171化阿]1036)衍生物，接着是衍生物的糖基化。糖基化的 材料的2-径基甲基基团接着转化为受保护的胺，其接着在核巧的a表面与对应的4-甲横 酷基氧基甲基基团环化W给出完全受保护的氮杂双环核巧，其易于通过标准的保护基化学 转化为核巧亚憐酷胺。用于合成的替代方法描述于2014年3月16日提交的，KudVagle 的题目为"双环核巧的合成"的美国临时专利申请，其通过提述完整并入本文。 通过下面的专利技术详述和实施例，本专利技术的其它方面和实施方案将是明显的。 附图简述 图1示出了胺2' -C-桥接双环核巧的合成。 图2示出了通过二氨基憐酸醋连接所连接的2' -C-桥接双环核巧。 图3A示出了示例性的二甲氧基S苯甲基值MTr)-保护的胺2' -C-桥接双环核巧 亚憐酷胺。图3B示出了DMTr-保护的胺2' -C-桥接双环核巧的内部亚憐酷胺衍生物。图 3C示出了示例性的DMTr-和S氣乙酸-保护的胺2'-C-桥接双环核巧亚憐酷胺。图3D示 出了示例性的DMTr-保护的脂肪酸缀合的2' -C-桥接双环核巧亚憐酷胺。图3E示出了示 例性的DMTr-保护的糖缀合的2' -C-桥接双环核巧亚憐酷胺。 图4A示出了示例性的二甲氧S苯甲基值MTr)-保护的胺2' -C-桥接双环核巧亚 憐酷胺的合成。图4B示出了DMTr-保护的胺2' -C-桥接双环核巧的内部亚憐酷胺衍生物 的合成。图4C示出了示例性的DMTr-保护的脂肪酸缀合的胺2' -C-桥接双环核巧亚憐酷 胺的合成。图4D示出了示例性的DMTr-保护的糖缀合的胺2' -C-桥接双环核巧亚憐酷胺 的合成。 图5A提供了锁定核巧（LNA)，其aminoLNA对应物，W及2' -0, 4-C-乙締-桥接核 巧（oxoENA)和其aminoENA对应物的亲和力增加（ATm,c/修饰）的对比图。图5B提供了 胺2'C-桥接双环核巧（aminoCBBN)与其oxoCBBN对应物对应物的亲和力增加（ATm,c/修 饰）对比图。如所示，胺2'C-桥接双环核巧赋予比其oxoCBBN对应物多得多的亲和力每修 饰。此外，寡核巧酸中单个和多个amino本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种寡核苷酸，其包含至少一个2’‑C‑桥接双环核苷酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：K瓦格尔，
申请(专利权)人：米拉根医疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US