本发明专利技术提供了一种鉴定玉米品种纯度的成套引物及应用。本发明专利技术的成套引物由引物对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对6、引物对7和引物对8组成。通过实验证明：本发明专利技术的成套引物具有杂合度高、品种识别率高、检测效率高和检测成本低等特点，能快速、准确的获得种子纯度鉴定结果。在对玉米单交种进行纯度鉴定时无需再做品种纯度鉴定引物的筛选工作及小样本实验等步骤，而且该成套引物不再局限于只能鉴定个别品种纯度，可适用于国内绝大部分品种纯度快速鉴定。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体涉及。
技术介绍
玉米目前是全球第一大作物，也已跃升为我国第一大作物。玉米产量的提高主要 得益于杂种优势的利用及优良杂交种的普及。而优良杂交种的推广应用需要大量优质的种 子。种子的品种纯度是评价种子质量的最重要的指标之一。近年来据市场统计，玉米种子 纯度在国家标准以下每下降1%，将造成减产214kg/hm，即3%左右。目前品种纯度鉴定主 要有传统种植形态学鉴定法、同功酶和种子贮藏蛋白、分子标记纯度鉴定方法。 传统种植鉴定方法种植周期长、费用高，同功酶和种子贮藏蛋白鉴定法实验结果 随发育时期、取样部位和环境条件而变化，而且同功酶和种子贮藏蛋白法对于亲缘关系较 近的材料没有区分能力，使得这两种方法在品种纯度鉴定应用上受到一定的限制。SSR标记 具有快速、准确，信息含量高、呈共显性遗传、易于分析、重复可靠等特点，为品种纯度鉴定 提供了准确、可靠、快速、方便的方法。SSR引物的选择直接影响到SSR纯度鉴定结果的准确性和可重复性，对于承担委 托检验及市场鉴定抽查检验的种子检测中心，在进行纯度鉴定时，在不了解制种亲本一致 性、制种隔离条件等情况下，要获得准确的纯度鉴定结果需要进行引物筛选、小样本实验等 繁琐步骤，不能满足纯度快速鉴定的需要。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种鉴定玉米品种纯度的成套引物。 本专利技术提供的鉴定玉米品种纯度的成套引物为由引物对（1)_(8)组成： (1)为由SEQIDNo.1所示的单链DNA分子和SEQIDNo. 2所示的单链DNA分子 组成的引物对1 ; (2)为由SEQIDNo. 3所示的单链DNA分子和SEQIDNo. 4所示的单链DNA分子 组成的引物对2; (3)为由SEQIDNo. 5所示的单链DNA分子和SEQIDNo.6所示的单链DNA分子 组成的引物对3; (4)为由SEQIDNo.7所示的单链DNA分子和SEQIDNo. 8所示的单链DNA分子 组成的引物对4 ; (5)为由SEQIDNo. 9所示的单链DNA分子和SEQIDNo. 10所示的单链DNA分子 组成的引物对5 ; (6)为由SEQIDNo. 11所示的单链DNA分子和SEQIDNo. 12所示的单链DNA分 子组成的引物对6; (7)为由SEQIDNo. 13所示的单链DNA分子和SEQIDNo. 14所示的单链DNA分 子组成的引物对7; (8)为由SEQIDNo. 15所示的单链DNA分子和SEQIDNo. 16所示的单链DNA分 子组成的引物对8。 本专利技术的另一个目的是提供一种鉴定玉米品种纯度的PCR试剂组。 本专利技术提供的鉴定玉米品种纯度的PCR试剂组由PCR试剂1、PCR试剂2、PCR试剂 3、PCR试剂4、PCR试剂5、PCR试剂6、PCR试剂7和PCR试剂8组成； 所述PCR试剂1包括上述成套引物中的引物对1 ; 所述PCR试剂2包括上述成套引物中的引物对2; 所述PCR试剂3包括上述成套引物中的引物对3; 所述PCR试剂4包括上述成套引物中的引物对4 ; 所述PCR试剂5包括上述成套引物中的引物对5 ; 所述PCR试剂6包括上述成套引物中的引物对6 ; 所述PCR试剂7包括上述成套引物中的引物对7 ; 所述PCR试剂8包括上述成套引物中的引物对8。 上述PCR试剂组中，每个所述引物对中的各条引物的物质的量相同。 本专利技术还有一个目的是提供一种鉴定玉米品种纯度的试剂盒。 本专利技术提供的鉴定玉米品种纯度的试剂盒包括上述成套引物或上述PCR试剂组。 上述成套引物或上述PCR试剂组或上述试剂盒在鉴定玉米品种纯度中的应用也 属于本专利技术的保护范围。 上述应用中，所述玉米品种为郑单958、先玉335、浚单20、鲁单981、金海5号、中 科11、蠡玉16、中单909、登海605、伟科702、京科968、东单80、农华101、德美亚1号、京科 糯2000、KWS2564、良玉88号或龙单59。 本专利技术的最后一个目的是提供一种鉴定待测玉米品种纯度的方法。 本专利技术提供的鉴定待测玉米品种纯度的方法包括如下步骤： 1)用上述成套引物中的引物对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对 6、引物对7和引物对8分别对待测玉米的籽粒群中每个个体进行PCR扩增，分别得到引物 对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对6、引物对7和引物对8对应的PCR扩 增产物；电泳检测所述引物对1、引物对2、引物对3、引物对4、引物对5、引物对6、引物对7 和引物对8对应的PCR扩增产物； 若所述籽粒群中某个个体的PCR扩增产物满足如下条件：所述引物对1、引物对2、 弓丨物对3、引物对4、引物对5、引物对6、引物对7和引物对8对应的PCR扩增产物带型均为 目标品种的特征带型，则该个体为或候选为目标品种； 若所述籽粒群中某个个体的PCR扩增产物不满足上述条件，则该个体为或候选为 非目标品种；2)用如下公式计算所述待测玉米品种纯度： 品种纯度=待测玉米的籽粒群中属于目标品种的个体数/待测玉米的籽粒群个 体数X100%。 上述方法中，所述PCR扩增的模板为待测玉米品种的基因组DNA。 上述方法中，所述目标品种为郑单958或先玉335。 上述方法中，若所述目标品种为郑单958时， 所述引物对1的PCR扩增产物含有大小为322bp和354bp的DNA片段； 所述引物对2的PCR扩增产物含有大小为364bp和380bp的DNA片段； 所述引物对3的PCR扩增产物含有大小为202bp和213bp的DNA片段； 所述引物对4的PCR扩增产物含有大小为221bp和237bp的DNA片段； 所述引物对5的PCR扩增产物含有大小为393bp和413bp的DNA片段； 所述引物对6的PCR扩增产物含有大小为185bp的DNA片段； 所述引物对7的PCR扩增产物含有大小为266bp的DNA片段； 所述引物对8的PCR扩增产物含有大小为265bp和269bp的DNA片段； 若所述目标品种为先玉335时， 所述引物对1的PCR扩增产物含有大小为350bp的DNA片段； 所述引物对2的PCR扩增产物含有大小为364bp和382bp的DNA片段； 所述引物对3的PCR扩增产物含有大小为191bp和208bp的DNA片段； 所述引物对4的PCR扩增产物含有大小为237bp的DNA片段； 所述引物对5的PCR扩增产物含有大小为408bp和413bp的DNA片段； 所述引物对6的PCR扩增产物含有大小为185bp和190bp的DNA片段； 所述引物对7的PCR扩增产物含有大小为253bp和267bp的DNA片段； 所述引物对8的PCR扩增产物含有大小为263bp和275bp的DNA片段。 本专利技术建立了一套适用于目前国内审定推广品种纯度鉴定引物组合，在进行玉米 品种纯度鉴定时，只需要8个引物组成的成套引物直接进行品种纯度鉴定，而且鉴定结果 准确、稳定。通过实验证明：本专利技术的成套引物具有杂合度高、品种识别率高、检测效率高和 检测成本低等特点，能快速、准确的获得种子纯度鉴定结果。在对玉米单交种进行纯度鉴定 时无需再做品种纯度鉴定引物的筛选工作及小样本实验等步骤，而且该成套引物不再局限 于只能鉴定个别品种纯度本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种鉴定玉米品种纯度的成套引物，为由引物对(1)‑(8)组成：(1)为由SEQ ID No.1所示的单链DNA分子和SEQ ID No.2所示的单链DNA分子组成的引物对1；(2)为由SEQ ID No.3所示的单链DNA分子和SEQ ID No.4所示的单链DNA分子组成的引物对2；(3)为由SEQ ID No.5所示的单链DNA分子和SEQ ID No.6所示的单链DNA分子组成的引物对3；(4)为由SEQ ID No.7所示的单链DNA分子和SEQ ID No.8所示的单链DNA分子组成的引物对4；(5)为由SEQ ID No.9所示的单链DNA分子和SEQ ID No.10所示的单链DNA分子组成的引物对5；(6)为由SEQ ID No.11所示的单链DNA分子和SEQ ID No.12所示的单链DNA分子组成的引物对6；(7)为由SEQ ID No.13所示的单链DNA分子和SEQ ID No.14所示的单链DNA分子组成的引物对7；(8)为由SEQ ID No.15所示的单链DNA分子和SEQ ID No.16所示的单链DNA分子组成的引物对8。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王凤格，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京;11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。