本发明专利技术公开了一种前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒，属于临床体外检测试剂技术领域。本发明专利技术试剂盒包括试剂R1、试剂R2。试剂R1中含有Tris-Hcl缓冲液，聚乙二醇-6000，防腐剂庆大霉素，乙二胺四乙酸，牛血清白蛋白；试剂R2中含有Tris-Hcl缓冲液，防腐剂庆大霉素，乙二胺四乙酸，牛血清白蛋白，抗人前白蛋白抗体。通过在试剂R1、试剂R2中加入防腐剂庆大霉素，稳定剂牛血清白蛋白，有效的提高了试剂盒的稳定性，并采用新型表面活性剂吐温-20，不仅显著改善测定的性能，而且增强了试剂的稳定性和抗干扰能力，试剂的准确度高，有利于在市场中进一步的推广使用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及临床体外检测试剂
，特别涉及一种前白蛋白检测试剂，还涉 及使用此检测试剂的检测方法。
技术介绍
前白蛋白，又被称为转甲状腺素蛋白，由肝细胞合成。它是由4个相同亚基组成的 四聚体，分子量为55. OkD，含糖量0. 5%，含色氨酸3. 15%。前白蛋白具有重要的生物学活性。 它与甲状腺素结合球蛋白以及白蛋白协同参与甲状腺素的运转。它在甲状腺激素运转过程 中的作用仅次于甲状腺素结合球蛋白（TBG)。TBG负责转运甲状腺激素总量的70%-75%，前 白蛋白则转运15%-20%，白蛋白转运的更少些。在正常生理状态下，甲状腺素几乎全部通过 与这三种蛋白结合转运到达靶细胞。 前白蛋白另一重要功能是协助视黄醇结合蛋白（RBP)转运视黄醇。当机体需要维 生素 A时，贮存在肝脏中的视黄醇酯被水解，游离的视黄醇与RBP结合，被分泌到血液循环 中，再与PA结合，所形成的视黄醇-RBP-PA大分子结合物，通过循环转运到有特异性RBP受 体结合部位的靶组织中。一旦进入靶细胞，视黄醇-RBP-PA结合物即分离。 血清前白蛋白能敏感反映肝脏蛋白质代谢情况，它比白蛋白更能早期反应肝细胞 损害，它的血清浓度明显受营养状况及肝功能改变的影响，有30%患者白蛋白正常而前白 蛋白降低，多数肝病患者前白蛋白均降低50%以上，所以前白蛋白被认为是判断早期肝脏 损害的灵敏指标。此外，在预测晚期癌症患者生存时间方面，前白蛋白也是一项有价值的指 标。 前白蛋白的检测方法主要有电泳法、单项免疫扩散法，免疫电泳法，免疫比浊法。 其中，电泳法所测得的血清白蛋白并非真值；单项免疫扩散法和免疫电泳法虽然特异性高， 但这两种方法操作较为繁琐，所需要的时间都较长，过度浪费资源；免疫比浊法是近年来应 用最多，最有价值的检测方法。免疫比浊法以其测定原理，可分为散射比浊法和透射比浊法 两类。散射比浊法是利用溶液中抗原抗体反应所形成的复合物颗粒被一定波长的光照射 时，发生散射，通过检测散射光强度，计算出样品中前白蛋白的量。透射比浊法则是基于抗 原抗体复合物颗粒形成后，使透射光减少，根据吸光度值推算前白蛋白量。前白蛋白免疫 比浊法检测试剂盒原理是基于前白蛋白与前白蛋白抗体之间的反应。先将样本与缓冲液孵 育，然后加入前白蛋白抗体试剂，在340nm波长下读取混合液的吸光度，与样本中前白蛋白 的浓度成正比。免疫比浊法具有投资成本低，简单易操作，测试速快，精密度重复性好等优 点，逐渐被广泛应用于临床体液中蛋白质含量检测的领域。但是普通的前白蛋白免疫比浊 法存在灵敏度低，准确度低的问题，限制了进一步的该技术的推广。
技术实现思路
针对以上存在的问题，本专利技术提供一种检验前白蛋白的试剂以及使用该试剂检测 前白蛋白含量的方法。该试剂盒采用免疫比浊法，可以有效检测血清中前白蛋白含量，并且 准确度高，灵敏度较好。 本专利技术一种准确度高的前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒，包括试剂Rl和试剂R2， 所述试剂Rl和R2的组成如下： 试剂Rl含有： 缓冲液 200mmol/L 聚乙二醇-6000 10 mmol/L 防腐剂 6 mmol/L 乙二胺四乙酸 5 mmol/L 牛血清白蛋白 5 mmol/L 试剂R2含有： 缓冲液 200mmol/L 防腐剂 6 mmol/L 乙二胺四乙酸 5 mmol/L 吐温-20 1-5 mmol/L 牛血清白蛋白 5 mmol/L 抗人前白蛋白抗体 30 mmol/L。 所述的前白蛋白检测试剂盒，试剂Rl中缓冲液为25°C，pH为7. 6的Tris-Hcl缓 冲液。 所述的前白蛋白检测试剂盒，试剂R2中缓冲液为25°C，pH为7. 6的Tris-Hcl缓 冲液。 所述的前白蛋白检测试剂盒，所述防腐剂为庆大霉素。 所述前白蛋白检测试剂来检测前白蛋白的检测方法，使用全自动生化分析仪利用 终点法进行测定，检测主波长为340nm。 所述的前白蛋白检测试剂盒，其特征在于采用新型表面活性剂是吐温-20。 所述的检测方法，Rl试剂和R2试剂的比例为3:1。 本专利技术的有益效果： 1) 添加稳定剂牛血清白蛋白，大大增强了试剂的稳定性； 2) 采用新的防腐剂庆大霉素，有效解决了牛血清白蛋白容易滋长微生物的问题，并且 大大减弱了化学防腐剂对于稳定剂牛血清白蛋白稳定性影响； 3) 采用新型表面活性剂吐温-20,不仅显著改善测定的性能，而且增强了试剂的稳定 性和抗干扰能力。【附图说明】 图1为实施例2准确度验证检测实验结果与对照组检测结果相关性。 图2为实施例2稳定性验证检测实验结果。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步说明。 实施例1 一种前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒，它包括试剂Rl、试剂R2， 1) 其试剂Rl的组成为： 缓冲液 200mmol/L 聚乙二醇-6000 10 mmol/L 防腐剂 6 mmol/L 乙二胺四乙酸 5 mmol/L 牛血清白蛋白 5 mmol/L 2) 其试剂R2的组成为： Tris-Hcl 缓冲液 200mmol/L 防腐剂叠氮钠 6 mmol/L 乙二胺四乙酸 5 mmol/L 吐温-20 1-5 mmol/L 牛血清白蛋白 5 mmol/L 抗人前白蛋白抗体 30 mmol/L 3) 本实施例试剂的使用方法： 本实施例描述的前白蛋白检测试剂，在使用时采用具有双试剂功能的全自动生化分析 仪，如日立7180全自动分析仪等，利用终点法进行测定。将Rl和R2按照3:1的比例放置 到对应的试剂位上，在样品盘的对应位置放置好蒸馏水、标准品和样本，操作如表1。 表1实施例1试剂检测方法计算：前白蛋白含量（以111〇1/1)=(八厶测定+六厶标准）\(：标准。 实施例2 相关性实验 将实施例1的试剂盒作为实验组，市场上获得认可的一种准确度优异的前白蛋白试剂 盒作为对照组进行对比实验，对20个样本进行检测，检测结果如表2所示，并获得了两种试 剂的相关性曲线（如图1所示)。通过检测结果显示，两种试剂盒与市场优异的试剂盒有很 大的相关性。 表2实施例1试剂与市场常见并得到认可的前白蛋白测定试剂盒对比检测结果 CN 105137090 A h/l 4/4 贝ο 实施例3 试剂的稳定性对比试验 对实施例1中的试剂，均匀分装13组，每组的试剂量为Rl为20mL，R2为5mL ;并且取 13组市场常见的国家食品药品监督管理局认可的某公司的前白蛋白试剂盒作对照。放置到 2-8°C冰箱中，每月的同一天取出一组试剂检测样品。检测结果如图2所示，实施例1试剂 在2-8°C储存条件下比市场常见的前白蛋白测定试剂盒更加稳定。 综上分析，本专利技术提供的前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒，在试剂R2中通过加入 一定量的牛血清白蛋白，以及将防腐剂替换成庆大霉素能够有效的提高试剂盒的稳定性， 试剂的准确度。因此，本专利技术提供的前白蛋白免疫比浊法试剂盒有利于在市场中进一步推 广使用。【主权项】1. 一种准确度高的前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于包括试剂Rl和试剂 R2,所述试剂Rl和试剂R2组成如下： 1) 试剂Rl的组成为： Tris-Hcl 缓冲液 200mmol/L 聚乙二醇-6000 10 mmol/L 防腐剂庆大霉素 6 mmo本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种准确度高的前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒，其特征在于包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1和试剂R2组成如下：1）试剂R1的组成为：Tris‑Hcl缓冲液 200mmol/L聚乙二醇‑6000 10 mmol/L防腐剂庆大霉素 6 mmol/L乙二胺四乙酸 5 mmol/L牛血清白蛋白 5 mmol/L2）试剂R2的组成为：Tris‑Hcl缓冲液 200mmol/L防腐剂庆大霉素 6 mmol/L乙二胺四乙酸 5 mmol/L牛血清白蛋白 5 mmol/L抗人前白蛋白抗体 30 mmol/L 。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：甘宜梧，刘慧，王春艳，谭柏清，
申请(专利权)人：山东博科生物产业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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